Vliv suplementace resveratrolem na výkon a zotavení při cvičení

Tato studie bude využívat randomizovaný a vyvážený cross-over opakovaný návrh měření. Účastníci absolvují celkem 13 návštěv laboratoře cvičební fyziologie intervence a spolupráce (EPIC).

6.2 Postupy každé jednotlivé návštěvy: Návštěva 1 (V1): bude sestávat z informovaného souhlasu a prověření způsobilosti. Jednotlivci, kteří poskytli písemný informovaný souhlas s účastí, budou prověřováni pomocí dotazníku o připravenosti k fyzické aktivitě (PAR-Q+), dotazníku lékařské anamnézy (MHQ) a dotazníku o spotřebě kofeinu (CCQ), aby se určila způsobilost k účasti ve studii. Způsobilí účastníci budou také vyšetřeni certifikovaným flebotomem, aby se určila pravděpodobnost úspěšné venepunkce. Způsobilí účastníci budou následně náhodně rozděleni vyváženým způsobem do dvou léčebných skupin (n=10/skupina) odpovídajících buď Verisperse® Resveratrol (VRES) nebo Placebo (PLA) pomocí online randomizačního nástroje. Účastníci si také vyberou svůj výběr občerstvení ze seznamu předem schválených možností. Poté budou účastníci naplánováni na návštěvu 2 (V2), která se uskuteční nejméně 24 hodin po V1.

Návštěva 2 (V2): Účastníci dorazí na V2 na lačno (≥ 8 hodin) a po dobu nejméně 12 hodin předtím se zdrželi alkoholu. Po příjezdu účastníci dokončí hodnocení hydratace tím, že se vymočí do dodaného vzorkového kelímku ne více než 4 oz. Účastníci poté poskytnou vzorek venózní krve ke stanovení základních systémových koncentrací kreatinkinázy a C-reaktivního proteinu. Dále účastníci dokončí antropometrická hodnocení výšky, hmotnosti a složení těla pomocí analýzy bioelektrické impendence (BIA). Účastníci budou požádáni, aby si sundali boty a všechny šperky pro BIA. S analýzou bioelektrické impendence nejsou spojena žádná rizika ani nepohodlí. Dále budou účastníci odpočívat v tiché, slabě osvětlené laboratoři v pololežící poloze po dobu 15 minut, než dokončí hodnocení průtokem zprostředkované dilatace (FMD). Účastníci pak dostanou standardizovanou svačinku dle vlastního výběru (energetickou tyčinku) a poté se seznámí s aktivním rozsahem pohybu (AROM), prahem bolesti (PPT), škálou vnímané zotavení svalové bolesti (MS), maximální dobrovolnou izometrií hodnocení kontrakce (MVIC) a vertikálního skoku (VJ) a protokol isoinerciálního dřepu (ISP) (3 sady po 6 opakováních při odporu 0,067 kg/mm2). Po ISP budou účastníci seznámeni s online aplikací MyFitnessPal.

Návštěvy 3-5 (V3-V5): Po příjezdu na V3-V5 účastníci podstoupí standardizované zahřátí identické s V2, než absolvují dodatečné seznámení s ISP. Všechny postupy pro V3-V5 budou totožné. V2-V5 budou odděleny minimálně 24 hodinami, ale ne více než 72 hodinami.

Návštěva 6 (V6): Po příjezdu do laboratoře účastníci vyplní dotazník kvality spánku (SQQ), poskytnou vzorek moči k posouzení stavu hydratace a poskytnou vzorek žilní krve před cvičením, aby stanovili základní měření kreatinkinázy (CK). ) a C-reaktivní protein (CRP). Dále účastníci dokončí PRE ultrazvukové hodnocení svalové tloušťky (MT) a intenzity echa (EI), po kterém následuje posouzení FMD. Účastníci pak dostanou standardizované občerstvení (energetickou tyčinku) dle vlastního výběru a absolvují standardizované zahřátí identické s V2, než absolvují PRE hodnocení AROM, PPT, MS, PRS, MVIC a VJ. Účastníci pak budou vybaveni monitorem srdečního tepu a dokončí ISP, po kterém následuje 3minutová ochlazovací perioda založená na cyklu, vzorek žilní krve a následné hodnocení MT, EI, AROM, PPT, MS, PRS, MVIC a VJ ihned po cvičení (IP). MVIC a VJ budou odděleny 5 minutami, aby bylo možné adekvátně zotavit.

