Het effect van exogeen glucagonachtig peptide 2 op door cholecystokinine geïnduceerde galblaaslediging

Achtergrond

DOEL VAN DE STUDIE Het doel van de studie is om te onderzoeken of exogeen GLP-2 CCK-geïnduceerde galblaascontractie kan overrulen

ONDERZOEKSOPZET De studie is een gerandomiseerde, dubbelblinde, placebogecontroleerde, cross-over studie met 15 gezonde deelnemers. Elke deelnemer doorloopt vier afzonderlijke studiedagen in willekeurige volgorde. Elke studiedag omvat twee intraveneuze (iv) infusies, één met CCK (0,4 pmol × kg^-1 × min^-1) of placebo (zoutoplossing) en één met GLP-2 (10 pmol × kg^-1 × min ^-1) of placebo (zoutoplossing): Dag A, CCK + GLP-2; Dag B, CCK + placebo; Dag C, placebo + GLP-2; Dag D, placebo + placebo.

METHODEN Voor elke deelnemer bestaat het onderzoek uit een informatiebezoek, een screeningbezoek en vier experimentele dagen binnen een tijdsperiode van minimaal 2 maanden, en met een minimum van drie dagen tussen elke experimentele dag met onderstaande procedures.

REKRUTERING VAN DEELNEMERS Relevante personen die eerder hebben deelgenomen aan onderzoeken in de onderzoeksfaciliteit van de onderzoekers en op dat moment hebben geaccepteerd om opnieuw gecontacteerd te worden met betrekking tot andere onderzoeksprojecten, zullen per telefoon of e-mail worden gecontacteerd. Als alternatief zullen advertenties met betrekking tot het project worden gepubliceerd op www.forsoegsperson.dk, andere relevante internet/social media pagina's en/of lokale of landelijke dagbladen. Personen die positief reageren, ontvangen de schriftelijke informatie. Enkele dagen na ontvangst van de schriftelijke informatie wordt contact opgenomen met de potentiële deelnemer en wordt er, indien de persoon nog geïnteresseerd is in deelname, een informatiebezoek georganiseerd. Als de persoon besluit deel te nemen, wordt schriftelijke toestemming verkregen. Het verkrijgen van schriftelijke toestemming wordt uitgesteld indien de potentiële deelnemer meer bedenktijd nodig heeft. Na verkregen schriftelijke toestemming wordt de datum voor het screeningsbezoek gepland.

EXPERIMENTELE DAGEN Alle experimenten worden uitgevoerd in de onderzoeksfaciliteit van de onderzoekers in het Centrum voor Klinisch Metabool Onderzoek in het Gentofte Ziekenhuis, waar alle benodigde apparatuur en expertise aanwezig zijn. Als deelnemers een lopende medische behandeling ondergaan, wordt de deelnemer geïnformeerd om de behandeling een week voorafgaand aan elke experimentele dag te onderbreken. De duur van elke experimentele dag zal ongeveer 5 uur zijn.

