Role vitaminu D v prevenci hemoragické horečky dengue a šokového syndromu dengue

Zdůvodnění studie: Bangladéš je hyperendemickou oblastí pro infekci dengue a od roku 2019 je v různých zemích zapříčiněna masivními ohnisky. Podle zprávy DGHS bylo nejvyšší přijetí kvůli infekci dengue zaznamenáno v roce 2019. V loňském roce v roce 2022 zemřelo celkem 281, což bylo z hlediska úmrtnosti nejvíce od roku 2000. Znepokojivé je zjištění, že letos do 11. srpna 2023 dosáhl počet úmrtnosti 373, což již překonalo dosavadní rekordy. Většina naší populace je vystavena infekci dengue a je prokázáno, že sekundární infekce jiným sérotypem se pravděpodobně projevuje jako závažná forma horečky dengue. To může být skutečným důvodem bezprecedentního nárůstu úmrtnosti, protože na protilátce závislé zvýšení sekundární horečky dengue s odpovědí paměťových T buněk jsou zásadní pro rozvoj závažných infekcí dengue. Bylo zjištěno, že prozánětlivé cytokiny uvolňované z T buněk a makrofágů spolu s produkty rozpadu komplementu jsou hlavním pachatelem DHF a DSS, které zvyšují vaskulární permeabilitu endotelu a orgánovou dysfunkci. Bohužel neexistuje žádné antivirotikum, u kterého by bylo prokázáno, že by fungovalo při infekci dengue, a očkování v Bangladéši není možné, takže můžeme poskytovat pouze podpůrnou léčbu a pozorovat, dokud se neobjeví varovné příznaky. Po zhoršení přijmeme pacienta k agilnějšímu monitorování a podáváme podle potřeby nitrožilní tekutiny a v zanedbatelných případech steroidy a další orgánovou podporu. Vědci se nyní snaží zaměřit tuto cytokinovou bouři a najít způsob, jak zvrátit tento efekt v prvních dnech infekce horečkou dengue. K zastavení progrese onemocnění je tedy zapotřebí nový zásah. Objevují se však důkazy o úloze živin v imunomodulaci. Vitamin D je perspektivní látka potvrzená předběžnými studiemi. V těchto předchozích studiích vitamín D ukázal potenciál jako imunomodulační činidlo, které může hrát roli při kontrole závažnosti horečky dengue snížením prozánětlivé aktivity Th1 a snížením povrchové exprese lektinu typu C, zvláště „manózového receptoru“, který je známý. primární receptor pro připojení DENV na makrofázích, které spouštějí imunitní signalizaci a rychlý nárůst produkce cytokinů. Existuje pouze jedna lidská RCT, která uzavřela možnou roli tohoto činidla. S ohledem na všechny důkazy je tato studie navržena tak, aby prokázala účinnost, bezpečnost a reakci na dávku vitaminu D v prevenci závažnosti a mortality dengue. Tato studie může pomoci prokázat silnou empirickou důkazní základnu na podporu role vitaminu D při snižování přijetí a tím i úmrtnosti. Kromě toho bude vodítkem při navrhování větší studie, která vytvoří silné důkazy a odpovídajícím způsobem změní reakci národního zdraví.

Výzkumná otázka:

Je vitamín D účinný a bezpečný v prevenci progrese do DHF a DSS?

Cíle:

Obecné cíle:

Stanovit účinnost, bezpečnost a odpověď na dávku vitaminu D v prevenci DHF a DSS.

Specifické cíle:

1. Zjistit účinnost vitaminu D při snižování úmrtnosti na horečku dengue a popsat procentuální snížení.
2. Zjistit bezpečnost užívání vitamínu D při horečce dengue a vymezit jeho bezpečnostní profil.
3. Porovnat progresi infekce dengue mezi různými dávkami vitaminu D a popsat vztah mezi dávkou a odezvou.
4. Změřit zlepšení celkového počtu bílých krvinek, hematokritu a počtu krevních destiček mezi různými dávkami vitaminu D a porovnat s kontrolním ramenem, aby se zjistil nějaký význam.

Studovat design:

Fáze 2 otevřená Randomizovaná kontrolovaná studie.

Místo studia:

Dengue Cell, pohotovostní oddělení a lékařské oddělení OPD na lékařské univerzitě Bangabandhu Sheikh Mujib (BSMMU), Shahbagh, Dhaka.

Období studia:

září 2023 – srpen 2024 (jeden rok)

Studijní populace:

Potenciálními účastníky studie budou dospělí (>18 až 65 let), kteří jsou pozitivní na NS1 a projevují se BSMMU s horečkou ≥100,4 °F (≥38°C) a/nebo typické příznaky horečky Dengue po dobu 3 dnů nebo méně.