Návštěvy 7-9 (V7-V9): V7-V9 budou mít identickou povahu a proběhnou 24, 48 a 72 hodin po V6. Po příjezdu do laboratoře pro každou experimentální studii (V7-V9) účastníci vyplní dotazník o kvalitě spánku (SQQ), poskytnou vzorek moči k posouzení stavu hydratace a poskytnou vzorek žilní krve před cvičením pro stanovení základních měření kreatinu. kináza (CK) a C-reaktivní protein (CRP). Dále účastníci dokončí ultrazvukové hodnocení svalové tloušťky (MT) a intenzity echa (EI), po kterém následuje posouzení FMD. Účastníci poté absolvují standardizované zahřívání identické s V2, než dokončí hodnocení AROM, PPT, MS, PRS, MVIC a VJ. MVIC a VJ budou odděleny 5 minutami, aby bylo možné adekvátně zotavit.

Návštěva 10 (V10): V10 nastane 32 dní po V9 a bude provedena stejným způsobem jako V6.

Návštěvy 11-13 (V11-V13): V11-V13 proběhnou 24, 48 a 72 hodin po V10. V11-V13 bude probíhat stejným způsobem jako V7-V9)

Souhlas a screening Před zahájením studie budou jednotlivci, kteří mají zájem o účast ve studii, požádáni, aby se hlásili do laboratoře EPIC, kde si překontrolovali a podepsali dokument informovaného souhlasu. Účastníci, kteří poskytnou souhlas s účastí, budou následně prověřeni z hlediska způsobilosti prostřednictvím PAR-Q+, MHQ a CCQ. Účastníci budou také požádáni o vyplnění kontaktního formuláře, který zaznamená jejich preferovaný e-mail a číslo mobilního telefonu.

Posouzení stavu hydratace Po příjezdu do laboratoře dostanou účastníci kelímek na vzorky, který si odnesou na toaletu a poskytnou vzorek moči, aby mohla být vyhodnocena hydratace. Po poskytnutí vzorku moči člen výzkumného týmu změří specifickou hmotnost moči (USG) pomocí refraktometru, aby se zajistilo, že účastníci jsou euhydratovaní (1,002-1,025). Pokud jsou dehydratovaní (>1,025), budou požádáni, aby vypili 16 uncí vody a po 15 minutách po požití budou znovu testováni. Pokud jsou hyperhydratovaní (<1,002), jejich návštěvy budou přeplánovány. Stav hydratace bude zkontrolován ihned po příjezdu do laboratoře pro V2 a každý experimentální pokus (V6-V13). Vzorky moči budou zlikvidovány podle zásad UCF.

Odběr vzorků žilní krve Vzorky krve při V2, PRE-, IP, 24H, 48H a 72H budou získány pomocí vakutainerové jehly o průměru 21, 1¼ palce nebo motýlkové jehly o velikosti 23 odebrané z povrchové žíly na předloktí. Budou provedeny maximálně 2 neúspěšné pokusy o vpíchnutí jehly do jedné z paží účastníka a s jeho svolením třetí a poslední pokus v opačné paži. Tři neúspěšné pokusy o venepunkci budou mít za následek ukončení odběru krve. Problémy se zařízeními pro odběr krve, která brání odběru krve, nejsou důvodem k vyřazení ze studie a neovlivní účastníky, aby pokračovali ve zbývající části studie. Všechny odběry krve budou prováděny za aseptických podmínek. Aby se minimalizovalo riziko, bude oblast kůže, kam je jehla zavedena, před zavedením jehly vyčištěna a připravena dezinfekčním alkoholovým tamponem. Po odběru krve se místo vpichu překryje obvazem.

