Расшифровка экспериментальной медицины минимального коррелята клеточного иммунитета

Критерии набора и процесс набора: Субъекты будут набраны из базы данных здоровых добровольцев SingHealth Investigative Medicine Unit (IMU) и плакатов набора. Субъектам будет предоставлена ​​копия Формы информации об участнике и информированного согласия, которую они должны прочитать по прибытии. Инструктаж по исследованию будет проводиться исследователем. После этого субъекты будут проведены в отдельную комнату, где будет получено информированное согласие и где можно будет свободно задавать вопросы об исследовании. Субъекты не будут торопиться с принятием решения об участии в исследовании. Им будет предложено поговорить с членами своей семьи об участии в исследовании; и разрешили отложить свое решение (без каких-либо предубеждений) об участии до обсуждения с членами их семей.

Визиты и процедуры скрининга: Субъекты будут набираться через Отделение исследовательской медицины (IMU) SingHealth. Информированное письменное согласие будет запрашиваться у субъектов, которые соответствуют критериям для зачисления. Все субъекты, давшие согласие, пройдут скрининг, который включает физикальное обследование, общий анализ крови, тест функции печени, антитела против денге ELISA (иммуноферментный анализ) и тест мочи на беременность (для женщин детородного возраста).

Тест мочи на беременность будет проводиться при скрининге и в день вакцинации (день 0 и день 28) для женщин с детородным потенциалом. Только те, у кого отрицательный результат теста мочи на беременность, будут считаться подходящими для участия в исследовании, при условии, что были выполнены другие критерии приемлемости.

И мужчины (если у него есть партнерша с детородным потенциалом), и женщины (с детородным потенциалом) должны согласиться использовать адекватные и надежные меры контрацепции (например, спермициды, презервативы, противозачаточные таблетки) или практиковать воздержание в течение 10 дней после вакцинации.

Учебные визиты и процедуры: 58 субъектов будут рандомизированы в 1 из 2 групп (группа B1 и группа B2) в соотношении 1:1 двойным слепым методом. Субъекты группы B1 получат вакцину JE-YF17D (Imojev, Sanofi Pasteur) в день 0, а затем вакцину YF17D (Stamaril, Sanofi Pasteur) в день 28. Субъекты в группе B2 будут получать стамарил в день 0, а затем имоев в день 28. Группа B3 будет проводиться как отдельный открытый дизайн с одной группой для 14 субъектов. Субъекты группы B3 будут получать инактивированную вакцину против ЯЭ (Ixiaro, Valneva) в день 0, а затем стамарил в день 28. Учебные визиты во всех группах будут проходить в День 0, 4, 7, 10, 14, 28, 29, 32, 35, 38, 42, 58. Во время каждого исследовательского визита будет проводиться физикальное обследование, определение основных показателей жизнедеятельности и забор крови для исследования. В День 0 и День 28 перед вакцинацией будет проводиться забор крови.

Заключительный исследовательский визит: последний исследовательский визит будет на 58-й день после вакцинации.

Последующее наблюдение и процедуры после исследования: Последующее наблюдение или процедуры после исследования не требуются.

План мониторинга безопасности: исследование может быть оценено государственными инспекторами / регулирующими органами, которым должен быть разрешен доступ к электронным ИРК, исходным документам и другим файлам исследования. Инспекторы просматривают CRF и сравнивают их с исходными документами, чтобы проверить точность и полноту сбора данных и подтвердить, что исследование проводится в соответствии с протоколом, Надлежащей клинической практикой ICH (ICH-GCP) и всеми применимыми правилами.

В любое время после вакцинации все субъекты будут обучены наблюдать за системными НЯ. Субъектам также будет выдан дневник для записи таких событий, если они произойдут в течение этого периода. Если у них разовьются системные симптомы, требующие вмешательства, они обратятся в исследовательский центр для медицинского обследования и получат соответствующую терапию. Продолжительность симптомов будет записана. Любое одновременное использование лекарств в течение этого периода также будет зарегистрировано.

