Papel da vitamina D na prevenção da febre hemorrágica da dengue e da síndrome do choque da dengue

Justificativa do estudo: Bangladesh é uma região hiperendêmica para a infecção por dengue e sofre surtos massivos em todos os países desde 2019. Segundo relatório da DGHS, o maior número de internamentos por infecção por dengue foi registrado em 2019. No ano passado, em 2022, o número total de mortes foi de 281, o mais elevado em termos de mortalidade desde 2000. É preocupante constatar que, neste ano até 11 de agosto de 2023, o número de mortalidade atingiu 373, o que já superou os recordes anteriores. A maior parte da nossa população está exposta à infecção por dengue e está comprovado que a infecção secundária com um sorotipo diferente provavelmente se manifesta como forma grave de dengue. Esta pode ser a razão para o aumento sem precedentes da mortalidade, uma vez que o aumento dependente de anticorpos na dengue secundária com resposta de células T de memória é fundamental para o desenvolvimento de infecções graves por dengue. As citocinas pró-inflamatórias liberadas pelas células T e macrófagos, juntamente com os produtos da degradação do complemento, são consideradas os principais agressores na FHD e no DSS, que aumentam a permeabilidade vascular do endotélio e a disfunção orgânica. Infelizmente, não existe nenhum agente antiviral que tenha eficácia comprovada na infecção por dengue e a vacinação não é uma opção no Bangladesh, pelo que só podemos fornecer tratamento de suporte e observar até que apareçam sinais de alerta. Após a deterioração, internamos o paciente para monitoramento mais ágil e administramos fluidos intravenosos conforme necessário e, em casos insignificantes, esteróides e outros órgãos de suporte. Os pesquisadores estão agora tentando atingir essa tempestade de citocinas e encontrar uma maneira de reverter esse efeito nos primeiros dias da infecção por dengue. Portanto, é necessária uma nova intervenção para deter a progressão da doença. No entanto, há evidências emergentes do papel dos nutrientes na imunomodulação. A vitamina D é um agente promissor comprovado por estudos preliminares. Nesses estudos anteriores, a vitamina D mostrou potencial como agente imunomodulador que pode ter um papel no controle da gravidade da dengue, regulando negativamente a atividade pró-inflamatória Th1 e reduzindo a expressão superficial da lectina do tipo C, especialmente o "receptor de manose", que é o conhecido receptor primário para ligação de DENV em macrófagos que desencadeiam sinalização imunológica e rápido aumento na produção de citocinas. Existe apenas um ECR humano que concluiu um possível papel deste agente. Mantendo todas as evidências em mente, este estudo foi concebido para provar a eficácia, segurança e resposta à dose da vitamina D na prevenção da gravidade e mortalidade da dengue. Este estudo pode ajudar a provar uma forte base de evidências empíricas para apoiar o papel da vitamina D na redução da admissão e, portanto, da mortalidade. Além disso, orientará a concepção de estudos mais amplos para gerar evidências sólidas e alterar a resposta nacional de saúde em conformidade.

Questão de pesquisa:

A vitamina D é eficaz e segura na prevenção da progressão para FHD e SSD?

Objetivos.

Objetivos Gerais:

Para determinar a eficácia, segurança e resposta à dose de vitamina D na prevenção de DHF e DSS.

Objetivos específicos:

1. Conhecer a eficácia da vitamina D na redução da mortalidade por dengue e descrever a redução percentual.
2. Conhecer a segurança do uso de vitamina D na dengue e delinear seu perfil de segurança.
3. Comparar a progressão da infecção por dengue entre diferentes doses de vitamina D e descrever a relação dose-resposta.
4. Para medir a melhoria da contagem total de glóbulos brancos, hematócrito e contagem de plaquetas entre diferentes doses de vitamina D e comparar com o braço de controle para ver qualquer significância.

Design de estudo:

Ensaio controlado randomizado aberto de fase 2.

Local de estudo:

Célula de Dengue, Departamento de Emergência e OPD do Departamento de Medicina da Bangabandhu Sheikh Mujib Medical University (BSMMU), Shahbagh, Dhaka.

Período de estudos:

Setembro de 2023 - agosto de 2024 (um ano)

População do estudo:

Os potenciais participantes do estudo serão adultos (>18 a 65 anos) que são positivos para NS1 apresentando-se ao BSMMU com febre ≥100,4°F (≥38°C) e/ou sintomas típicos de Dengue por 3 dias ou menos.