Celkem 8 ml (o něco méně než 2 lžičky) krve bude odebráno v každém časovém bodě (V2 & V6-V13) v jedné 4ml BD Vacutainer™ separační zkumavce séra (SST) a jedné 4ml plazmové zkumavce K2EDTA (EDTA).

Vzorky krve odebrané do 4ml zkumavky SST budou použity ke stanovení sérových koncentrací C-reaktivního proteinu (CRP) a kreatinkinázy (CK). Zkumavky se sérem se desetkrát převrátí a nechají se srážet při teplotě místnosti po dobu 30 minut před centrifugací po dobu 10 minut při 4000 ot./min. Po centrifugaci bude sérum rozděleno na alikvoty a zmraženo při -80 °C do jedné hodiny po odběru.

Vzorky krve odebrané do zkumavky s EDTA budou desetkrát jemně převráceny a ponechány při pokojové teplotě pro analýzu téhož dne. Vzorky plné krve EDTA budou analyzovány přímo u nás pomocí automatického hematologického analyzátoru (Sysmex XN-450 Automated Hematology Analyzer) umístěného v Cellular Exercise Physiology Laboratory (CEPL) v BIO 224, Building 20 (Biological Sciences). Analyty vzorku budou zahrnovat hematokrit, hemoglobin, střední korpuskulární objem (MCV), střední korpuskulární hemoglobin (MCH), průměrnou koncentraci korpuskulárního hemoglobinu (MCHC) a celkový (bílé krvinky a červené krvinky) a diferenciál (lymfocyty, monocyty a granulocyty , krevní destičky) počet buněk.

Standardizované rozcvičení Před každým hodnocením výkonu budou účastníci muset absolvovat dynamické rozcvičení. Účastníci začnou šlapáním na cykloergometru po dobu 5 minut samostatně zvoleným tempem při nastaveném odporu 75 wattů. Účastníci poté absolvují deset dřepů s vlastní váhou těla, deset výpadů při chůzi s vlastní váhou těla, deset dynamických kopů rovných nohou a deset protažení kvadricepsů při dynamické chůzi.

Dotazník kvality spánku Účastníci budou požádáni o vyplnění krátkého dotazníku o spánku se 7 otázkami, který bude obsahovat otázky týkající se jejich spánku a kvality spánku za posledních 24 hodin. Účastníci dokončí SQQ ihned po příchodu na každou experimentální zkoušku (V6-V13) Dieta a dietní deník Účastníci budou požádáni, aby vedli dva samostatné 5denní dietní záznamy pomocí aplikace „MyFitnessPal“ na svém vlastním mobilním nebo počítačovém zařízení. Účastníci budou požádáni, aby začali s každým 5denním protokolem 24 hodin před ET1 a ET2 a aby si protokol vedli sledováním veškeré spotřeby jídla a nápojů podle svých nejlepších schopností po dobu 5 dnů do dokončení 72hodinových následných návštěv (návštěv 9 a 13). Kromě toho budou účastníci požádáni, aby udržovali svou spotřebu jídla a nápojů během dvou 5denních období co nejkonzistentnější a aby mezi těmito dvěma obdobími co nejlépe odpovídali spotřebě makroživin (tuků, sacharidů a bílkovin). Účastníci, kteří odmítnou dobrovolně nahlásit spotřebu potravin a nápojů, budou ze studie vyřazeni.

Hodnocení Antropometrické hodnocení: Během V2 účastníci dokončí antropometrická hodnocení výšky, hmotnosti a tělesného složení. Výška a hmotnost budou posouzeny pomocí stadiometru a stupnice (zdravotní měřítko Professional Patient Weighing Scale, Model 500 KL, Pelstar, Alsip, IL, USA). Složení těla bude hodnoceno pomocí analýzy bioelektrické impedance (BIA; InBody 770, Biospace Co, Ltd. Soul, Korea) nebo analyzátor bioelektrické impedanční spektroskopie (Sozo; Carlsbad, CA, USA). Účastníci budou požádáni, aby si pro toto hodnocení vyprázdnili močový měchýř a sundali si boty, ponožky a všechny šperky. Podle analýzy USG budou také požádáni, aby byli osm hodin nalačno a dobře hydratovaní. S analýzou BIA nejsou spojena žádná rizika ani nepohodlí.

