Uma medicina experimental decifra um correlato mínimo de imunidade celular

Critérios para Recrutamento e Processo de Recrutamento: Os participantes serão recrutados a partir do banco de dados de voluntários saudáveis ​​da Unidade de Medicina Investigativa (IMU) da SingHealth e de cartazes de recrutamento. Os participantes receberão uma cópia das Informações do Participante e do Formulário de Consentimento Livre e Esclarecido para ler na chegada. Uma sessão informativa sobre o estudo será conduzida pelo Investigador. Posteriormente, os participantes serão conduzidos a uma sala privada onde o consentimento informado é obtido e onde perguntas sobre o estudo podem ser feitas livremente. Os indivíduos não serão apressados ​​em tomar a decisão de participar do estudo. Eles serão encorajados a falar com seus familiares sobre a participação no estudo; e autorizados a adiar sua decisão (sem qualquer prejuízo) de participar até depois da discussão com seus familiares.

Visitas e procedimentos de triagem: os participantes serão recrutados por meio da Unidade de Medicina Investigacional (IMU) SingHealth. O consentimento informado por escrito será solicitado aos indivíduos que preencherem os critérios de inscrição. Todos os indivíduos consentidos passarão por triagem, que inclui exame físico, hemograma completo, teste de função hepática, anticorpos anti-dengue ELISA (Ensaio de Imunoabsorção Enzimática) e teste de gravidez urinária (para mulheres com potencial para engravidar).

Um teste de gravidez de urina será realizado na triagem e no dia da vacinação (dia 0 e dia 28) para mulheres com potencial para engravidar. Somente aquelas com teste de gravidez de urina negativo serão consideradas elegíveis para o estudo, desde que outros critérios de elegibilidade tenham sido preenchidos.

Tanto os indivíduos do sexo masculino (se ele tiver um parceiro com potencial para engravidar) quanto os do sexo feminino (com potencial para engravidar) devem concordar em usar medidas contraceptivas adequadas e confiáveis ​​(por exemplo, espermicidas, preservativos, pílulas anticoncepcionais) ou praticar abstinência por 10 dias após a vacinação.

Visitas e procedimentos do estudo: 58 indivíduos serão randomizados em 1 de 2 braços (Braço B1 e Braço B2) em uma proporção de 1:1, de forma duplo-cega. Os indivíduos no braço B1 receberão a vacina JE-YF17D (Imojev, Sanofi Pasteur) no dia 0, seguida pela vacina YF17D (Stamaril, Sanofi Pasteur) no dia 28. Os indivíduos no braço B2 receberão Stamaril no dia 0, seguido de Imojev no dia 28. O braço B3 será conduzido como um projeto de rótulo aberto de braço único separado em 14 indivíduos. Os indivíduos no braço B3 receberão a vacina JE inativada (Ixiaro, Valneva) no dia 0, seguida de Stamaril no dia 28. As visitas de estudo em todos os braços ocorrerão nos dias 0, 4, 7, 10, 14, 28, 29, 32, 35, 38, 42, 58. Em cada visita do estudo, serão realizados exame físico, sinais vitais e coleta de sangue para pesquisa. No dia 0 e no dia 28, será realizada uma amostragem de sangue antes da vacinação.

Visita final do estudo: A última visita do estudo será no Dia 58 pós-vacinação do estudo.

Acompanhamento e procedimentos pós-estudo: Não há necessidade de acompanhamento ou procedimentos pós-estudo.

Plano de Monitoramento de Segurança: O estudo pode ser avaliado por inspetores governamentais/autoridades reguladoras que devem ter acesso a e-CRFs, documentos de origem e outros arquivos de estudo. Os inspetores revisarão os CRFs e os compararão com os documentos de origem para verificar a coleta de dados precisa e completa e confirmar que o estudo está sendo conduzido de acordo com o protocolo, ICH Good Clinical Practices (ICH-GCP) e todos os regulamentos aplicáveis.

A qualquer momento após a vacinação, todos os indivíduos serão treinados para observar EAs sistêmicos. Um diário também será dado aos sujeitos para registrar tais eventos, caso ocorram durante este período. Caso desenvolvam sintomas sistêmicos que requeiram intervenção, eles se reportarão ao local do estudo para avaliação médica e receberão a terapia apropriada. A duração dos sintomas será registrada. Qualquer uso concomitante de medicação durante este período também será registrado.

