Experimentální medicína dešifruje minimální korelát buněčné imunity

Kritéria pro nábor a proces náboru: Subjekty budou rekrutovány z databáze zdravých dobrovolníků SingHealth Investigational Medicine Unit (IMU) a náborových plakátů. Subjekty obdrží kopii formuláře s informacemi o účastníkovi a informovaného souhlasu, aby si je přečetli po příjezdu. Zkoušející provede informační schůzku o studii. Poté budou subjekty uvedeny do soukromé místnosti, kde je získán informovaný souhlas a kde mohou být volně kladeny otázky týkající se studie. Subjekty nebudou spěchat do rozhodování o účasti ve studii. Budou vyzváni, aby o účasti ve studii hovořili se svými rodinnými příslušníky; a bylo jim dovoleno odložit své rozhodnutí (bez jakýchkoli předsudků) zúčastnit se až po diskusi se svými rodinnými příslušníky.

Screeningové návštěvy a postupy: Subjekty budou přijímány prostřednictvím SingHealth Investigational Medicine Unit (IMU). Informovaný písemný souhlas bude požadován od subjektů, které splňují kritéria pro zápis. Všechny schválené subjekty podstoupí screening, který zahrnuje fyzikální vyšetření, úplný krevní obraz, jaterní test, protilátky proti horečce dengue ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) a močový těhotenský test (u žen ve fertilním věku).

Těhotenský test z moči bude proveden při screeningu a v den očkování (den 0 a den 28) u žen ve fertilním věku. Pouze ti s negativním těhotenským testem v moči budou považováni za způsobilé pro studii za předpokladu, že byla splněna další kritéria způsobilosti.

Jak muži (pokud má partnerku ve fertilním věku), tak ženy (ve fertilním věku) musí souhlasit s používáním adekvátních a spolehlivých antikoncepčních opatření (např. spermicidy, kondomy, antikoncepční pilulky) nebo praktikujte abstinenci po dobu 10 dnů po očkování.

Studijní návštěvy a postupy: 58 subjektů bude randomizováno do 1 ze 2 ramen (rameno B1 a rameno B2) v poměru 1:1, dvojitě zaslepeným způsobem. Subjekty v rameni B1 dostanou vakcínu JE-YF17D (Imojev, Sanofi Pasteur) v den 0 a následně vakcínu YF17D (Stamaril, Sanofi Pasteur) v den 28. Subjekty v rameni B2 dostanou Stamaril v den 0 následovaný Imojevem v den 28. Rameno B3 bude provedeno jako samostatný jednoramenný otevřený štítek ve 14 předmětech. Subjekty v rameni B3 dostanou inaktivovanou vakcínu JE (Ixiaro, Valneva) v den 0 následovanou Stamarilem v den 28. Studijní návštěvy ve všech ramenech se uskuteční v den 0, 4, 7, 10, 14, 28, 29, 32, 35, 38, 42, 58. Při každé studijní návštěvě bude provedeno fyzikální vyšetření, vitální funkce a výzkumný odběr krve. V den 0 a den 28 se před vakcinací provede odběr krve.

Závěrečná studijní návštěva: Poslední studijní návštěva bude 58. den po očkování po studii.

Sledování po studii a postupy: Nejsou žádné požadavky na sledování nebo postupy po studii.

Plán monitorování bezpečnosti: Studie může být vyhodnocena vládními inspektory/regulačními orgány, kterým musí být umožněn přístup k e-CRF, zdrojovým dokumentům a dalším souborům studií. Inspektoři zkontrolují CRF a porovnají je se zdrojovými dokumenty, aby ověřili přesný a úplný sběr dat a potvrdili, že studie je prováděna v souladu s protokolem, ICH Správnou klinickou praxí (ICH-GCP) a všemi platnými předpisy.

Kdykoli po vakcinaci budou všichni jedinci vyškoleni k pozorování systémových AE. Subjektům bude také předán deník, aby zaznamenali takové události, pokud k nim během tohoto období dojde. Pokud by se u nich rozvinuly systémové symptomy, které vyžadují intervenci, ohlásí se na místo studie k lékařskému posouzení a dostanou vhodnou terapii. Doba trvání symptomů bude zaznamenána. Jakékoli souběžné užívání léků během tohoto období bude také zaznamenáno.

