Ruolo della vitamina D nella prevenzione della febbre emorragica dengue e della sindrome da shock dengue

Motivazione dello studio: il Bangladesh è una regione iperendemica per l'infezione da dengue ed è colpita da massicce epidemie in tutte le nazioni dal 2019. Secondo il rapporto della DGHS, il maggior numero di ricoveri dovuti a dengue è stato registrato nel 2019. L’anno scorso, nel 2022, il numero totale di decessi è stato di 281, il più alto in termini di mortalità dal 2000. È inquietante constatare che quest’anno all’11 agosto 2023 il numero dei decessi ha raggiunto quota 373, cifra che ha già superato i record precedenti. La maggior parte della nostra popolazione è esposta all'infezione da dengue ed è dimostrato che l'infezione secondaria con un sierotipo diverso si manifesta probabilmente come una forma grave di dengue. Questo potrebbe essere il vero motivo dell’aumento senza precedenti della mortalità, poiché il potenziamento dipendente dagli anticorpi nella dengue secondaria con risposta delle cellule T di memoria è fondamentale per lo sviluppo di gravi infezioni da dengue. Le citochine proinfiammatorie rilasciate dalle cellule T e dai macrofagi insieme ai prodotti di degradazione del complemento risultano essere i principali responsabili del DHF e del DSS che aumentano la permeabilità vascolare dell'endotelio e la disfunzione d'organo. Sfortunatamente, non esiste alcun agente antivirale che abbia dimostrato di funzionare contro l’infezione da dengue e la vaccinazione non è un’opzione in Bangladesh, quindi possiamo solo fornire un trattamento di supporto e osservare fino alla comparsa dei segnali di allarme. Dopo il peggioramento ammettiamo il paziente per un monitoraggio più agile e gli somministriamo liquidi per via endovenosa secondo necessità e, in casi trascurabili, steroidi e altro supporto d'organo. I ricercatori stanno ora cercando di contrastare questa tempesta di citochine e di trovare un modo per invertire questo effetto nei primi giorni di infezione da dengue. Quindi è necessario un nuovo intervento per arrestare la progressione della malattia. Esistono tuttavia prove emergenti del ruolo dei nutrienti nell’immunomodulazione. La vitamina D è un agente promettente dimostrato da studi preliminari. In questi studi precedenti la vitamina D ha mostrato un potenziale come agente immunomodulatore che potrebbe avere un ruolo nel controllo della gravità della dengue mediante la sottoregolazione dell'attività proinfiammatoria Th1 e la riduzione dell'espressione superficiale della lectina di tipo C, in particolare del "recettore del mannosio", che è il noto recettore primario per l'attaccamento del DENV sui macrofagi che attivano la segnalazione immunitaria e il rapido aumento della produzione di citochine. Esiste solo un RCT umano che ha concluso un possibile ruolo di questo agente. Tenendo presenti tutte le prove, questo studio è progettato per dimostrare l’efficacia, la sicurezza e la risposta alla dose della vitamina D nella prevenzione della gravità e della mortalità della dengue. Questo studio può aiutare a dimostrare una forte base di prove empiriche a sostegno del ruolo della vitamina D nel ridurre i ricoveri e quindi la mortalità. Inoltre, guiderà la progettazione di uno studio più ampio per generare prove forti e modificare di conseguenza la risposta sanitaria nazionale.

Domanda di ricerca:

La vitamina D è efficace e sicura nella prevenzione della progressione verso DHF e DSS?

Obiettivi:

Obiettivi generali:

Determinare l’efficacia, la sicurezza e la risposta alla dose della vitamina D nella prevenzione di DHF e DSS.

Obiettivi specifici:

1. Scoprire l'efficacia della vitamina D nel ridurre la mortalità da dengue e descrivere la riduzione percentuale.
2. Scoprire la sicurezza dell'uso della vitamina D nella febbre dengue e delinearne il profilo di sicurezza.
3. Confrontare la progressione dell'infezione da dengue tra diverse dosi di vitamina D e descrivere la relazione dose-risposta.
4. Misurare il miglioramento della conta totale dei globuli bianchi, dell'ematocrito e della conta piastrinica tra diverse dosi di vitamina D e confrontarlo con il braccio di controllo per vedere l'eventuale significato.

Progettazione dello studio:

Studio randomizzato controllato di fase 2 in aperto.

Luogo di studio:

Cellula di dengue, Dipartimento di emergenza e OPD del Dipartimento di medicina presso l'Università medica di Bangabandhu Sheikh Mujib (BSMMU), Shahbagh, Dhaka.

Periodo di studio:

Settembre 2023 - Agosto 2024 (Un anno)

Popolazione dello studio:

I potenziali partecipanti allo studio saranno adulti (di età compresa tra 18 e 65 anni) che sono NS1 positivi che si presentano alla BSMMU con febbre ≥ 100,4 ° F (≥38°C) e/o sintomi tipici della febbre dengue per 3 giorni o meno.

Misura di prova:

Strumenti di ricerca:

1. Questionario strutturato
2. Elenco di controllo dei risultati dell'indagine

4.Macchina per centrifuga 5.Set per la raccolta del sangue 6.Kit RDT ecc.

