Роль витамина D в профилактике геморрагической лихорадки денге и шокового синдрома денге

Обоснование исследования: Бангладеш является гиперэндемичным регионом по инфекции денге, и с 2019 года в нем происходят массовые вспышки по всей стране. Согласно отчету DGHS, самый высокий уровень госпитализации из-за инфекции денге был зафиксирован в 2019 году. В прошлом году в 2022 году общее число смертей составило 281, что стало самым высоким показателем смертности с 2000 года. С тревогой отмечаем, что в этом году к 11 августа 2023 года число смертей достигло 373, что уже превысило предыдущие рекорды. Большая часть нашего населения подвержена инфекции денге, и доказано, что вторичная инфекция другим серотипом, вероятно, проявляется как тяжелая форма денге. Это может быть самой причиной беспрецедентного роста смертности, поскольку антителозависимое усиление вторичной лихорадки денге с ответом Т-клеток памяти играет центральную роль в развитии тяжелых инфекций денге. Обнаружено, что провоспалительные цитокины, высвобождаемые Т-клетками и макрофагами, наряду с продуктами распада комплемента, являются основными виновниками ДГФ и ДСС, которые увеличивают проницаемость сосудов эндотелия и органную дисфункцию. К сожалению, не существует противовирусного препарата, эффективность которого была бы доказана при инфекции денге, и вакцинация в Бангладеш невозможна, поэтому мы можем только обеспечивать поддерживающее лечение и наблюдать до появления настораживающих признаков. После ухудшения состояния мы принимаем пациента для более оперативного наблюдения и при необходимости вводим внутривенно жидкости, а в незначительных случаях – стероиды и другие средства для поддержки органов. Сейчас исследователи пытаются бороться с этим цитокиновым штормом и найти способ обратить вспять этот эффект в первые дни заражения денге. Поэтому необходимо новое вмешательство, чтобы остановить прогрессирование заболевания. Однако появляются новые доказательства роли питательных веществ в иммуномодуляции. Витамин D – многообещающее средство, подтвержденное предварительными исследованиями. В этих предыдущих исследованиях витамин D показал потенциал иммуномодулирующего агента, который может играть роль в контроле тяжести денге путем подавления провоспалительной активности Th1 и снижения поверхностной экспрессии лектина C-типа, особенно «рецептора маннозы», который является известным первичный рецептор прикрепления DENV к макрофагам, который запускает передачу иммунных сигналов и быстрое увеличение продукции цитокинов. Существует только одно РКИ на людях, которое установило возможную роль этого агента. Принимая во внимание все доказательства, это исследование призвано доказать эффективность, безопасность и дозозависимость витамина D в профилактике тяжести и смертности от лихорадки денге. Это исследование может помочь доказать надежную эмпирическую доказательную базу, подтверждающую роль витамина D в снижении госпитализации и, следовательно, смертности. Кроме того, это поможет разработать более масштабное исследование для получения убедительных фактических данных и соответствующего изменения мер национального здравоохранения.

Исследовать вопрос:

Является ли витамин D эффективным и безопасным для предотвращения прогрессирования DHF и DSS?

Цели:

Общие цели:

Определить эффективность, безопасность и дозозависимость витамина D при профилактике DHF и DSS.

Конкретные цели:

1. Выяснить эффективность витамина D в снижении смертности от лихорадки денге и описать процентное снижение.
2. Выяснить безопасность использования витамина D при лихорадке денге и определить профиль его безопасности.
3. Сравнить прогрессирование инфекции денге при приеме различных доз витамина D и описать зависимость «доза-эффект».
4. Измерить улучшение общего количества лейкоцитов, гематокрита и количества тромбоцитов при приеме различных доз витамина D и сравнить с контрольной группой, чтобы увидеть какую-либо значимость.

Дизайн исследования:

Открытое рандомизированное контролируемое исследование фазы 2.

Место обучения:

Отделение денге, отделение неотложной помощи и медицинское отделение OPD Медицинского университета Шейха Муджиба Бангабандху (BSMMU), Шахбаг, Дакка.

Период обучения:

Сентябрь 2023 г. – август 2024 г. (Один год)

Исследуемая популяция:

Потенциальными участниками исследования будут взрослые (от 18 до 65 лет) с положительным NS1, обратившиеся в BSMMU с температурой ≥100,4°F. (≥38°C) и/или типичные признаки лихорадки Денге в течение 3 дней или менее.

Размер образца:

Инструменты исследования:

1. Структурированная анкета
2. Контрольный список результатов расследования

4. Центрифуга 5. Набор для сбора крови 6. Наборы RDT и т. д.

