Ikään liittyvien sydämen ja verisuonten toimintahäiriöiden ehkäisy Avmacol ES:n avulla (CardiacAging)

Tutkimuksen suunnittelu: Aiomme ottaa satunnaistettuun kontrolloituun tutkimukseen mukaan 200 henkilöä (100 miestä ja 100 naista, ≥60 vuotta), joilla on diagnosoitu sydämen vajaatoiminta, jossa on säilynyt ejektiofraktio (HFpEF) ja jotka pystyvät kävelemään vähintään 500 jalkaa. , kaksoissokkotutkimus, sulforafaani (SFN) tai lumelääke 24 viikon ajan. Nämä mahdolliset koehenkilöt rekrytoidaan satunnaistettuun, kontrolloituun, kaksoissokkoutettuun pilottitutkimukseen, jossa verrataan SFN:ää lumelääkkeeseen. Tutkimus suoritetaan Texas Tech University Health Sciences Centerissä ja University Medical Centerissä. Tutkimuksen on hyväksynyt paikallinen IRB (IRB-NUMERO: L22-024, IRB-HYVÄKSYNTÄPÄIVÄMÄÄRÄ: 14.12.2021), ja se rekisteröidään osoitteessa klinikan.gov. TTUHSC:n Kliinisen tutkimuslaitoksen hyvin koulutetut sairaanhoitajat saavat lumelääkkeen ja testiyhdisteen toimittajalta ja jakavat niitä koehenkilöille.

Tietoja sulforafaanista ja lumelääkkeestä. Käsitelty runsaasti SFN-uute hankitaan Nutramax Laboratories, Inc:ltä. 2208 Lakeside Blvd Edgewood, MD 21040. SFN-rikkaita parsakaalin versouutteita sisältävät kapletit tai mikrokiteistä selluloosaa sisältävät plasebokapletit hankitaan Nutramax Labsilta. Tutkimuslääkkeet toimitetaan suljetuissa pulloissa, joissa on ohjeet kotitalouden pakastimessa säilytykseen. Kapletin koko on noin 1000 mg:n C-vitamiinipillerin koko (pituus noin 2 cm). Osallistujille annostellaan painon perusteella kaksoissokkomenetelmällä identtisiä lume- tai SFN-kapletteja. Osallistujia neuvotaan ottamaan päivittäinen annos 24 viikon ajan osallistujien painon perusteella. Kaksi kaplettia henkilöille <100 lb., kolme kaplettia yksilöille 100-200 lb. ja neljä kaplettia henkilöille >200 lb. Tutkimuslääkäri määrää SFN:n (Avmacol Extra Strength) tai lumelääkkeen, ja TTUHSC Lubbockin tutkimuskoordinaattorit jakavat ne. Pillerit lasketaan noudattamisen osoittamiseksi.

Tutkimuslääkkeet saapuvat valmiiksi pakattuna ja säilytetään TTUHSC:n Kliinisen tutkimuslaitoksen jääkaapissa pakastimessa valmistajakohtaisten ohjeiden mukaisesti ja jaetaan jokaiselle osallistujalle lähtötilanteessa ja 12 viikon käynnillä. Potilaiden odotetaan noudattavan lääkitystä vähintään 80-prosenttisesti ilman estävää toksisuutta. Hoitoa seurataan pillerimäärien avulla. Koehenkilöille, jotka eivät täytä 80-prosenttista suostumusta kysyttäessä puhelinkäynnillä ja 12 viikon pillerimäärällä, opastetaan pillereiden ottamisen tärkeydestä ohjeiden mukaisesti, mutta jos he osoittavat alle 80-prosenttista hoitoa keskimäärin yli 2 vuoden ajan. henkilö- ja/tai puhelinopintokäynnit, heidät poistetaan tutkimuksesta, emmekä käytä heidän tietojaan. Jos sivuvaikutuksia havaitaan, potilasta pyydetään ilmoittamaan niistä tutkimusryhmälle ja hänet arvioidaan sopivan ajan kuluessa sivuvaikutusten vakavuuden perusteella.

