Una medicina experimental descifra un correlato mínimo de inmunidad celular

Criterios para el reclutamiento y el proceso de reclutamiento: los sujetos se reclutarán de la base de datos de voluntarios sanos de la Unidad de Medicina de Investigación (IMU) de SingHealth y de los carteles de reclutamiento. Los sujetos recibirán una copia de la Información del participante y el Formulario de consentimiento informado para leer a su llegada. El investigador llevará a cabo una sesión informativa sobre el estudio. Posteriormente, los sujetos serán conducidos a una habitación privada donde se obtiene el consentimiento informado y donde se pueden hacer preguntas libremente sobre el estudio. No se apresurará a los sujetos a tomar la decisión de participar en el estudio. Se les animará a hablar con sus familiares sobre la participación en el estudio; y se les permitió aplazar su decisión (sin ningún perjuicio) de participar hasta después de discutirlo con sus familiares.

Visitas y procedimientos de selección: los sujetos se reclutarán a través de la Unidad de Medicina de Investigación (IMU) de SingHealth. Se solicitará el consentimiento informado por escrito de los sujetos que cumplan los criterios de inscripción. Todos los sujetos autorizados se someterán a un examen de detección, que incluye examen físico, hemograma completo, prueba de función hepática, anticuerpos anti-dengue ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) y prueba de embarazo en orina (para mujeres en edad fértil).

Se realizará una prueba de embarazo en orina en la selección y el día de la vacunación (día 0 y día 28) para mujeres en edad fértil. Solo aquellas con una prueba de embarazo en orina negativa serán consideradas elegibles para el estudio, siempre que se hayan cumplido otros criterios de elegibilidad.

Tanto los hombres (si tiene una pareja en edad fértil) como las mujeres (en edad fértil) deben estar de acuerdo en utilizar medidas anticonceptivas adecuadas y fiables (p. espermicidas, preservativos, píldoras anticonceptivas) o practicar la abstinencia durante los 10 días posteriores a la vacunación.

Visitas y procedimientos del estudio: 58 sujetos serán aleatorizados en 1 de 2 brazos (Brazo B1 y Brazo B2) en una proporción de 1:1, de forma doble ciego. Los sujetos del grupo B1 recibirán la vacuna JE-YF17D (Imojev, Sanofi Pasteur) el día 0, seguida de la vacuna YF17D (Stamaril, Sanofi Pasteur) el día 28. Los sujetos del brazo B2 recibirán Stamaril el día 0 seguido de Imojev el día 28. El brazo B3 se llevará a cabo como un diseño de etiqueta abierta de un solo brazo separado en 14 sujetos. Los sujetos del grupo B3 recibirán la vacuna JE inactivada (Ixiaro, Valneva) el día 0, seguida de Stamaril el día 28. Las visitas de estudio en todos los brazos se realizarán los días 0, 4, 7, 10, 14, 28, 29, 32, 35, 38, 42, 58. En cada visita del estudio, se realizará un examen físico, signos vitales y muestras de sangre para investigación. El día 0 y el día 28, se realizará una toma de muestras de sangre antes de la vacunación.

Visita final del estudio: la última visita del estudio será el día 58 después de la vacunación del estudio.

Seguimiento y procedimientos posteriores al estudio: No hay ningún requisito para el seguimiento o los procedimientos posteriores al estudio.

Plan de monitoreo de seguridad: El estudio puede ser evaluado por inspectores gubernamentales/autoridades reguladoras a quienes se les debe permitir el acceso a los e-CRF, documentos fuente y otros archivos del estudio. Los inspectores revisarán los CRF y los compararán con los documentos fuente para verificar la recopilación precisa y completa de datos y confirmar que el estudio se lleva a cabo de acuerdo con el protocolo, las buenas prácticas clínicas de ICH (ICH-GCP) y todas las reglamentaciones aplicables.

En cualquier momento posterior a la vacunación, todos los sujetos serán capacitados para observar EA sistémicos. También se entregará un diario a los sujetos para registrar tales eventos si ocurrieran durante este período. En caso de que desarrollen síntomas sistémicos que requieran intervención, se presentarán en el sitio de estudio para una evaluación médica y recibirán la terapia adecuada. Se registrará la duración de los síntomas. También se registrará cualquier uso de medicación concomitante durante este período.