Velikost vzorku:

Výzkumné nástroje:

1. Strukturovaný dotazník
2. Kontrolní seznam zjištění vyšetřování

4. Odstředivka 5. Sada pro odběr krve 6. Soupravy RDT atd.

Míry proměnných:

1. Socio-demografické proměnné

   1. Stáří
   2. Sex
   3. Rezidence
   4. obsazení

2. Klinické proměnné:

   1. Doba trvání horečky
   2. Výstražné značky podle národních směrnic
   3. Teplota
   4. Pulzní tlak (v mm Hg)
   5. Tepová frekvence
   6. Dechová frekvence
   7. Stupeň závažnosti horečky dengue (skupina A/B/C)
3. Laboratorní proměnné:

A. Povinné (jako součást standardní péče):

1. Kompletní krevní obraz - WBC, HCT, krevní destičky, poměr neutrofilů:lymfocytů
2. Sérum vápníku
3. Sérový albumin
4. Dengue NS1 Ag
5. IgM a IgG dengue

B. Volitelné (pokud je uvedeno):

• Ultrasonografie celého břicha s dolní částí hrudníku

Postup sběru dat a analýzy dat:

Registrace a souhlas účastníka:

Data budou sbírána od NS1 pozitivních účastníků s horečkou a typickými příznaky horečky dengue po dobu 3 dnů nebo méně v buňce dengue, na oddělení urgentního příjmu a na oddělení medicíny OPD v BSMMU. Od oprávněných účastníků bude získán podepsaný informovaný písemný souhlas po vysvětlení účelu, postupu, možných fyzických a psychosociálních rizik, práva odmítnout účast nebo odstoupit ze studie. Po získání souhlasu bude odebrána řádná anamnéza a provede se minimální fyzikální vyšetření a data pacienta budou shromážděna ve třech bodech v čase uvedeném v metodice. Pro sběr dat bude připraven podrobný formulář pro záznam případu a bude používán po celou dobu sběru dat. Dotazník bude obsahovat tři části, zahrnující demografické podrobnosti, klinické informace a relevantní vyšetření.

Informace o intervenčních lécích, bezpečnost a řízení a zaznamenávání nežádoucích účinků:

Intervenční lék, 2 00 000 IU perorálního roztoku vitaminu D3 ve formě cholekalciferolu, bude zakoupen od společnosti Popular pharmaceuticals LTD, který bude dodáván pacientům financovaným ze studie. Farmaceutická společnost nebude mít v procesu žádnou roli. Licence na léky, bezpečnost a doba použitelnosti budou kontrolovány PI. Účastníci budou informováni o možných účincích drogy. Jakákoli nepříznivá událost je velmi nepravděpodobná, přesto bude PI a supervizor pečlivě řízena. Všechny nežádoucí příhody budou zaznamenány ve formuláři Case Record Form (CRF) a jakékoli vyřazení z důvodu intervenčního účinku bude hlášeno.

Odběr séra a plazmy:

Po všech aseptických procedurách bude odebráno 5 ml žilní krve v den registrace, poté 4 dny a 8 dní poté. 2 ml a 3 ml se rozdělí do vakutaineru s fialovým vrchním a červeným vrchním dílem. Fialová zkumavka bude odeslána pro CBC. Červené zkumavky se poté odstřeďují při 1 258 x g po dobu 10 minut, aby se oddělilo sérum, a do eppendorfových zkumavek se připraví dva alikvoty séra. Jeden alikvot bude použit na diagnostické testy a biochemické testy. Vyšetření bude provedeno z Ústavu hematologie, biochemie, virologie a radiologie BSMMU. Všechna vyšetření budou pro pacienty provedena zdarma. Zbývající vzorky budou uchovávány při teplotě -80 °C v místě studie po dobu pěti let pod správou PI a supervizorů pro budoucí výzkumné účely.

Právo účastníka na odstoupení:

Účastníci mohou ze studie kdykoli a z jakéhokoli důvodu odstoupit. Pokud k tomu dojde, bude tento důvod odstoupení zdokumentován ve formuláři záznamu o případu. Pacienti vyřazení ze studie před provedením procedur souvisejících se studií budou nahrazeni.

Sběr, zpracování a analýza dat:

Všechna data budou uložena v zašifrované databázi chráněné heslem a studie bude provedena v souladu se správnou klinickou praxí (GCP). Budu odpovědný za sběr a záznam údajů. Na sběr dat bude dohlížet supervizor a spoluvedoucí. PI bude odpovědná za udržování požadovaných záznamů o studii, včasnosti, úplnosti a přesnosti informací ve formuláři Case Record Form (CRF). Data budou kontrolována každý druhý den supervizorem a spoludozorcem s původním zdrojem.

Číselná data získaná ze studie budou vložena do excelového listu, analyzována a významnost rozdílů bude odhadnuta pomocí statistických metod a budou prezentovány jako průměr ± SD nebo medián ± IQR. Chí-kvadrát test, Mann-Whitney U-test a Kaplan-Meierova křivka budou provedeny podle potřeby. Pro ilustraci a zveřejnění výsledků studie budou použity různé tabulky, grafy, tabulky, diagramy atd.