Меры переменных:

1. Социально-демографические переменные

   1. Возраст
   2. Секс
   3. Резиденция
   4. Занятие

2. Клинические переменные:

   1. Продолжительность лихорадки
   2. Предупреждающие знаки в соответствии с национальными директивами
   3. Температура
   4. Пульсовое давление (в мм рт. ст.)
   5. Частота сердцебиения
   6. Частота дыхания
   7. Степень тяжести денге (группа A/B/C)
3. Лабораторные переменные:

А. Обязательные (в рамках стандартного ухода):

1. Общий анализ крови - лейкоциты, HCT, тромбоциты, соотношение нейтрофилов и лимфоцитов.
2. Сывороточный кальций
3. Сывороточный альбумин
4. Денге NS1 Ag
5. Денге IgM и IgG

Б. Необязательно (если указано):

• УЗИ всей брюшной полости с нижней частью грудной клетки

Процедура сбора данных и анализа данных:

Регистрация и согласие участников:

Данные будут собираться у участников с положительным результатом NS1, у которых наблюдалась лихорадка и типичные симптомы лихорадки денге в течение 3 дней или меньше в отделении денге, отделении неотложной помощи и медицинском отделении OPD в BSMMU. От подходящих участников будет получено подписанное информированное письменное согласие после объяснения цели, процедуры, потенциальных физических и психосоциальных рисков, а также права отказаться от участия или выйти из исследования. После получения согласия будет собран надлежащий анамнез и проведен минимальный медицинский осмотр, а данные пациента будут собраны в три момента времени, указанные в методологии. Для сбора данных будет подготовлена ​​подробная форма регистрации случаев, которая будет использоваться на протяжении всего периода сбора данных. Анкета будет состоять из трех частей, охватывающих демографические данные, клиническую информацию и соответствующие исследования.

Информация о интервенционных препаратах, управление безопасностью и побочными эффектами, а также регистрация:

Интервенционный препарат, пероральный раствор витамина D3 в дозе 2 000 000 МЕ в форме холекальциферола, будет приобретен у компании Popular Pharmaceuticals LTD и будет поставляться пациентам, финансируемым в рамках исследования. Фармацевтическая компания не будет участвовать в судебном разбирательстве. Лицензия, безопасность и срок годности лекарственных средств будут проверены ПИ. Участники будут проинформированы о потенциальных эффектах препарата. Любое неблагоприятное событие маловероятно, однако ИП и руководитель будут тщательно контролировать его. Все нежелательные явления будут записаны в регистрационной форме (CRF), а о любом выбывании из-за интервенционного эффекта будет сообщено.

Сбор сыворотки и плазмы:

После всех асептических процедур в день включения в исследование будет собрано 5 мл венозной крови, затем через 4 и 8 дней. 2 мл и 3 мл будут разделены в вакутейнерах с фиолетовой крышкой и с красной крышкой соответственно. Фиолетовая трубка будет отправлена ​​на анализ крови. Затем красные пробирки центрифугируют при 1258×g в течение 10 минут для отделения сыворотки и готовят две аликвоты сыворотки в пробирках Эппендорфа. Одна аликвота будет использована для проведения диагностических и биохимических тестов. Исследования будут проводиться на кафедре гематологии, биохимии, вирусологии и радиологии БГМУ. Все исследования будут проводиться для пациентов бесплатно. Остальные образцы будут храниться при температуре -80°C в исследовательском центре в течение пяти лет под наблюдением исследователя и руководителей для будущих исследовательских целей.

Право участника на выход:

Участники имеют право отказаться от обучения в любой момент и по любой причине. Если это произойдет, эта причина отказа будет задокументирована в форме истории болезни. Пациенты, исключенные из исследования до того, как они прошли процедуры, связанные с исследованием, будут заменены.

Сбор, обработка и анализ данных:

Все данные будут храниться в зашифрованной базе данных, защищенной паролем, а исследование будет проводиться в соответствии с надлежащей клинической практикой (GCP). Я буду нести ответственность за сбор и запись данных. Руководитель и со-руководитель будут контролировать сбор данных. PI будет нести ответственность за ведение необходимых записей исследования, своевременность, полноту и точность информации в форме истории болезни (CRF). Данные будут сверяться супервайзером и со-руководителем каждый второй день с первоначальным источником.

Числовые данные, полученные в результате исследования, будут введены в таблицу Excel, проанализированы, а значимость различий будет оценена с использованием статистических методов и представлена ​​как среднее ± SD или медиана ± IQR. Критерий хи-квадрат, U-критерий Манна-Уитни и кривая Каплана-Мейера будут проводиться по мере необходимости. Для иллюстрации и публикации результатов исследования будут использоваться различные таблицы, графики, диаграммы, диаграммы и т. д.