Во время исследования полный сбор анамнеза и медицинский осмотр будут проводиться как во время плановых, так и внеплановых посещений. Полный медицинский осмотр будет проводиться только во время скринингового визита, а краткий медицинский осмотр будет проводиться во время всех последующих посещений. Общие терминологические критерии нежелательных явлений (CTCAE), обычно используемые в клинических испытаниях, будут использоваться для определения терминологии и степени тяжести НЯ. Ведение НЯ находится на усмотрении исследовательской группы PI и co-I, руководствуясь тяжестью и клиническими показаниями к вмешательству. Все лекарства, назначенные для лечения НЯ, будут документированы в форме истории болезни лекарств/сопутствующих лекарств. Подробная информация о терминологии явления НЯ, дате и времени начала и окончания события, серьезности, использовании CTCAE или назначенного лечения, влиянии на работу и на продолжение исследования, а также окончательный результат события будут регистрироваться в отчете о случае до разрешения. события.

Обеспечение качества данных: PI и Co-I будут периодически проверять исследование на предмет данных и мониторинга безопасности. Внутренние проверки качества будут выполняться двумя CRC, которые являются членами исследовательской группы. Данные, введенные одним CRC, будут проверены другим по исходным документам. Исследование также может быть выбрано для мониторинга Управлением честности и соответствия исследований SingHealth (ORIC) или оценено государственными инспекторами/регулирующими органами, которым должен быть предоставлен доступ к электронным ИРК, исходным документам и другим файлам исследования. Наблюдатели/инспекторы могут просматривать CRF и сравнивать их с исходными документами, чтобы проверить точность и полноту сбора данных и подтвердить, что исследование проводится в соответствии с протоколом, ICH-Good Clinical Practices (ICH-GCP) и всеми применимыми правилами.

Ввод и хранение данных: все данные участников будут деидентифицированы при наборе. Печатные формы для сбора исследовательских данных, такие как CRF, журналы и дневники, будут храниться в файле сайта исследователя и храниться в SingHealth IMU под замком, доступном только для делегированных членов исследовательской группы.

Непосредственный сбор демографических и клинических данных будет зафиксирован в исходных документах. Идентификаторы будут храниться в отдельном файле в другом офисе, и будут приложены все усилия для защиты конфиденциальности участников. Анализируемые данные будут содержать только деидентифицированные данные. Будет использоваться электронная система сбора данных. Все электронные данные будут защищены паролем и могут быть доступны только членам исследовательской группы. Образцы, результаты анализов или данные о патогенах будут храниться в лаборатории EID Duke-NUS на отдельном ПК, доступ к которому защищен паролем.

Определение размера выборки: для определения величины эффекта 0,8 SD среднего уровня виремии по логарифмической (10) шкале между первой и второй дозой одной и той же вакцины - первая доза будет проанализирована в сравнении с теми, кто получил YF17D после JE-YF17D, и наоборот. - размер выборки 25 на группу обеспечит 80% мощности при 5% частоте двусторонних ошибок 1 типа. Чтобы учесть 10% досрочного отсева, общий размер выборки составляет 28 человек на группу для групп B1 и B2. Для группы B3, которая является контрольной группой, будет использоваться размер выборки 14 человек.

Статистический и аналитический план: диагностические графики распределения будут использоваться для изучения формы распределения числа Т-клеток непосредственно перед контрольной вакцинацией и последующей виремией вакцины. Параметрические (t-критерий) или непараметрические (U Манна-Уитни) процедуры будут использоваться для оценки различий в количестве Т-клеток и различных измеряемых переменных, таких как виремия, титры антител и уровни цитокинов. Коэффициенты корреляции Пирсона или Спирмена будут использоваться, в зависимости от обстоятельств, для изучения связи между уровнями Т-клеток и этими переменными.

Частота сообщаемых симптомов и тип симптомов сначала будут проанализированы путем определения медианы и межквартильных диапазонов. Затем мы проанализируем, как первая вакцинация влияет на симптоматический исход контрольной вакцины, используя таблицы 2x2 и анализ хи-квадрат или точный критерий Фишера, в зависимости от того, что подходит. Параметрические (t-критерий) или непараметрические (U Манна-Уитни) процедуры будут использоваться для оценки различий в количестве вирус-специфических Т-клеток перед заражением среди лиц с симптомами и без них.

Тесты, которые будут проводиться на образцах крови: DENV IgG ELISA, FBC, панель печени, виремия (NS5 PCR), цитокины, анти-NS1 Ab, исследования Т-клеток (AIM, ELLISPOT, ELLA), секвенирование BCR, PRNT и ген выражение.