Misure delle variabili:

1. Variabili socio-demografiche

   1. Età
   2. Sesso
   3. Residenza
   4. Occupazione

2. Variabili cliniche:

   1. Durata della febbre
   2. Segnali di pericolo secondo le linee guida nazionali
   3. Temperatura
   4. Pressione del polso (in mm di Hg)
   5. Frequenza cardiaca
   6. Frequenza respiratoria
   7. Grado di gravità della dengue (Gruppo A/B/C)
3. Variabili di laboratorio:

A. Obbligatorio (come parte dell'assistenza standard):

1. Emocromo completo: rapporto WBC, HCT, piastrine, neutrofili: linfociti
2. Calcio sierico
3. Siero albumina
4. Dengue NS1 Ag
5. Dengue IgM e IgG

B. Facoltativo (se indicato):

• Ecografia dell'intero addome con parte inferiore del torace

Procedura di raccolta dati e analisi dei dati:

Iscrizione e consenso del partecipante:

I dati verranno raccolti dai partecipanti positivi a NS1 presentati con febbre e sintomi tipici della febbre dengue per 3 giorni o meno nella cellula dengue, nel pronto soccorso e nell'OPD del dipartimento di medicina in BSMMU. Dai partecipanti aventi diritto verrà ottenuto il consenso scritto informato firmato dopo aver spiegato lo scopo, la procedura, i potenziali rischi fisici e psicosociali, il diritto di rifiutare la partecipazione o di ritirarsi dallo studio. Dopo aver ottenuto il consenso, verrà raccolta l'anamnesi corretta, verrà effettuato un esame fisico minimo e i dati del paziente verranno raccolti in tre momenti menzionati nella metodologia. Un modulo dettagliato di registrazione del caso sarà preparato per la raccolta dei dati e utilizzato durante tutto il periodo di raccolta dei dati. Il questionario comprenderà tre parti, che coprono i dettagli demografici, le informazioni cliniche e le indagini pertinenti.

Informazioni interventistiche sui farmaci, gestione e registrazione della sicurezza e degli effetti avversi:

Il farmaco interventistico, 2.00.000 UI di soluzione orale di vitamina D3 sotto forma di colecalciferolo, sarà acquistato da Popular Pharmaceuticals LTD, che sarà fornito ai pazienti finanziati dallo studio. L’azienda farmaceutica non avrà alcun ruolo nella sperimentazione. La licenza, la sicurezza e la durata di conservazione del farmaco saranno controllate dal PI. I partecipanti verranno informati sui potenziali effetti del farmaco. Qualsiasi evento avverso è molto improbabile, ma sarà gestito assiduamente dal PI e dal supervisore. Tutti gli eventi avversi verranno registrati nel Case Record Form (CRF) e verrà segnalato qualsiasi abbandono dovuto all'effetto interventistico.

Raccolta di siero e plasma:

Dopo tutta la procedura asettica, verranno raccolti 5 ml di sangue venoso il giorno dell'arruolamento, poi 4 giorni e 8 giorni successivi. 2 ml e 3 ml saranno divisi rispettivamente nel vacutainer con tappo viola e con tappo rosso. Il tubo viola verrà inviato per CBC. Le provette rosse verranno poi centrifugate a 1.258 × g per 10 minuti per separare il siero e due aliquote di siero verranno preparate in provette eppendorf. Un'aliquota verrà utilizzata per eseguire test diagnostici e test biochimici. Le indagini saranno effettuate dal Dipartimento di Ematologia, Biochimica, Virologia e Radiologia della BSMMU. Tutte le indagini saranno effettuate gratuitamente per i pazienti. I restanti campioni saranno conservati a -80°C nel sito di studio per cinque anni sotto la custodia del PI e dei supervisori per futuri scopi di ricerca.

Diritto di recesso del partecipante:

I partecipanti sono liberi di ritirarsi dallo studio in qualsiasi momento e per qualsiasi motivo. Se ciò si verifica, il motivo del ritiro sarà documentato nel modulo di registrazione del caso. I pazienti ritirati dallo studio prima di aver intrapreso le procedure relative allo studio verranno sostituiti.

Raccolta, elaborazione e analisi dei dati:

Tutti i dati verranno archiviati in un database crittografato protetto da password e lo studio sarà condotto in conformità con la Buona Pratica Clinica (GCP). Sarò responsabile della raccolta e registrazione dei dati. Il supervisore e il co-supervisore supervisioneranno la raccolta dei dati. Il PI sarà responsabile del mantenimento dei registri di studio richiesti, della tempestività, della completezza e dell'accuratezza delle informazioni nel Case Record Form (CRF). I dati verranno controllati dal supervisore e dal co-supervisore a giorni alterni con la fonte originale.

I dati numerici ottenuti dallo studio verranno inseriti in un foglio Excel, analizzati e il significato delle differenze sarà stimato utilizzando metodi statistici e sarà presentato come media ± DS o mediana ± IQR. Il test chi-quadrato, il test U di Mann-Whitney e la curva di Kaplan-Meier verranno eseguiti secondo necessità. Per illustrare e pubblicare i risultati dello studio verranno utilizzate diverse tabelle, grafici, diagrammi, ecc.