Wpływ egzogennego glukagonopodobnego peptydu 2 na wywołane przez cholecystokininę opróżnianie pęcherzyka żółciowego

Tło

CEL BADANIA Celem badania jest zbadanie, czy egzogenny GLP-2 może przeciwdziałać skurczowi pęcherzyka żółciowego indukowanemu przez CCK

PROJEKT BADANIA Badanie jest randomizowanym, podwójnie zaślepionym, kontrolowanym placebo badaniem naprzemiennym, w którym bierze udział 15 zdrowych uczestników. Każdy uczestnik przejdzie cztery oddzielne dni nauki w losowej kolejności. Każdy dzień badania obejmuje dwa wlewy dożylne (iv), jeden z CCK (0,4 pmol × kg^-1 × min^-1) lub placebo (sól fizjologiczna) i jeden z GLP-2 (10 pmol × kg^-1 × min ^-1) lub placebo (sól fizjologiczna): dzień A, CCK + GLP-2; Dzień B, CCK + placebo; Dzień C, placebo + GLP-2; Dzień D, placebo + placebo.

METODY Dla każdego uczestnika badanie składa się z wizyty informacyjnej, wizyty przesiewowej i czterech dni eksperymentalnych w okresie minimum 2 miesięcy, z co najmniej trzema dniami między każdym dniem eksperymentalnym, z procedurami wyjaśnionymi poniżej.

REKRUTACJA UCZESTNIKÓW Z zainteresowanymi osobami, które wcześniej brały udział w badaniach w ośrodku badawczym wykonawców iw tym czasie wyraziły zgodę na ponowny kontakt w sprawie innych projektów badawczych, skontaktujemy się telefonicznie lub mailowo. Alternatywnie, reklamy dotyczące projektu zostaną opublikowane na stronie www.forsoegsperson.dk, inne odpowiednie strony internetowe / mediów społecznościowych i/lub gazety lokalne lub krajowe. Osoby, które odpowiedzą pozytywnie otrzymają pisemną informację. Kilka dni po otrzymaniu pisemnej informacji skontaktujemy się z potencjalnym uczestnikiem i jeśli osoba ta będzie nadal zainteresowana udziałem, zostanie ustawiona wizyta informacyjna. Jeśli dana osoba zdecyduje się na udział, uzyskana zostanie pisemna zgoda. Uzyskanie pisemnej zgody zostanie odroczone, jeśli potencjalny uczestnik będzie potrzebował więcej czasu na zastanowienie. Po uzyskaniu pisemnej zgody planowany jest termin wizyty przesiewowej.

DNI EKSPERYMENTÓW Wszystkie eksperymenty są przeprowadzane w ośrodku badawczym badaczy w Centrum Klinicznych Badań Metabolicznych w szpitalu Gentofte, gdzie dostępny jest cały niezbędny sprzęt i wiedza specjalistyczna. Jeśli uczestnicy mają jakieś trwające leczenie, uczestnik zostanie poinformowany o konieczności przerwania leczenia na tydzień przed każdym dniem eksperymentu. Czas trwania każdego dnia eksperymentalnego będzie wynosił około 5 godzin.

