Prevence srdeční a vaskulární dysfunkce související s věkem pomocí Avmacol ES (CardiacAging)

Design studie: Máme v úmyslu zahrnout 200 jedinců (100 mužů a 100 žen, ≥60 let) s diagnózou srdečního selhání se zachovanou ejekční frakcí (HFpEF), kteří jsou schopni ujít alespoň 500 stop, aby se zúčastnili randomizované kontrolované , dvojitě zaslepená studie, s léčbou Sulforaphane (SFN) nebo placebem po dobu 24 týdnů. Tyto potenciální subjekty budou zařazeny do randomizované, kontrolované, dvojitě zaslepené pilotní studie srovnávající SFN s placebem. Studie bude provedena v Texas Tech University Health Sciences Center a University Medical Center. Zkouška je schválena naší místní IRB (ČÍSLO IRB: L22-024, DATUM SCHVÁLENÍ IRB: 14. 12. 2021) a bude registrována na webu clinictrials.gov. Dobře vyškolené sestry z Clinical Research Institute, TTUHSC obdrží placebo a testovanou sloučeninu od dodavatele a budou je vydávat testovaným subjektům.

Informace o sulforafanu a placebu. Zpracovaný extrakt bohatý na SFN bude zakoupen od Nutramax Laboratories, Inc. 2208 Lakeside Blvd Edgewood, MD 21040. Kaplety obsahující extrakty brokolicových klíčků bohaté na SFN nebo placebo kapsle obsahující mikrokrystalickou celulózu budou získány od Nutramax Labs. Studijní léky budou vydávány v uzavřených lahvičkách s pokyny k jejich uchování v domácí mrazničce. Velikost tobolky bude přibližně velikosti 1000 mg pilulky Vit C (asi 2 cm na délku). Účastníkům budou dávkovány na základě hmotnosti dvojitě zaslepeným způsobem identicky vypadající placebo nebo SFN kaplety. Účastníci budou instruováni, aby užívali denní dávku po dobu 24 týdnů na základě hmotnosti účastníků. Dvě kapsle pro jedince <100 lb., tři kapsle pro jedince 100-200 lb. a čtyři kapsle pro jedince >200 lb. SFN (Avmacol Extra Strength) nebo placebo budou předepsány lékařem studie a budou vydány koordinátory studie v TTUHSC Lubbock. Bude provedeno sčítání pilulek k prokázání souladu.

Studované léky dorazí předem zabalené a budou uloženy v chladničce s mrazákem v Ústavu klinického výzkumu TTUHSC na základě pokynů výrobce a budou vydány každému účastníkovi při jeho základní návštěvě a při návštěvě po 12 týdnech. Od pacientů se očekává, že zachovají alespoň 80% dodržování léčebného režimu, pokud nedochází k prohibitivní toxicitě. Dodržování bude sledováno prostřednictvím počtu pilulek. Subjekty, které nesplňují 80% shodu při dotazování na telefonické návštěvy a při počítání pilulek po 12 týdnech, budou poučeny o důležitosti užívání pilulek podle pokynů, ale pokud prokáží méně než 80% shodu v průměru po více než 2 roky osobní a/nebo telefonické studijní návštěvy, budou ze studie vyřazeni a jejich údaje nebudeme používat. Pokud jsou zaznamenány nežádoucí účinky, pacient bude požádán, aby je oznámil studijnímu týmu a bude vyhodnocen ve vhodném časovém rámci na základě závažnosti vedlejších účinků.

SFN je bezpečný přírodní izolát. Dávky, které se používají v této studii, jak je popsáno výše (30 mg/kapleta), jsou považovány za adekvátní k udržení zamýšlených terapeutických hladin léčiva při zachování jednoduchého designu studie bez významných obav z toxicity léčiva. SFN byl použit v několika klinických studiích v dávkách v rozmezí 2-200 µmol/den po dobu 2-28 týdnů u 25-80 letých subjektů bez významných vedlejších účinků nebo toxicity (https://clinicaltrials.gov/ct2/results?term =sulforaphane&Search=Hledat ).

Analýza dat a statistické úvahy: Data budou analyzována pomocí SPSS 21.0 (pro Windows, SPSS Inc., Chicago, IL). Bude provedena deskriptivní statistika a korelační analýza. Všechny výsledky budou vyjádřeny jako průměr ± SE. Významnost rozdílu středních hodnot mezi skupinami bude zkoumána pomocí analýzy rozptylu (ANOVA) nebo, pokud předpoklady ANOVA nejsou splněny, pomocí Mann-Whitneyho (pokud mají být srovnány dvě skupiny) nebo Kruskal Wallise (pokud tři nebo má se porovnávat více skupin) neparametrický test. Po těchto testech bude případně následovat Tukeyho HSD test na průměr nebo pořadí (SPSS 21.0). Pro hodnocení změn srdeční funkce a hmoty LK v průběhu času bude použita ANOVA smíšeného designu implementovaná se zobecněnými lineárními modely. Hodnota P ≤ 0,05 bude považována za statisticky významnou.

Analýza síly: Počet subjektů na skupinu je založen na předchozích výsledcích studií s použitím anabolických látek u starších dospělých. Analýza síly za předpokladu stejné velikosti vzorku a variability mezi skupinami, α=0,05, 80% síla a 30% očekávaný rozdíl v průměrech, byla zjištěna jako n=100/skupinu, což umožňuje předpokládanou míru opotřebení 10-20%. .