Na aankomst in de onderzoeksfaciliteit na een nacht (10 uur) vasten (inclusief water, koffie en medicijnen), wordt de deelnemer gevraagd de urineblaas te legen en worden er twee urinemonsters verzameld. Vervolgens worden twee intraveneuze (iv) katheters in de cubitale aderen ingebracht (één in elke arm). Eén voor afname van bloedmonsters en één voor toediening van CCK/placebo en GLP-2/placebo. De onderarm waaruit bloed wordt afgenomen, wordt gedurende het hele experiment in een verwarmingskussen (40-45°C) gewikkeld voor arterialisatie van veneus bloed. De deelnemer rust ongeveer 30 minuten voor aanvang van de experimentele procedures. Op tijdstip 0 min wordt CCK/placebo-infusie gestart. Op tijdstip 30 min wordt de GLP-2/placebo-infusie gestart. Op tijd -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 en 240 min, zullen de hoogte, breedte en lengte van de galblaas worden bepaald door middel van echografie voor evaluatie van de galblaas volume (berekend volgens de ellipsoïdemethode). Bloedmonsters worden genomen op tijd -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 en 240 min. Bloeddruk en hartslag worden gemeten op tijd -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 en 240 min. De eetlust van de deelnemers wordt beoordeeld door Visual Analogue Scale (VAS) op tijd -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 en 240 min. Op tijdstip 180 min wordt de CCK/placebo-infusie gestopt. Op tijdstip 240 min wordt de GLP-2/placebo-infusie gestopt. Na 240 min krijgen de deelnemers een gestandaardiseerde ad libitum maaltijd bestaande uit gehakt, pasta, mais, wortelen, pepers, room en zout en peper. Deelnemers worden geïnstrueerd om zoveel mogelijk te eten totdat ze zich comfortabel verzadigd voelen. De maaltijd dient binnen 30 minuten genuttigd te worden, en voor en na wordt de eetlust van de deelnemers beoordeeld door VAS. Na de maaltijd wordt de deelnemer opnieuw gevraagd de urineblaas te ledigen en worden er twee urinemonsters afgenomen.

Gegevens van de studiedagen worden vastgelegd in Clinical Report Forms.

LABORATORIUMMETHODEN Voor het meten van plasmaglucose aan het bed wordt bloed afgenomen in met natriumfluoride gecoate buisjes, onmiddellijk gecentrifugeerd bij kamertemperatuur en geanalyseerd op een glucoseanalysator. Voor analyse van plasmaconcentraties van door DPP-4 afgebroken hormonen uit de darm wordt bloed afgenomen in gekoelde buisjes (op ijs) met EDTA en de specifieke DPP-4-remmer valine-pyrrolidide (0,01 ml van 1 mmol/l valine-pyrrolidide-oplossing - 4,3 mg in 20 ml steriel water/ml bloed). Voor analyse van serumconcentraties van andere secundaire eindpunten wordt bloed afgenomen in gewone buisjes met stollingsactivator voor coagulatie (10 minuten bij kamertemperatuur). EDTA- en gewone buisjes worden gedurende 15 minuten en 4°C gecentrifugeerd. Plasma-/serummonsters worden tot analyse bij -20°C of -80°C bewaard.

STATISTIEKEN EN BEREKENINGEN Gegevens worden verwerkt en gepresenteerd met behulp van standaard beschrijvende statistieken. De oppervlakte onder de curve (AUC) wordt berekend met behulp van de trapeziumregel. Resultaten worden gerapporteerd als gemiddelde en standaarddeviatie (SD) en als basislijn afgetrokken AUC (bsAUC). Normaal verdeelde gegevens zullen worden vergeleken met behulp van eenzijdig herhaalde metingen van variantieanalyse. Variantieanalyse van herhaalde metingen wordt gebruikt voor statistische analyse van herhaalde metingen bij dezelfde deelnemer. Gegevens die niet normaal verdeeld zijn, worden geanalyseerd met behulp van niet-parametrische tests. P-waarden <0,05 worden als statistisch significant beschouwd, d.w.z. een significantieniveau (α) van 5%. De power van het onderzoek (1-β) is ingesteld op 80%, waarbij β (20%) het risico is van het accepteren van een hypothese die onjuist is.

De populatiegrootte (N) is berekend met de formule:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), waarbij Za een tabelwaarde is volgens een tweezijdige standaard normale verdeling (1,96), Zb een tabelwaarde is volgens een -zijdige standaard normale verdeling (0,84). MIREDIF is het minimale relevante verschil. SD en MIREDIF worden beoordeeld als bsAUC voor galblaasvolume.

De onderzoekers zijn van plan om 15 deelnemers in te schrijven. In een eerdere studie met CCK-geïnduceerde galblaaslediging was bsAUC (0-120) voor galblaasvolume -1791 ml × min en SD 795,2 ml × min. Op basis van deze waarden kan een verschil van 30% in bsAUC voor galblaasvolume worden gedetecteerd.