Durante el estudio, se realizará un historial completo y un examen físico en las visitas programadas y no programadas. Solo se realizará un examen físico completo en la visita de selección, mientras que se realizará un breve examen físico para todas las visitas posteriores. Los Criterios de Terminología Común para Eventos Adversos (CTCAE), que se emplean habitualmente en los ensayos clínicos, se utilizarán para definir la terminología y la gravedad de los EA. El manejo de los EA queda a discreción del equipo de estudio PI y co-Is, guiado por la gravedad y la indicación clínica para la intervención. Toda la medicación prescrita para el manejo de los EA se documentará en la ficha clínica de medicación/medicación concomitante. Los detalles de la terminología del evento EA, la fecha y la hora de inicio y finalización del evento, la gravedad, el uso de CTCAE o el tratamiento administrado, el impacto en el trabajo y en la continuación del estudio y el resultado final del evento se registrarán en el informe del caso hasta su resolución. del evento.

Garantía de calidad de los datos: el PI y los Co-I revisarán el estudio periódicamente para monitorear los datos y la seguridad. Los controles de calidad internos serán realizados por dos CRC que son miembros del equipo de estudio. Los datos ingresados ​​por un CRC serán verificados por otro utilizando los documentos fuente. El estudio también puede ser seleccionado para el monitoreo por parte de la Oficina de Integridad y Cumplimiento de la Investigación (ORIC) de SingHealth o evaluado por inspectores gubernamentales/autoridades reguladoras a quienes se les debe permitir el acceso a los e-CRF, documentos fuente y otros archivos del estudio. Los monitores/inspectores pueden revisar los CRF y compararlos con los documentos fuente para verificar la recopilación precisa y completa de datos y confirmar que el estudio se lleva a cabo de acuerdo con el protocolo, ICH-Good Clinical Practices (ICH-GCP) y todas las reglamentaciones aplicables.

Entrada y almacenamiento de datos: todos los datos de los participantes serán desidentificados en el momento de la contratación. Los formularios de recopilación de datos de investigación en papel, como CRF, registros y diarios, se mantendrán en el Archivo del sitio del investigador y se almacenarán en SingHealth IMU bajo llave, accesibles solo para los miembros delegados del equipo de estudio.

La captura directa de datos demográficos y clínicos se capturará en los documentos fuente. Los identificadores se mantendrán en un archivo separado en otra oficina y se hará todo lo posible para proteger la privacidad de los participantes. Los datos a analizar contendrán únicamente datos no identificados. Se utilizará un sistema electrónico de captura de datos. Todos los datos electrónicos estarán protegidos con contraseña y solo podrán acceder a ellos los miembros del equipo del estudio. Las muestras, los resultados de las pruebas o los datos de patógenos se almacenarán en el laboratorio Duke-NUS EID en una PC independiente cuyo acceso está protegido por contraseña.

Determinación del tamaño de la muestra: para detectar un tamaño del efecto de 0,8 DE en el nivel medio de viremia en la escala log(10) entre la primera y la segunda con la misma vacuna; la primera dosis se analizará frente a quienes recibieron YF17D después de JE-YF17D y viceversa - un tamaño de muestra de 25 por grupo proporcionará un 80 % de potencia con una tasa de error de tipo 1 bilateral del 5 %. Para permitir un 10 % de abandonos tempranos, se apunta a un tamaño de muestra total de 28 por grupo para los Brazos B1 y B2. Para el brazo B3, que es el grupo de control, se utilizará un tamaño de muestra de 14.

Plan estadístico y analítico: se utilizarán gráficos de distribución de diagnóstico para examinar la forma de las distribuciones de los recuentos de células T inmediatamente antes de la vacunación de desafío y la subsiguiente viremia de la vacuna. Se utilizarán procedimientos paramétricos (prueba t) o no paramétricos (U de Mann-Whitney) para evaluar las diferencias en los recuentos de células T y las diversas variables medidas, como la viremia, los títulos de anticuerpos y los niveles de citoquinas. Se utilizarán los coeficientes de correlación de Pearson o Spearman, según corresponda, para examinar la asociación entre los niveles de células T y estas variables.

Primero se analizará la frecuencia de los síntomas informados y el tipo de síntomas determinando la mediana y los rangos intercuartílicos. Luego analizaremos cómo la primera vacunación afecta el resultado sintomático de la vacunación de desafío utilizando tablas de 2x2 y análisis de chi cuadrado o la prueba exacta de Fisher, según corresponda. Se utilizarán procedimientos paramétricos (prueba t) o no paramétricos (Mann-Whitney U) para evaluar las diferencias en los recuentos de células T específicas del virus antes del desafío entre aquellos con síntomas y aquellos sin ellos.

Pruebas que se realizarán a las muestras de sangre: DENV IgG ELISA, FBC, Liver Panel, Viremia (NS5 PCR), citoquinas, Anti-NS1 Ab, estudios de células T (AIM, ELLISPOT, ELLA), secuenciación BCR, PRNT y gen expresión.