Dilatace zprostředkovaná tokem (Flow Mediated Dilation, FMD) Standardizace postupů a protokolu slintavky a kulhavky bude provedena podle zavedených pokynů (40). Před testováním budou subjekty odpočívat v tiché, slabě osvětlené laboratoři v poloze napůl vleže po dobu 15 minut. Automatická sfygmomanometrie brachiální tepny (IntelliSense® Professional Monitor, OMRON Healthcare Inc., Lake Forest, IL) bude použita k měření klidového systolického krevního tlaku (SBP), diastolického krevního tlaku (DBP) a srdeční frekvence (HR) na levé paži. Střední arteriální tlak (MAP) bude vypočítán pro stanovení periferního vaskulárního odporu pomocí následující rovnice: {MAP=[0,33×(SBP-DBP)]+DBP}. Průměr brachiální tepny a rychlost krve budou měřeny duplexním dopplerovským ultrazvukem s vysokým rozlišením (GE Logiq P9, GE Healthcare, Chicago, IL) za použití (5)-MHz lineárního snímače. Turniketová manžeta na paži se systémem rychlého nafouknutí (Hokanson E20; D.E. Hokanson Inc., Bellevue, WA) bude umístěna kolem pravého předloktí, bezprostředně distálně od předloktní jamky pro posouzení reaktivní hyperémie a FMD brachiální arterie. Stabilní zobrazení brachiální tepny bude provedeno pomocí pěnových polohovacích pomůcek a stabilizační svorky snímače.

FMD brachiální arterie bude průběžně měřena a zaznamenávána pomocí 10minutového protokolu. Základní průměr a rychlost krve budou zaznamenávány po dobu dvou minut. Turniketová manžeta se poté nafoukne na přibližně 240 mmHg, aby na pět minut uzavřela brachiální tepnu. Po vypuštění manžety bude záznam pokračovat po dobu tří minut, aby se vyhodnotily změny průměru a rychlosti krve. Všechna nastavení ultrazvuku budou konzistentní a měření bude provádět stejný technik (pan Dufner). Skenování bude zaznamenáno přímo z ultrazvukového systému pomocí komerčního softwaru pro zachycování videa (Snagit, TechSmith Corp., Michigan, USA) a uloženo na online disk. Offline analýzy budou prováděny pomocí softwaru pro detekci hran a sledování stěn (FMD Studio, Cardiovascular Suite, Quipu, Pisa). Po zpracování dat budou všechny parametry makro a mikrovaskulárních funkcí vypočteny pomocí vlastního vizuálního základního makra v aplikaci Microsoft Excel (3). FMD bude hodnocena během V2 a při PRE, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního pokusu.

Ultrazvukové měření (MT a EI) Rectus femoris (RF), vastus medialis (VM) a vastus lateralis (VL) MT a EI hodnocení bude provedeno na pravé noze pomocí ultrazvuku v B-módu (GE Logiq, General Electric Medical Systems, Milwaukee , WI, USA) a sonda s lineárním polem (L4-12t, 4,2-13,0 MHz, zorné pole 38,4 mm, GE Healthcare, Milwaukee, WI, USA). Všechna ultrazvuková měření budou prováděna při 12 MHz, zisk 50 dB, hloubka 5 cm a dynamický rozsah 72. Na kůži bude aplikován ve vodě rozpustný transmisní gel, aby se zlepšilo akustické spojení. V sagitální rovině budou zachyceny tři snímky každého svalu. RF snímky budou zachyceny v polovině vzdálenosti mezi horním okrajem čéšky a středem tříselného záhybu. Snímky VM budou zachyceny mezi středem tříselného záhybu a 3 palce proximálně od mediálního epikondylu femuru. Snímky VL budou zachyceny v polovině vzdálenosti mezi velkým trochanterem a horní hranicí čéšky. Ultrazvukové snímky budou analyzovány pomocí softwaru ImageJ (verze 1.53v., National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA), podle postupů popsaných Girtsem. Et al. (41). MT a EI budou hodnoceny při PRE, IP, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního testu.

