Rola witaminy D w zapobieganiu gorączce krwotocznej denga i zespołowi szoku denga

Uzasadnienie badania: Bangladesz to region hiperendemiczny w przypadku zakażenia dengą, w którym od 2019 r. występują masowe ogniska tej choroby w różnych krajach. Jak wynika z raportu DHS, najwięcej przyjęć z powodu zakażenia dengą odnotowano w 2019 r. W ubiegłym roku w 2022 roku ogółem liczba zgonów wyniosła 281 i była najwyższa pod względem umieralności od 2000 roku. Niepokojący jest fakt, że w tym roku do 11 sierpnia 2023 roku liczba zgonów wyniosła 373, co przekroczyło już dotychczasowe rekordy. Większość naszej populacji jest narażona na zakażenie dengą i udowodniono, że wtórne zakażenie innym serotypem prawdopodobnie objawia się ciężką postacią dengi. Może to być właśnie przyczyną bezprecedensowego wzrostu śmiertelności, ponieważ zależne od przeciwciał wzmocnienie wtórnej dengi w połączeniu z odpowiedzią limfocytów T pamięci ma kluczowe znaczenie dla rozwoju ciężkich infekcji dengą. Stwierdzono, że cytokiny prozapalne uwalniane z limfocytów T i makrofagów wraz z produktami rozpadu dopełniacza są głównymi sprawcami DHF i DSS, które zwiększają przepuszczalność naczyń śródbłonka i dysfunkcję narządów. Niestety nie ma leku przeciwwirusowego o udowodnionym działaniu w przypadku zakażenia dengą, a szczepienia nie są w Bangladeszu możliwe, dlatego możemy jedynie zapewnić leczenie wspomagające i obserwować do czasu pojawienia się objawów ostrzegawczych. Po pogorszeniu przyjmujemy pacjenta w celu sprawniejszego monitorowania i w razie potrzeby podajemy płyny dożylne, a w nieistotnych przypadkach sterydy i inne środki wspomagające narządy. Naukowcy próbują obecnie zaatakować tę burzę cytokin i znaleźć sposób na odwrócenie tego efektu w pierwszych dniach zakażenia dengą. Dlatego potrzebna jest nowa interwencja, aby zatrzymać postęp choroby. Pojawiają się jednak dowody na rolę składników odżywczych w immunomodulacji. Witamina D jest obiecującym środkiem, którego skuteczność potwierdzają wstępne badania. W poprzednich badaniach witamina D wykazała potencjał jako środek immunomodulujący, który może odgrywać rolę w kontrolowaniu ciężkości dengi poprzez regulację w dół prozapalnej aktywności Th1 i zmniejszenie powierzchniowej ekspresji lektyny typu C, zwłaszcza „receptora mannozy”, który jest znanym główny receptor przyłączania DENV do makrofagów, który wyzwala sygnalizację immunologiczną i szybki wzrost produkcji cytokin. Istnieje tylko jedno badanie RCT u ludzi, w którym stwierdzono możliwą rolę tego czynnika. Mając na uwadze wszystkie dowody, badanie to ma na celu udowodnienie skuteczności, bezpieczeństwa i odpowiedzi na dawkę witaminy D w zapobieganiu ciężkości i śmiertelności dengi. Badanie to może pomóc w udowodnieniu mocnej bazy dowodów empirycznych potwierdzających rolę witaminy D w zmniejszaniu liczby przyjęć, a tym samym śmiertelności. Ponadto pomoże w zaprojektowaniu większego badania w celu wygenerowania mocnych dowodów i odpowiedniej zmiany krajowej reakcji zdrowotnej.

Pytanie badawcze:

Czy witamina D jest skuteczna i bezpieczna w zapobieganiu progresji do DHF i DSS?

Cele:

Cele ogólne:

Określenie skuteczności, bezpieczeństwa i odpowiedzi na dawkę witaminy D w zapobieganiu DHF i DSS.

Konkretne cele:

1. Aby poznać skuteczność witaminy D w zmniejszaniu śmiertelności spowodowanej dengą i opisać procentową redukcję.
2. Aby poznać bezpieczeństwo stosowania witaminy D w gorączce denga i określić jej profil bezpieczeństwa.
3. Porównanie postępu zakażenia dengą pomiędzy różnymi dawkami witaminy D i opisanie zależności dawka-odpowiedź.
4. Aby zmierzyć poprawę całkowitej liczby białych krwinek, hematokrytu i liczby płytek krwi wśród różnych dawek witaminy D i porównać z grupą kontrolną, aby zobaczyć jakiekolwiek znaczenie.

Projekt badania:

Faza 2, otwarte, randomizowane badanie kontrolowane.

Miejsce nauki:

Komórka ds. dengi, Oddział Ratunkowy i OPD Wydziału Lekarskiego Uniwersytetu Medycznego Bangabandhu Sheikh Mujib (BSMMU), Shahbagh, Dhaka.

Okres nauki:

Wrzesień 2023 - sierpień 2024 (Rok)

Badana populacja:

Potencjalnymi uczestnikami badania będą dorośli (> 18 do 65 lat), którzy mają wynik pozytywny na NS1 i zgłaszają się do BSMMU z gorączką ≥30°C (≥38°C) i/lub typowe objawy przedmiotowe gorączki denga utrzymujące się przez 3 dni lub krócej.

