L'effetto del peptide 2 esogeno simile al glucagone sullo svuotamento della cistifellea indotto dalla colecistochinina

Sfondo

SCOPO DELLO STUDIO Lo scopo dello studio è indagare se il GLP-2 esogeno può annullare la contrazione della cistifellea indotta da CCK

DISEGNO DELLO STUDIO Lo studio è uno studio crossover randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo, che ha arruolato 15 partecipanti sani. Ogni partecipante sarà sottoposto a quattro giorni di studio separati in ordine casuale. Ogni giornata di studio comprende due infusioni endovenose (iv), una con CCK (0,4 pmol × kg^-1 × min^-1) o placebo (soluzione fisiologica) e una con GLP-2 (10 pmol × kg^-1 × min ^-1) o placebo (soluzione salina): Giorno A, CCK + GLP-2; Giorno B, CCK + placebo; Giorno C, placebo + GLP-2; Giorno D, placebo + placebo.

METODI Per ciascun partecipante, lo studio consiste in una visita informativa, una visita di screening e quattro giorni sperimentali entro un periodo di tempo minimo di 2 mesi e con un minimo di tre giorni tra ogni giorno sperimentale con le procedure spiegate di seguito.

RECLUTAMENTO DEI PARTECIPANTI Le persone rilevanti, che hanno precedentemente partecipato a sperimentazioni presso la struttura di ricerca dei ricercatori e in quel momento hanno accettato di essere ricontattate in merito ad altri progetti di ricerca, saranno contattate telefonicamente o via e-mail. In alternativa, gli annunci relativi al progetto saranno pubblicati su www.forsoegsperson.dk, altre pagine internet/social media rilevanti e/o testate giornalistiche locali o nazionali. Le persone che rispondono positivamente riceveranno l'informativa scritta. Un paio di giorni dopo aver ricevuto le informazioni scritte, il potenziale partecipante verrà contattato e, se la persona è ancora interessata a partecipare, verrà organizzata una visita informativa. Se la persona decide di partecipare, sarà ottenuto il consenso scritto. L'ottenimento del consenso scritto sarà posticipato se il potenziale partecipante richiede più tempo per essere considerato. Dopo aver ottenuto il consenso scritto viene pianificata la data per la visita di screening.

GIORNATE SPERIMENTALI Tutti gli esperimenti vengono condotti presso la struttura di ricerca dei ricercatori presso il Centro per la Ricerca Metabolica Clinica dell'Ospedale Gentofte, dove sono disponibili tutte le attrezzature e le competenze necessarie. Se i partecipanti hanno cure mediche in corso, il partecipante verrà informato di sospendere il trattamento una settimana prima di ogni giorno sperimentale. La durata di ciascuna giornata sperimentale sarà di circa 5 ore.

Dopo essere arrivato alla struttura di ricerca dopo un digiuno notturno (10 ore) (inclusi acqua, caffè e medicine), al partecipante verrà chiesto di svuotare la vescica urinaria e vengono raccolti due campioni di urina. Verranno quindi inseriti due cateteri endovenosi (iv) nelle vene cubitali (uno per braccio). Uno per la raccolta dei campioni di sangue e uno per la somministrazione di CCK/placebo e GLP-2/placebo. L'avambraccio da cui vengono prelevati i campioni di sangue sarà avvolto in una piastra riscaldante (40-45°C) durante l'esperimento per l'arterializzazione del sangue venoso. Il partecipante riposerà circa 30 minuti prima dell'inizio delle procedure sperimentali. Al tempo 0 min, verrà avviata l'infusione di CCK/placebo. Dopo 30 minuti verrà avviata l'infusione di GLP-2/placebo. Al tempo -15, 0, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 195, 210 e 240 min, l'altezza, la larghezza e la lunghezza della cistifellea saranno determinate mediante scansioni ecografiche per la valutazione della cistifellea volume (calcolato con il metodo dell'ellissoide). I campioni di sangue saranno raccolti al tempo -15, 0, 10, 30, 40, 50, 70, 100, 140, 180, 210 e 240 min. La pressione sanguigna e la frequenza cardiaca saranno misurate al tempo -15, 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 e 240 min. L'appetito dei partecipanti sarà valutato dalla Visual Analogue Scale (VAS) al tempo -15, 0, 15, 45, 75, 105, 135, 180, 210 e 240 min. Al tempo 180 min verrà interrotta l'infusione di CCK/placebo. Al tempo 240 min l'infusione di GLP-2/placebo verrà interrotta. A 240 minuti, i partecipanti ricevono un pasto standardizzato ad libitum composto da carne macinata, pasta, mais, carote, peperoni, panna e sale e pepe. I partecipanti sono istruiti a mangiare quanto più possibile fino a quando non si sentono comodamente pieni. Il pasto deve essere consumato entro 30 minuti, e prima e dopo l'appetito dei partecipanti sarà valutato dal VAS. Dopo il pasto al partecipante verrà nuovamente chiesto di svuotare la vescica urinaria e verranno raccolti due campioni di urina.