Během studie bude prováděno úplné odebírání anamnézy a fyzikální vyšetření při plánovaných i neplánovaných návštěvách. Úplné fyzické vyšetření bude provedeno pouze při screeningové návštěvě, zatímco krátké fyzické vyšetření bude provedeno pro všechny následující návštěvy. K definování terminologie a závažnosti AE se použijí Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE), běžně používané v klinických studiích. Léčba AE je na uvážení výzkumného týmu PI a co-Is, řídí se závažností a klinickou indikací k intervenci. Všechny léky předepsané pro léčbu AE budou zdokumentovány ve formuláři klinického záznamu o medikaci/současné medikaci. Podrobnosti o terminologii AE události, datum a čas začátku a konce události, závažnost, použití CTCAE nebo poskytnuté léčby, dopad na práci a pokračování studie a konečný výsledek události budou zaznamenány v kazuistice až do vyřešení události.

Zajištění kvality dat: PI a Co-Is budou pravidelně přezkoumávat studii za účelem monitorování dat a bezpečnosti. Interní kontroly kvality budou provádět dvě CRC, která jsou členy studijního týmu. Údaje zadané jedním CRC budou zkontrolovány jiným pomocí zdrojových dokumentů. Studie může být také vybrána ke sledování Úřadem pro integritu a shodu výzkumu SingHealth (ORIC) nebo vyhodnocena vládními inspektory/regulačními orgány, kterým musí být povolen přístup k e-CRF, zdrojovým dokumentům a dalším souborům studií. Monitorující/inspektoři mohou revidovat CRF a porovnávat je se zdrojovými dokumenty, aby ověřili přesný a úplný sběr dat a potvrdili, že studie je prováděna v souladu s protokolem, ICH-Good Clinical Practices (ICH-GCP) a všemi platnými předpisy.

Zadávání a ukládání dat: Všechna data účastníků budou při náboru zbavena identifikace. Tištěné formuláře pro sběr výzkumných dat, jako jsou CRF, protokoly a deníky, budou uchovávány v souboru vyšetřovatele a uloženy v SingHealth IMU pod zámkem, přístupné pouze delegovaným členům studijního týmu.

Přímý sběr dat demografických a klinických dat bude zachycen na zdrojových dokumentech. Identifikátory budou uchovávány v samostatné složce v jiné kanceláři a bude vynaloženo veškeré úsilí na ochranu soukromí účastníků. Data, která mají být analyzována, budou obsahovat pouze neidentifikovaná data. Bude použit elektronický systém sběru dat. Všechna elektronická data budou chráněna heslem a budou k nim mít přístup pouze členové studijního týmu. Vzorky, výsledky testů nebo údaje o patogenech budou uloženy v laboratoři Duke-NUS EID v samostatném PC, kde je přístup chráněn heslem.

Určení velikosti vzorku: Pro detekci velikosti účinku 0,8 SD v průměrné hladině virémie na log(10) stupnici mezi první a druhou se stejnou vakcínou - první dávka bude analyzována proti těm, kteří dostali YF17D po JE-YF17D a naopak - velikost vzorku 25 na skupinu poskytne 80 % výkonu při 5 % oboustranné chybovosti 1. typu. Aby se umožnilo 10 % předčasných odchodů, cílí se na celkovou velikost vzorku 28 na skupinu pro rameno B1 a B2. Pro rameno B3, což je kontrolní skupina, se použije velikost vzorku 14.

Statistický a analytický plán: Distribuční diagnostické grafy budou použity ke zkoumání tvaru distribuce počtu T-buněk bezprostředně před provokační vakcinací a následnou vakcinační virémií. Parametrické (t-test) nebo neparametrické (Mann-Whitney U) postupy budou použity k posouzení rozdílů v počtech T-buněk a různých měřených proměnných, jako je virémie, titry protilátek a hladiny cytokinů. Ke zkoumání asociace mezi hladinami T-buněk a těmito proměnnými budou podle potřeby použity Pearsonovy nebo Spearmanovy korelační koeficienty.

Frekvence hlášených příznaků a typ příznaků budou nejprve analyzovány stanovením mediánu a mezikvartilových rozsahů. Poté budeme analyzovat, jak první vakcinace ovlivní symptomatický výsledek provokační vakcinace pomocí tabulek 2x2 a analýzy chí kvadrátu nebo Fisherova exaktního testu, podle toho, co je vhodné. Parametrické (t-test) nebo neparametrické (Mann-Whitney U) postupy budou použity k posouzení rozdílů v počtech T-buněk specifických pro virus před čelenží mezi těmi se symptomy a těmi bez nich.

Testy, které budou provedeny na krevních vzorcích: DENV IgG ELISA, FBC, jaterní panel, virémie (NS5 PCR), cytokiny, Anti-NS1 Ab, studie T-buněk (AIM, ELLISPOT, ELLA), sekvenování BCR, PRNT a gen výraz.