SFN on turvallinen luonnollinen isolaatti. Tässä tutkimuksessa yllä kuvatulla tavalla käytettyjä annoksia (30 mg/kapseli) pidetään riittävinä ylläpitämään aiottuja terapeuttisia lääketasoja, säilyttäen samalla yksinkertaisen tutkimussuunnitelman ilman merkittävää huolta lääkkeen toksisuudesta. SFN:ää on käytetty useissa kliinisissä tutkimuksissa annoksilla 2-200 µmol/vrk 2-28 viikon ajan 25-80-vuotiailla koehenkilöillä ilman merkittävää sivuvaikutusta tai toksisuutta (https://clinicaltrials.gov/ct2/results?term). =sulforafaani&Haku=Haku ).

Tietojen analysointi ja tilastolliset huomiot: Tiedot analysoidaan SPSS 21.0:lla (Windows, SPSS Inc., Chicago, IL). Suoritetaan kuvaavat tilastot ja korrelaatioanalyysit. Kaikki tulokset ilmaistaan ​​keskiarvona ± SE. Ryhmien välisten keskiarvojen erojen merkitystä tutkitaan käyttämällä varianssianalyysiä (ANOVA) tai, jos ANOVA-oletukset eivät täyty, käyttämällä Mann-Whitneyä (jos kahta ryhmää verrataan) tai Kruskal Wallista (jos kolme tai useampia ryhmiä verrataan) ei-parametrinen testi. Näitä testejä seuraa Tukeyn HSD-testi mahdollisten varojen tai tasojen selvittämiseksi (SPSS 21.0). Sydämen toiminnan ja LV-massan ajan kuluessa tapahtuvien muutosten arvioimiseksi käytetään sekamuotoista ANOVAa, joka toteutetaan yleistetyillä lineaarisilla malleilla. Arvoa P ≤ 0,05 pidetään tilastollisesti merkitsevänä.

Tehoanalyysi: Koehenkilöiden lukumäärä ryhmää kohti perustuu aikaisempiin tuloksiin tutkimuksista, joissa käytettiin anabolisia aineita vanhemmilla aikuisilla. Tehoanalyysin olettaen, että otoskoko ja vaihtelu ryhmien välillä on sama, α=0,05, 80 % teho ja 30 % odotettu ero keskiarvoissa, havaittiin olevan n = 100/ryhmä, mikä mahdollistaa odotetun 10-20 %:n kulumisnopeuden. .

Opintovierailut/Kohteiden roolit: Osallistujilta hankitaan tietoinen suostumus ennen tutkimustoimenpiteitä. Ennen interventiota ja sen jälkeen koehenkilöt testataan TTUHSC/UMC:n sydänlaboratoriossa Lubbockissa. Koehenkilöille tehdään perusterveysseulonta, joka sisältää terveydentilakyselyn (SF-36), joka toistetaan viikolla 12 ja 24.

Ekokardiografia. Ekokardiografia suoritetaan TTUHSC/UMC Cardiology Labissa käyttämällä kaupallisesti saatavilla olevaa kaikukardiografiayksikköä (Vivid E9, GE, Waukesha, WI, USA) vasemman kammion massan, LV:n systolisen ja diastolisen toiminnan arvioimiseksi aiemmin kuvatulla tavalla, lähtötilanteessa ja 24. viikon vierailut. Täpliä jäljittävää kaikukardiografiaa käytetään arvioimaan maailmanlaajuista pituussuuntaista rasitusta lähtötilanteessa ja sen vastetta hoitoon. Ekokardiografian suorittavat rekisteröidyt sonografit, ja sen tulkitsee kardiologi, jolla on pitkälle koulutettu kaikukardiografia (taso 3 sertifioitu). Sekä sonografi että tulkki sokeutuvat hoidon kohdentamiseen.

Reaktio harjoitteluun. Kun lepokardiogrammi on tehty, kaikille koehenkilöille suoritetaan juoksumatolla suoritettava rasitustesti Bruce-protokollaa käyttäen (perustilanteessa 12 ja 24 viikkoa). Testit suoritetaan tavalliseen tapaan, ja harjoituskapasiteetti ilmaistaan ​​aineenvaihdunnan ekvivalentteina (METS), jotka on johdettu julkaistuista standardeista juoksumatolla käytettyyn aikaan perustuvista nomogrammeista. Suoritamme myös 6 minuutin kävelytestin kovalla, tasaisella alustalla lähtötilanteessa ja 24 viikon kuluttua toimintakyvyn arvioimiseksi.