Wielkość próbki:

Instrumenty badawcze:

1. Ustrukturyzowany kwestionariusz
2. Sprawdź listę ustaleń dochodzenia

4. Wirówka 5. Zestaw do pobierania krwi 6. Zestawy RDT itp.

Miary zmiennych:

1. Zmienne społeczno-demograficzne

   1. Wiek
   2. Seks
   3. Rezydencja
   4. Zawód

2. Zmienne kliniczne:

   1. Czas trwania gorączki
   2. Znaki ostrzegawcze zgodne z wytycznymi krajowymi
   3. Temperatura
   4. Ciśnienie tętna (w mm Hg)
   5. Tętno
   6. Częstość oddechów
   7. Stopień nasilenia dengi (grupa A/B/C)
3. Zmienne laboratoryjne:

A. Obowiązkowe (w ramach standardowej opieki):

1. Pełna morfologia krwi – WBC, HCT, płytki krwi, stosunek neutrofilów do limfocytów
2. Wapń w surowicy
3. Albumina surowicy
4. Denga NS1 Ag
5. Denga IgM i IgG

B. Opcjonalnie (jeśli wskazano):

• USG całego brzucha z dolną klatką piersiową

Procedura zbierania danych i analizy danych:

Rejestracja uczestnika i zgoda:

Dane będą zbierane od uczestników z wynikiem pozytywnym na NS1, u których wystąpiła gorączka i typowe objawy przedmiotowe gorączki denga utrzymujące się przez 3 dni lub krócej w komórce dengi, na oddziale ratunkowym i OPD na oddziale medycznym w BSMMU. Od kwalifikujących się uczestników zostanie uzyskana podpisana świadoma pisemna zgoda po wyjaśnieniu celu, procedury, potencjalnych zagrożeń fizycznych i psychospołecznych, prawa do odmowy udziału lub wycofania się z badania. Po uzyskaniu zgody zostanie zebrany odpowiedni wywiad, minimalne badanie fizykalne oraz pobranie danych pacjenta w trzech terminach przewidzianych w metodologii. Do zbierania danych zostanie przygotowany szczegółowy formularz zapisu sprawy, który będzie używany przez cały okres zbierania danych. Kwestionariusz będzie składał się z trzech części, obejmujących dane demograficzne, informacje kliniczne i odpowiednie badania.

Informacje o lekach interwencyjnych, zarządzanie bezpieczeństwem i działaniami niepożądanymi oraz rejestracja:

Lek interwencyjny 2 00 000 IU roztworu doustnego witaminy D3 w postaci cholekalcyferolu zostanie zakupiony od firmy Popular Pharmaceuticals LTD i dostarczony pacjentom sfinansowanym w ramach badania. Firma farmaceutyczna nie będzie odgrywać żadnej roli w badaniu. PI sprawdzi, czy pozwolenie na lek, jego bezpieczeństwo i okres ważności zostaną sprawdzone. Uczestnicy zostaną poinformowani o potencjalnych skutkach leku. Jakiekolwiek niekorzystne zdarzenie jest bardzo mało prawdopodobne, jednakże będzie ono systematycznie zarządzane przez kierownika projektu i przełożonego. Wszystkie zdarzenia niepożądane zostaną zarejestrowane w Formularzu Rejestru Przypadku (CRF), a wszelkie przypadki rezygnacji ze względu na efekt interwencji zostaną zgłoszone.

Pobieranie surowicy i osocza:

Zgodnie z wszystkimi procedurami aseptycznymi w dniu włączenia do badania, następnie po 4 i 8 dniach zostanie pobrane 5 ml krwi żylnej. 2 ml i 3 ml zostaną podzielone odpowiednio do pojemnika z fioletową górną i czerwoną górną częścią. Fioletowa tuba zostanie wysłana do CBC. Czerwone probówki zostaną następnie odwirowane przy 1258 x g przez 10 minut w celu oddzielenia surowicy, a w probówkach Eppendorfa zostaną przygotowane dwie porcje surowicy. Jedna porcja zostanie wykorzystana do wykonania badań diagnostycznych i biochemicznych. Badania zostaną przeprowadzone w Katedrze Hematologii, Biochemii, Wirusologii i Radiologii BSMMU. Wszystkie badania będą wykonywane bezpłatnie dla pacjentów. Pozostałe próbki będą przechowywane w temperaturze -80°C w ośrodku badawczym przez pięć lat pod opieką PI i osób nadzorujących do przyszłych celów badawczych.

Prawo Uczestnika do odstąpienia od umowy:

Uczestnicy mogą wycofać się z badania w dowolnym momencie i z dowolnego powodu. Jeżeli tak się stanie, powód odstąpienia od umowy zostanie udokumentowany w formularzu akt sprawy. Pacjenci wycofani z badania przed podjęciem procedur związanych z badaniem zostaną zastąpieni.

Gromadzenie, przetwarzanie i analiza danych:

Wszystkie dane będą przechowywane w zaszyfrowanej, chronionej hasłem bazie danych, a badanie zostanie przeprowadzone zgodnie z Dobrą Praktyką Kliniczną (GCP). Będę odpowiedzialny za zbieranie i rejestrowanie danych. Gromadzenie danych będzie nadzorować przełożony i współprzełożony. PI będzie odpowiedzialna za utrzymanie wymaganych zapisów badań, aktualność, kompletność i dokładność informacji zawartych w formularzu akt przypadku (CRF). Dane będą sprawdzane przez przełożonego i współprzełożonego co drugi dzień z oryginalnym źródłem.

Dane liczbowe uzyskane z badania zostaną wprowadzone do arkusza Excel, poddane analizie, a istotność różnic zostanie oszacowana metodami statystycznymi i przedstawiona jako średnia ± SD lub mediana ± IQR. W razie potrzeby zostaną wykonane test chi-kwadrat, test U Manna-Whitneya i krzywa Kaplana-Meiera. Do zilustrowania i opublikowania wyników badania zostaną wykorzystane różne tabele, wykresy, wykresy, diagramy itp.