Durante o estudo, a anamnese completa e o exame físico serão realizados em visitas agendadas e não agendadas. Um exame físico completo só será feito na visita de triagem, enquanto um breve exame físico será feito para todas as visitas subsequentes. Os Critérios Comuns de Terminologia para Eventos Adversos (CTCAE), rotineiramente empregados em ensaios clínicos, serão usados ​​para definir a terminologia e gravidade de EA. O gerenciamento de EAs fica a critério da equipe de estudo PI e co-Is, guiada pela gravidade e indicação clínica para intervenção. Todos os medicamentos prescritos para o tratamento de EAs serão documentados no formulário de registro clínico de medicamentos/medicamentos concomitantes. Detalhes da terminologia do evento de EA, data e hora do início e término do evento, gravidade, uso do CTCAE ou tratamento dado, impacto no trabalho e na continuação do estudo e resultado final do evento serão registrados no relatório do caso até a resolução do evento.

Garantia de qualidade de dados: O PI e Co-Is revisarão o estudo periodicamente para monitoramento de dados e segurança. As verificações internas de qualidade serão realizadas por dois CRCs que são membros da equipe de estudo. Os dados inseridos por um CRC serão verificados por outro usando os documentos de origem. O estudo também pode ser escolhido para monitoramento pelo SingHealth Office of Research Integrity and Compliance (ORIC) ou avaliado por inspetores governamentais/autoridades reguladoras que devem ter acesso a e-CRFs, documentos de origem e outros arquivos de estudo. Os monitores/inspetores podem revisar os CRFs e compará-los com documentos de origem para verificar a coleta de dados precisa e completa e confirmar que o estudo está sendo conduzido de acordo com o protocolo, ICH-Boas Práticas Clínicas (ICH-GCP) e todos os regulamentos aplicáveis.

Entrada e armazenamento de dados: Todos os dados dos participantes serão desidentificados no momento do recrutamento. Formulários impressos de coleta de dados de pesquisa, como CRFs, logs e diários, serão mantidos no Arquivo do Local do Investigador e armazenados na IMU SingHealth sob sete chaves, acessíveis apenas aos membros delegados da equipe de estudo.

A captura direta de dados demográficos e clínicos será capturada em documentos de origem. Os identificadores serão mantidos em um arquivo separado em outro escritório e todos os esforços serão feitos para proteger a privacidade dos participantes. Os dados a serem analisados ​​conterão apenas dados não identificados. Será utilizado um sistema eletrônico de captura de dados. Todos os dados eletrônicos serão protegidos por senha e só podem ser acessados ​​por membros da equipe de estudo. Amostras, resultados de testes ou dados de patógenos serão armazenados no laboratório Duke-NUS EID em um PC autônomo pelo qual o acesso é protegido por senha.

Determinação do tamanho da amostra: Para detectar um tamanho de efeito de 0,8 SD no nível médio de viremia na escala log(10) entre a primeira e a segunda com a mesma vacina - a primeira dose será analisada contra aqueles que receberam YF17D após JE-YF17D e vice-versa - um tamanho de amostra de 25 por grupo fornecerá 80% de poder a 5% de taxa de erro tipo 1 bilateral. Para permitir 10% de abandono precoce, um tamanho de amostra total de 28 por grupo para o braço B1 e B2 é direcionado. Para o braço B3, que é o grupo de controle, será usado um tamanho de amostra de 14.

Plano estatístico e analítico: Os gráficos de diagnóstico distributivos serão usados ​​para examinar a forma das distribuições das contagens de células T imediatamente antes da vacinação de desafio e da subsequente viremia da vacina. Procedimentos paramétricos (teste t) ou não paramétricos (Mann-Whitney U) serão usados ​​para avaliar as diferenças nas contagens de células T e as várias variáveis ​​medidas, como viremia, títulos de anticorpos e níveis de citocinas. Os coeficientes de correlação de Pearson ou Spearman serão usados, conforme apropriado, para examinar a associação entre os níveis de células T e essas variáveis.

A frequência dos sintomas relatados e o tipo de sintomas serão primeiramente analisados ​​pela determinação da mediana e dos intervalos interquartis. Em seguida, analisaremos como a primeira vacinação afeta o resultado sintomático da vacinação de desafio usando tabelas 2x2 e análise de qui-quadrado ou teste exato de Fisher, o que for apropriado. Procedimentos paramétricos (teste t) ou não paramétricos (Mann-Whitney U) serão usados ​​para avaliar as diferenças nas contagens de células T específicas do vírus pré-desafio entre aqueles com sintomas e aqueles sem.

Testes que serão realizados nas amostras de sangue: DENV IgG ELISA, FBC, Liver Panel, Viremia (NS5 PCR), citocinas, Anti-NS1 Ab, estudos de células T (AIM, ELLISPOT, ELLA), sequenciamento de BCR, PRNT e gene expressão.