Lihasten toiminta. Lihasten toiminta määritetään vahvistetuilla voima- ja kestävyystesteillä. Nämä ovat yllä olevat juoksumattotestit ja kädensijatesti. Käden otteen vahvuus. Käden otteen vahvuus mitataan lähtötilanteessa 24 viikon kuluttua Jamar-käsidynamometrillä.

Verinäytteitä. Osallistujilta otetaan noin 10 ml verta ennen SFN:n (tai lumelääkkeen) aloittamista lähtötilanteessa ja 24 viikon kuluttua aseptisista tekniikoista. Perifeerisen veren mononukleaarisolut eristetään 4 tunnin sisällä veren otosta osasta verta, jotta voidaan analysoida reaktiivisten happilajien muodostumista, oksidatiivisen vaurion markkereita, tulehdussignaaleja (CRP, IL-6 ja IL-10), mRNA:n ilmentymistasoja. Nrf2-kohdegeenit ja Nrf2/ARE-sitoutuminen. Kuten kuvattu:

• Oksidatiivisten vaurioiden arviointi. Luustolihasten hapettavat biomarkkerit, kuten 8-okso-7,8-2'-deoksiguanosiini (DNA) ja lipidiperoksidaatio (MDA), mitataan ELISA:lla, spektrofotometrialla, Western blot -analyysillä ja immunohistokemialla käyttäen kaupallisesti saatavilla olevia sarjoja ja asianmukaisia vasta-aineita.
• Antioksidantti/antielektrofiili-mRNA-tasojen määritys reaaliaikaisella polymeraasiketjureaktiolla. Kokonais-RNA eristetään tutkimukseen osallistuneiden luustolihasten ja perifeerisen veren mononukleaarisolunäytteistä guanidiniumtiosyanaattimenetelmällä. Täydentävä DNA valmistetaan myös käyttämällä cDNA-synteesipakkausta (Thermo Scientific, Waltham, MA). Reaaliaikaiset polymeraasiketjureaktiot (qPCR) suoritetaan kolmena rinnakkaisena DNA Engine Opticon 2 -tunnistusjärjestelmässä (MJ Research, Waltham, MA) Applied Biosystemsin (Grand Island, NY) SYBR select Master -seoksen kanssa.
• Täydellistä verenkuvaa (CBC) ja CMP-testejä käytetään laajana seulontatestinä. Jos haittatapahtuma tapahtuu ja tutkimuslääkäri pitää sitä potilaan turvallisuuden kannalta tarpeellisena, nämä testit suoritetaan yksilön yleisen terveydentilan määrittämiseksi.

Valtimoiden toiminta. Pulssiaallon nopeus on endoteelin toiminnan merkki ja ennustaa kardiovaskulaarisia tapahtumia. Koehenkilöille tehdään noninvasiiviset valtimoiden toimintatestit lähtötilanteessa ja 24 viikkoa FDA:n hyväksymällä laitteella (Sphygmocor XCEL) TTUHSC/UMC-kardiologialaboratoriossa.

Tutkimuspopulaatio Rekrytoimme enintään 200 vapaaehtoista (100 miestä ja 100 naista), ≥65-vuotiaita, joilla on diagnosoitu HFpEF (HF-oireet normaalilla EF:llä). Osallistujat rekrytoidaan Kardiologian klinikalta sekä Kliinisen tutkimuslaitoksen vapaaehtoistietokannan, ilmoitusten, tiedotteiden ja/tai median avulla. Esimerkkejä ovat IRB-hyväksytyt esitteet julkisissa tiloissa TTUHSC:ssä, TTUHSC:n kardiologian klinikalla ja sanomalehtimainokset. Kaikki ilmoitukset ja rekrytointimateriaalit ovat IRB-hyväksyttyjä. Jokaisen, joka ottaa yhteyttä tutkimusryhmään vastauksena ilmoitukseen/lehtiseen, tutkitaan etukäteen kelpoisuus tutkia. Suostamme vapaaehtoiset osallistumaan satunnaistettuun kontrolloituun kaksoissokkotutkimukseen SFN- tai lumelääkehoidolla 24 viikon ajan.