I dati dei giorni di studio saranno registrati nei moduli dei rapporti clinici.

METODI DI LABORATORIO Per la misurazione della glicemia al letto del paziente, il sangue sarà prelevato in provette rivestite di fluoruro di sodio, centrifugato immediatamente a temperatura ambiente e analizzato su un analizzatore di glucosio. Per l'analisi delle concentrazioni plasmatiche degli ormoni derivati ​​dall'intestino degradati dal DPP-4, il sangue sarà raccolto in provette refrigerate (su ghiaccio) contenenti EDTA e lo specifico inibitore DPP-4 valina-pirrolidide (0,01 ml di 1 mmol/l di soluzione di valina-pirrolidide - 4,3 mg in 20 ml di acqua sterile/ml di sangue). Per l'analisi delle concentrazioni sieriche di altri endpoint secondari, il sangue verrà prelevato in provette lisce con attivatore del coagulo per la coagulazione (10 minuti a temperatura ambiente). EDTA e provette lisce saranno centrifugate per 15 minuti ea 4°C. I campioni di plasma/siero saranno conservati a -20°C o -80°C fino all'analisi.

STATISTICHE E CALCOLI I dati saranno elaborati e presentati con l'utilizzo di statistiche descrittive standard. L'area sotto la curva (AUC) sarà calcolata utilizzando la regola del trapezio. I risultati saranno riportati come media e deviazione standard (SD) e come basale sottratto AUC (bsAUC). I dati normalmente distribuiti saranno confrontati utilizzando l'analisi della varianza a misurazioni ripetute unidirezionali. L'analisi della varianza delle misurazioni ripetute verrà utilizzata per l'analisi statistica delle misurazioni ripetute nello stesso partecipante. I dati che non sono normalmente distribuiti saranno analizzati utilizzando test non parametrici. I valori P <0,05 saranno considerati statisticamente significativi, ovvero un livello di significatività (α) del 5%. La potenza dello studio (1-β) è fissata all'80%, dove β (20%) è il rischio di accettare un'ipotesi falsa.

La dimensione della popolazione (N) è stata calcolata utilizzando la formula:

N = (Za + Zb)^2 × (SD^2)/(MIREDIF^2), dove Za è un valore di tabella secondo una distribuzione normale standard a due code (1.96), Zb è un valore di tabella secondo una distribuzione uno distribuzione normale standard a due lati (0,84). MIREDIF è la differenza minima rilevante. SD e MIREDIF sono valutati come bsAUC per il volume della cistifellea.

Gli investigatori prevedono di arruolare 15 partecipanti. In uno studio precedente con lo svuotamento della cistifellea indotto da CCK bsAUC (0-120) per il volume della cistifellea era -1791 ml × min e SD 795,2 ml × min. Sulla base di questi valori può essere rilevata una differenza del 30% in bsAUC per il volume della cistifellea.