Eine experimentelle medizinische Entschlüsselung eines minimalen Korrelats der zellulären Immunität

Rekrutierungskriterien und Rekrutierungsprozess: Die Probanden werden aus der Datenbank für gesunde Freiwillige und Rekrutierungspostern der SingHealth Investigational Medicine Unit (IMU) rekrutiert. Die Probanden erhalten eine Kopie der Teilnehmerinformationen und der Einverständniserklärung, die sie bei ihrer Ankunft lesen können. Eine Informationssitzung über die Studie wird vom Ermittler durchgeführt. Danach werden die Probanden in einen privaten Raum geführt, wo die Einverständniserklärung eingeholt wird und wo Fragen zur Studie frei gestellt werden können. Die Probanden werden nicht dazu gedrängt, eine Entscheidung zur Teilnahme an der Studie zu treffen. Sie werden ermutigt, mit ihren Familienmitgliedern über die Teilnahme an der Studie zu sprechen; und durften ihre Entscheidung (ohne Vorurteil) zur Teilnahme bis nach Rücksprache mit ihren Familienmitgliedern aufschieben.

Screening-Besuche und -Verfahren: Die Probanden werden über die SingHealth Investigational Medicine Unit (IMU) rekrutiert. Von Probanden, die die Kriterien für die Einschreibung erfüllen, wird eine schriftliche Einwilligung nach Inkenntnissetzung eingeholt. Alle zugelassenen Probanden werden einem Screening unterzogen, das eine körperliche Untersuchung, ein großes Blutbild, einen Leberfunktionstest, einen Anti-Dengue-Antikörper-ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) und einen Harnschwangerschaftstest (für weibliche Probanden im gebärfähigen Alter) umfasst.

Bei weiblichen Probanden im gebärfähigen Alter wird beim Screening und am Tag der Impfung (Tag 0 und Tag 28) ein Schwangerschaftstest im Urin durchgeführt. Nur diejenigen mit einem negativen Urin-Schwangerschaftstest werden als für die Studie geeignet angesehen, sofern andere Eignungskriterien erfüllt wurden.

Sowohl männliche (wenn er einen Partner im gebärfähigen Alter hat) als auch weibliche Probanden (im gebärfähigen Alter) müssen zustimmen, angemessene und zuverlässige Verhütungsmaßnahmen (z. Spermizide, Kondome, Antibabypillen) oder für 10 Tage nach der Impfung Abstinenz üben.

Studienbesuche und Verfahren: 58 Probanden werden doppelblind im Verhältnis 1:1 in 1 von 2 Armen (Arm B1 und Arm B2) randomisiert. Die Probanden in Arm B1 erhalten am Tag 0 den JE-YF17D-Impfstoff (Imojev, Sanofi Pasteur), gefolgt vom YF17D-Impfstoff (Stamaril, Sanofi Pasteur) am Tag 28. Die Probanden in Arm B2 erhalten Stamaril an Tag 0, gefolgt von Imojev an Tag 28. Arm B3 wird als separates einarmiges Open-Label-Design in 14 Fächern durchgeführt. Die Probanden in Arm B3 erhalten an Tag 0 einen inaktivierten JE-Impfstoff (Ixiaro, Valneva), gefolgt von Stamaril an Tag 28. Studienbesuche in allen Armen finden an Tag 0, 4, 7, 10, 14, 28, 29, 32, 35, 38, 42, 58 statt. Bei jedem Studienbesuch werden eine körperliche Untersuchung, Vitalfunktionen und Blutentnahmen zu Forschungszwecken durchgeführt. An Tag 0 und Tag 28 wird vor der Impfung eine Blutentnahme durchgeführt.

Abschließender Studienbesuch: Der letzte Studienbesuch findet an Tag 58 nach der Studienimpfung statt.

Follow-up und Verfahren nach dem Studium: Es gibt keine Anforderungen für Follow-up oder Verfahren nach dem Studium.

Sicherheitsüberwachungsplan: Die Studie kann von Regierungsinspektoren/Regulierungsbehörden bewertet werden, denen Zugang zu e-CRFs, Quelldokumenten und anderen Studiendateien gewährt werden muss. Die Inspektoren überprüfen die CRFs und vergleichen sie mit Quelldokumenten, um die genaue und vollständige Erfassung der Daten zu überprüfen und zu bestätigen, dass die Studie gemäß dem Protokoll, den ICH Good Clinical Practices (ICH-GCP) und allen geltenden Vorschriften durchgeführt wird.

Zu jedem Zeitpunkt nach der Impfung werden alle Probanden darin geschult, auf systemische UE zu achten. Die Probanden erhalten auch ein Tagebuch, um solche Ereignisse aufzuzeichnen, falls sie während dieses Zeitraums auftreten. Sollten sie systemische Symptome entwickeln, die eine Intervention erfordern, melden sie sich zur medizinischen Untersuchung am Studienzentrum und erhalten die geeignete Therapie. Die Dauer der Symptome wird aufgezeichnet. Auch die gleichzeitige Einnahme von Medikamenten während dieses Zeitraums wird erfasst.