Tamanho da amostra:

Instrumentos de pesquisa:

1. Questionário Estruturado
2. Lista de verificação das conclusões da investigação

4. Máquina centrífuga 5. Conjunto de coleta de sangue 6. Kits RDT etc.

Medidas de variáveis:

1. Variáveis ​​sociodemográficas

   1. Idade
   2. Sexo
   3. Residência
   4. Ocupação

2. Variáveis ​​clínicas:

   1. Duração da febre
   2. Sinais de alerta de acordo com as diretrizes nacionais
   3. Temperatura
   4. Pressão de pulso (em mm de Hg)
   5. Frequência cardíaca
   6. Frequência respiratória
   7. Grau de gravidade da dengue (Grupo A/B/C)
3. Variáveis ​​laboratoriais:

A. Obrigatório (como parte do cuidado padrão):

1. Hemograma completo - proporção de leucócitos, HCT, plaquetas, neutrófilos:linfócitos
2. Cálcio Sérico
3. Albumina Sérica
4. Dengue NS1 Ag
5. Dengue IgM e IgG

B. Opcional (se indicado):

• Ultrassonografia de todo o abdômen com parte inferior do tórax

Procedimento de coleta de dados e análise de dados:

Inscrição e consentimento do participante:

Os dados serão coletados dos participantes NS1 positivos que apresentaram febre e sintomas típicos de dengue por 3 dias ou menos na cela de dengue, pronto-socorro e OPD do Departamento de Medicina da BSMMU. Dos participantes elegíveis, o consentimento informado por escrito assinado será obtido após explicação do propósito, procedimento, potenciais riscos físicos e psicossociais, direito de recusar participar ou retirar-se do estudo. Após a obtenção do consentimento, será feita a anamnese adequada e será feito um exame físico mínimo e os dados do paciente serão coletados nos três momentos mencionados na metodologia. Um formulário detalhado de registro de caso será preparado para coleta de dados e usado durante todo o período de coleta de dados. O questionário incluirá três partes, abrangendo detalhes demográficos, informações clínicas e investigações relevantes.

Informações sobre medicamentos intervencionistas, gerenciamento e registro de segurança e efeitos adversos:

O medicamento intervencionista, 2.00.000 UI de solução oral de vitamina D3 na forma de colecalciferol, será adquirido da Popular Pharmaceuticals LTD, que será fornecido aos pacientes financiados pelo estudo. A empresa farmacêutica não terá nenhum papel no ensaio. A licença, segurança e prazo de validade dos medicamentos serão verificados pelo PI. Os participantes serão aconselhados sobre os efeitos potenciais da droga. Qualquer evento adverso é muito improvável, mas será gerenciado assiduamente pelo PI e pelo supervisor. Todos os eventos adversos serão registrados no Formulário de Registro de Caso (CRF) e qualquer desistência por efeito intervencionista será relatada.

Coleta de soro e plasma:

Após todo o procedimento asséptico, 5 ml de sangue venoso serão coletados no dia da inscrição, depois 4 dias e 8 dias depois. 2 ml e 3 ml serão divididos em vacutainer de topo violeta e topo vermelho, respectivamente. O tubo violeta será enviado para hemograma. Os tubos vermelhos serão então centrifugados a 1.258 × g por 10 minutos para separação do soro e duas alíquotas de soro serão preparadas em tubos eppendorf. Uma alíquota será utilizada para fazer exames diagnósticos e exames bioquímicos. As investigações serão feitas no Departamento de Hematologia, Bioquímica, Virologia e Radiologia da BSMMU. Todas as investigações serão feitas sem custos para os pacientes. As amostras restantes serão preservadas a -80°C no local do estudo por cinco anos sob a custódia do PI e supervisores para fins de pesquisas futuras.

Direito de retirada do participante:

Os participantes são livres para abandonar o estudo a qualquer momento, por qualquer motivo. Se isso ocorrer, o motivo da retirada será documentado no formulário de registro do caso. Os pacientes retirados do estudo antes de terem realizado os procedimentos relacionados ao estudo serão substituídos.

Coleta, processamento e análise de dados:

Todos os dados serão armazenados em um banco de dados criptografado e protegido por senha, e o estudo será conduzido de acordo com as Boas Práticas Clínicas (GCP). Serei responsável pela coleta e registro dos dados. O supervisor e o coorientador supervisionarão a coleta de dados. PI será responsável por manter os registros de estudo exigidos, pontualidade, integridade e precisão das informações no Formulário de Registro de Caso (CRF). Os dados serão cruzados pelo orientador e coorientador em dias alternados com a fonte original.

Os dados numéricos obtidos no estudo serão inseridos em planilha Excel, analisados ​​​​e a significância das diferenças será estimada por meio de métodos estatísticos e será apresentada como média ± DP ou mediana ± IQR. Teste qui-quadrado, teste U de Mann-Whitney e curva de Kaplan-Meier serão feitos conforme necessidade. Diferentes tabelas, gráficos, tabelas, diagramas, etc. serão utilizadas para ilustrar e publicar os resultados do estudo.