Po przybyciu do ośrodka badawczego po całonocnym (10h) poście (obejmującym wodę, kawę i lekarstwa) uczestnik zostanie poproszony o opróżnienie pęcherza moczowego i pobrane zostaną dwie próbki moczu. Dwa cewniki dożylne (iv) zostaną następnie wprowadzone do żył łokciowych (po jednym w każdym ramieniu). Jeden do pobierania próbek krwi i jeden do podawania CCK/placebo i GLP-2/placebo. Przedramię, z którego pobierane są próbki krwi, będzie owinięte w podkładkę grzewczą (40-45°C) przez cały czas trwania eksperymentu w celu arterializacji krwi żylnej. Uczestnik odpoczywa około 30 minut przed rozpoczęciem procedur eksperymentalnych. W czasie 0 min rozpocznie się infuzja CCK/placebo. W czasie 30 min rozpocznie się infuzja GLP-2/placebo. W czasie -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 i 240 min wysokość, szerokość i długość pęcherzyka żółciowego zostaną określone za pomocą badań ultrasonograficznych w celu oceny pęcherzyka żółciowego objętość (obliczona metodą elipsoidy). Próbki krwi będą pobierane w godzinach -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 i 240 min. Ciśnienie krwi i tętno będą mierzone w czasie -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 i 240 min. Apetyt uczestników zostanie oceniony za pomocą wizualnej skali analogowej (VAS) w czasie -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 i 240 min. W czasie 180 minut infuzja CCK/placebo zostanie zatrzymana. W czasie 240 minut infuzja GLP-2/placebo zostanie zatrzymana. Po 240 minutach uczestnicy otrzymują wystandaryzowany posiłek ad libitum składający się z mięsa mielonego, makaronu, kukurydzy, marchwi, papryki, śmietany oraz soli i pieprzu. Uczestnicy są instruowani, aby jeść tak dużo, jak tylko mogą, aż poczują się komfortowo syci. Posiłek ma być spożyty w ciągu 30 minut, a przed i po apetyt uczestników zostanie oceniony przez VAS. Po posiłku uczestnik zostanie ponownie poproszony o opróżnienie pęcherza moczowego i zostaną pobrane dwie próbki moczu.

Dane z dni badania zostaną zapisane w formularzach raportów klinicznych.

METODY LABORATORYJNE W celu pomiaru stężenia glukozy w osoczu przy łóżku pacjenta, krew zostanie pobrana do probówek pokrytych fluorkiem sodu, natychmiast odwirowana w temperaturze pokojowej i poddana analizie na analizatorze glukozy. W celu analizy stężeń w osoczu hormonów pochodzenia jelitowego rozkładanych przez DPP-4 krew zostanie pobrana do schłodzonych probówek (na lodzie) zawierających EDTA i specyficzny inhibitor DPP-4 pirolidyd waliny (0,01 ml 1 mmol/l roztworu waliny-pirolidydu - 4,3 mg w 20 ml sterylnej wody/ml krwi). W celu analizy stężeń w surowicy innych drugorzędowych punktów końcowych krew zostanie pobrana do zwykłych probówek z aktywatorem krzepnięcia w celu krzepnięcia (10 minut w temperaturze pokojowej). Probówki z EDTA i zwykłe będą wirowane przez 15 minut w temperaturze 4°C. Próbki osocza/surowicy będą przechowywane do czasu analizy w temperaturze -20°C lub -80°C.

STATYSTYKI I OBLICZENIA Dane będą przetwarzane i prezentowane z wykorzystaniem standardowych statystyk opisowych. Powierzchnia pod krzywą (AUC) zostanie obliczona przy użyciu reguły trapezów. Wyniki zostaną przedstawione jako średnia i odchylenie standardowe (SD) oraz jako AUC odjęte od wartości początkowej (bsAUC). Dane o rozkładzie normalnym zostaną porównane przy użyciu jednokierunkowej analizy wariancji z powtarzanymi pomiarami. Analiza wariancji z powtarzanymi pomiarami zostanie wykorzystana do analizy statystycznej powtarzanych pomiarów u tego samego uczestnika. Dane, które nie mają rozkładu normalnego, zostaną przeanalizowane przy użyciu testów nieparametrycznych. Wartości P <0,05 będą uważane za statystycznie istotne, tj. poziom istotności (α) równy 5%. Moc badania (1-β) przyjęto na poziomie 80%, gdzie β (20%) to ryzyko przyjęcia hipotezy, która jest fałszywa.

Liczebność populacji (N) obliczono za pomocą wzoru:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), gdzie Za jest wartością tabeli zgodnie z dwustronnym standardowym rozkładem normalnym (1,96), Zb jest wartością tabeli zgodnie z jedynką dwustronny standardowy rozkład normalny (0,84). MIREDIF to minimalna istotna różnica. SD i MIREDIF ocenia się jako bsAUC dla objętości pęcherzyka żółciowego.

Badacze planują zarejestrować 15 uczestników. W poprzednim badaniu z opróżnianiem pęcherzyka żółciowego wywołanym przez CCK bsAUC (0-120) dla objętości pęcherzyka żółciowego wynosiło -1791 ml × min i SD 795,2 ml × min. Na podstawie tych wartości można wykryć 30% różnicę w bsAUC dla objętości pęcherzyka żółciowego.