Studijní návštěvy/Role subjektů: Informovaný souhlas bude získán od účastníků před jakýmikoli studijními postupy. Před a po intervenci budou subjekty testovány v kardiologické laboratoři TTUHSC/UMC, Lubbock. Subjekty podstoupí základní zdravotní screening, který bude zahrnovat dotazník o zdravotním stavu (SF-36), který se bude opakovat ve 12. a 24. týdnu.

Echokardiografie. Echokardiografie bude provedena v TTUHSC/UMC Cardiology Lab za použití komerčně dostupné echokardiografické jednotky (Vivid E9, GE, Waukesha, WI, USA) k posouzení hmoty levé komory (LV), systolické a diastolické funkce LK, jak bylo popsáno dříve, na začátku a 24. týdenní návštěvy. Echokardiografie se sledováním skvrn bude použita k posouzení globálního podélného napětí na počátku a jeho odpovědi na léčbu. Echokardiografii budou provádět registrovaní sonografisté a interpretovat ji kardiolog s pokročilým školením v echokardiografii (certifikace úrovně 3). Sonograf i tlumočníci budou zaslepeni, pokud jde o přidělení léčby.

Reakce na cvičení. Po provedení klidového echokardiogramu budou všichni jedinci podrobeni zátěžovému testu na běžícím pásu s použitím Bruceova protokolu (na začátku, 12. a 24. týden). Testy budou prováděny standardním způsobem a zátěžová kapacita bude vyjádřena v metabolických ekvivalentech (METS), které jsou odvozeny ze standardně publikovaných nomogramů založených na čase na běžícím pásu. Provedeme také 6minutový test chůze na tvrdém, rovném povrchu na začátku a 24 týdnů k posouzení funkční kapacity.

Funkce svalů. Funkce svalů bude stanovena zavedenými testy síly a vytrvalosti. Toto jsou výše uvedené testy na běžeckém pásu a test držení ruky. Síla úchopu ruky. Síla stisku ruky bude měřena na začátku, 24 týdnů pomocí ručního dynamometru Jamar.

Vzorky krve. Před zahájením SFN (nebo placeba) na začátku a 24 týdnů za použití aseptických technik bude účastníkům odebráno přibližně 10 ml krve. Mononukleární buňky periferní krve budou izolovány do 4 hodin po odběru krve z části krve, aby se analyzovala tvorba reaktivních forem kyslíku, markery oxidačního poškození, zánětlivé signály (CRP, IL-6 a IL-10), hladiny exprese mRNA Cílové geny Nrf2 a vazba Nrf2/ARE. Jak je popsáno:

• Hodnocení oxidačního poškození. Oxidační biomarkery v kosterním svalu, jako je 8-oxo-7,8-2'-deoxyguanosin (DNA) a peroxidace lipidů (MDA), budou měřeny pomocí ELISA, spektrofotometrie, analýzy Western blot a imunohistochemie, s využitím komerčně dostupných souprav a vhodných protilátky.
• Stanovení hladin antioxidační/antielektrofilní mRNA pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase. Celková RNA bude izolována ze vzorků mononukleárních buněk kosterního svalstva a periferní krve účastníků studie metodou guanidiniumthiokyanát. Komplementární DNA bude také připravena pomocí soupravy pro syntézu cDNA (Thermo Scientific, Waltham, MA). Polymerázové řetězové reakce v reálném čase (qPCR) budou provedeny v triplikátech na DNA Engine Opticon 2 Detection System (MJ Research, Waltham, MA) s SYBR select Master mix od Applied Biosystems (Grand Island, NY).
• Kompletní krevní obraz (CBC) a testy CMP budou použity jako široký screeningový test. Pokud dojde k nežádoucí příhodě a lékař studie si myslí, že je to nezbytné pro pacientovu bezpečnost, provedou se tyto testy ke zjištění celkového zdravotního stavu jednotlivce.

Arteriální funkce. Rychlost pulzní vlny je markerem endoteliální funkce a předpovídá kardiovaskulární příhody. Subjekty podstoupí neinvazivní testování arteriální funkce na základní linii a 24 týdnů pomocí zařízení schváleného FDA (Sphygmocor XCEL) v kardiologické laboratoři TTUHSC/UMC.

Studijní populace Přijmeme až 200 dobrovolníků (100 mužů a 100 žen), ≥65 let, s diagnózou HFpEF (symptomy HF s normální EF). Účastníci budou rekrutováni z kardiologické kliniky a pomocí databáze dobrovolníků Ústavu klinického výzkumu, inzerátů, oznámení a/nebo médií. Příklady zahrnují letáky schválené IRB vyvěšené na veřejných místech na TTUHSC, na kardiologické klinice TTUHSC a inzeráty v novinách. Všechny inzeráty a náborové materiály budou schváleny IRB. Každý, kdo kontaktuje výzkumný tým v reakci na inzerát/leták, bude předem prověřen z hlediska způsobilosti ke studiu. Dobrovolníkům dáme souhlas k účasti v randomizované kontrolované, dvojitě zaslepené studii s léčbou SFN nebo placebem po dobu 24 týdnů.