Während der Studie werden sowohl bei geplanten als auch bei außerplanmäßigen Besuchen eine vollständige Anamneseerhebung und körperliche Untersuchung durchgeführt. Eine vollständige körperliche Untersuchung wird nur beim Screening-Besuch durchgeführt, während bei allen nachfolgenden Besuchen eine kurze körperliche Untersuchung durchgeführt wird. Die Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE), die routinemäßig in klinischen Studien verwendet werden, werden verwendet, um die UE-Terminologie und den Schweregrad zu definieren. Die Behandlung von UE liegt im Ermessen der PI und Co-I des Studienteams und richtet sich nach dem Schweregrad und der klinischen Indikation für eine Intervention. Alle Medikamente, die zur Behandlung von UE verschrieben werden, werden im Krankenblatt Medikation/Begleitmedikation dokumentiert. Einzelheiten zur UE-Ereignisterminologie, Datum und Uhrzeit des Ereignisbeginns und -endes, Schweregrad, Verwendung des CTCAE oder der verabreichten Behandlung, Auswirkungen auf die Arbeit und die Fortsetzung der Studie sowie das endgültige Ergebnis des Ereignisses werden bis zur Lösung im Fallbericht festgehalten der Veranstaltung.

Datenqualitätssicherung: Der PI und Co-Is werden die Studie regelmäßig auf Daten- und Sicherheitsüberwachung überprüfen. Interne Qualitätsprüfungen werden von zwei CRCs durchgeführt, die Mitglieder des Studienteams sind. Die von einem CRC eingegebenen Daten werden von einem anderen anhand der Quelldokumente überprüft. Die Studie kann auch zur Überwachung durch das SingHealth Office of Research Integrity and Compliance (ORIC) ausgewählt oder von staatlichen Inspektoren/Regulierungsbehörden bewertet werden, denen Zugang zu e-CRFs, Quelldokumenten und anderen Studiendateien gewährt werden muss. Die Monitore/Inspektoren können CRFs überprüfen und mit Quelldokumenten vergleichen, um die genaue und vollständige Datenerfassung zu überprüfen und zu bestätigen, dass die Studie gemäß dem Protokoll, ICH-Good Clinical Practices (ICH-GCP) und allen geltenden Vorschriften durchgeführt wird.

Dateneingabe und -speicherung: Alle Daten der Teilnehmer werden bei der Rekrutierung anonymisiert. Gedruckte Formulare zur Erhebung von Forschungsdaten wie CRFs, Protokolle und Tagebücher werden in der Investigator's Site File aufbewahrt und in SingHealth IMU unter Verschluss aufbewahrt und sind nur für delegierte Mitglieder des Studienteams zugänglich.

Die direkte Datenerfassung demografischer und klinischer Daten wird in Quelldokumenten erfasst. Identifikatoren werden in einer separaten Datei in einem anderen Büro aufbewahrt und es werden alle Anstrengungen unternommen, um die Privatsphäre der Teilnehmer zu schützen. Die zu analysierenden Daten enthalten nur anonymisierte Daten. Es wird ein elektronisches Datenerfassungssystem verwendet. Alle elektronischen Daten sind passwortgeschützt und nur für Mitglieder des Studienteams zugänglich. Proben, Testergebnisse oder Krankheitserregerdaten werden im EID-Labor von Duke-NUS auf einem eigenständigen PC gespeichert, wobei der Zugriff passwortgeschützt ist.

Bestimmung der Probengröße: Um eine Effektgröße von 0,8 SD im mittleren Virämieniveau auf der log(10)-Skala zwischen der ersten und zweiten mit demselben Impfstoff nachzuweisen – wird die erste Dosis von denen analysiert, die YF17D nach JE-YF17D erhalten haben und umgekehrt - Eine Stichprobengröße von 25 pro Gruppe liefert 80 % Trennschärfe bei einer zweiseitigen Fehlerquote 1. Art von 5 %. Um 10 % vorzeitiges Abbrechen zu ermöglichen, wird eine Gesamtstichprobengröße von 28 pro Gruppe für die Arme B1 und B2 angestrebt. Für Arm B3, die Kontrollgruppe, wird eine Stichprobengröße von 14 verwendet.

Statistischer und analytischer Plan: Verteilungsdiagnostische Diagramme werden verwendet, um die Form der Verteilungen der T-Zellzahlen unmittelbar vor der Challenge-Impfung und der anschließenden Impfstoff-Virämie zu untersuchen. Parametrische (t-Test) oder nicht-parametrische (Mann-Whitney U) Verfahren werden verwendet, um die Unterschiede in der T-Zellzahl und den verschiedenen gemessenen Variablen wie Virämie, Antikörpertiter und Zytokinspiegel zu bewerten. Die Korrelationskoeffizienten von Pearson oder Spearman werden gegebenenfalls verwendet, um die Assoziation zwischen T-Zell-Spiegeln und diesen Variablen zu untersuchen.

Die Häufigkeit der berichteten Symptome und die Art der Symptome werden zunächst analysiert, indem der Median und die Interquartilsabstände bestimmt werden. Wir werden dann analysieren, wie sich die erste Impfung auf das symptomatische Ergebnis der Challenge-Impfung auswirkt, indem wir 2x2-Tabellen und die Chi-Quadrat-Analyse oder den exakten Fisher-Test verwenden, je nachdem, was angemessen ist. Parametrische (t-Test) oder nicht-parametrische (Mann-Whitney U) Verfahren werden verwendet, um die Unterschiede in den virusspezifischen T-Zellzahlen vor der Herausforderung zwischen denen mit Symptomen und denen ohne Symptome zu bewerten.

Tests, die an den Blutproben durchgeführt werden: DENV-IgG-ELISA, FBC, Leber-Panel, Virämie (NS5-PCR), Zytokine, Anti-NS1-Ab, T-Zell-Studien (AIM, ELLISPOT, ELLA), BCR-Sequenzierung, PRNT und Gen Ausdruck.