Aktivní rozsah pohybu (AROM) AROM bude hodnocen po standardizovaném zahřátí, zatímco účastníci budou v poloze na břiše na polstrovaném testovacím stole s plně podepřenýma nohama. K posouzení AROM pravého kolena bude použit ruční goniometr. Goniometr bude ukotven na laterálním epikondylu femuru se stacionárním ramenem v linii s velkým trochanterem femuru a pohybovým ramenem zarovnaným s laterálním kotníkem kotníku. Účastníci budou instruováni, aby přesunuli koleno z maximální plné extenze v celém rozsahu pohybu do maximální plné flexe a drželi každý koncový bod po dobu dvou sekund. Pro stanovení AROM bude použit průměr dvou po sobě jdoucích měření. AROM bude hodnocen při PRE, IP, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního testu.

Pain Pressure Threshold PPT bude vyhodnocena bezprostředně po vyhodnocení AROM, zatímco účastníci seděli na konci čalouněného stolu s podepřenými horními nohami a volně visícími dolními nohami. Pomocí ručního 15kg dolorimetru s 1 cm gumovou špičkou bude tlak vyvíjen na RF, VM a VL v místech identických s ultrazvukovým hodnocením zvyšujícím se rychlostí 1 kg/s, dokud účastníci poprvé nepocítí bolest. v kterém bodě bude algometr odstraněn z kůže. PPT bude vyhodnocena jednou u každého pohledu, než bude získáno druhé měření PPT na každém místě. Hodnota algometru na počátku bolesti bude zaznamenána a průměr dvou měření s bude použit k označení PPT. PPT bude hodnocena při PRE, IP, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního testu.

Škála vnímání zotavení (PRS) PRS bude hodnocena jako celkový pocit zotavení v dolních končetinách (pasem dolů) a bude prováděna, když účastník stojí v kolenním úhlu 140 stupňů bezprostředně před testováním RS. Účastníci budou požádáni, aby seřadili svou úroveň zotavení na 100mm VAS v rozmezí od 0 do 100, přičemž 0 nebylo obnoveno vůbec a 100 bylo velmi dobře obnoveno. PRS bude hodnocen při PRE, IP, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního testu.

Bolest svalů (MS) MS bude hodnocena jako celkový pocit bolesti v dolních končetinách (pasem dolů) a bude provedena, když účastník stojí v úhlu kolena 140 stupňů bezprostředně před testováním MVIC. Účastníci budou požádáni, aby seřadili svou úroveň RS celých svých dolních končetin na 100mm VAS v rozmezí od 0 do 100, přičemž 0 znamená žádnou bolest a 100 znamená největší bolest, jakou si lze představit. MS bude hodnocena při PRE, IP, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního testu.

Posouzení MVIC maximální dobrovolné izometrické kontrakce (MVIC) a rychlosti rozvoje síly (RFD) bude dokončeno ve specializovaném izometrickém stojanu na dřepy a plošině s nepohyblivou tyčí. Výška tyče pro každého účastníka bude nastavena na výšku, která vyvolá úhel kolena účastníka 140 stupňů. Výška tyče bude stanovena během V2 a standardizována pro všechna následná hodnocení MVIC. Každé hodnocení MVIC se bude skládat z maximálních izometrických kontrakcí 3 x 5 s. Při každé kontrakci budou účastníci instruováni, aby jeli nahoru maximálně proti tyči natažením kolen a kyčlí po dobu 5 sekund způsobem identickým s pohybovým vzorem typického dřepu s vysokou tyčí. Každá kontrakce bude zahájena po verbální výzvě od výzkumníka a bude poskytována důsledná verbální podpora po celých 5 sekund každé kontrakce. Mezi každou kontrakcí bude poskytnuta jedna minuta odpočinku, aby se umožnilo zotavení. Kontrakce obsahující nejvyšší maximální sílu bude označena jako MVIC účastníka, z níž bude zaznamenávána rychlost rozvoje síly (RFD) při 0-250 ms, diktovaná začátkem svalové kontrakce. MVIC a RFD budou hodnoceny při PRE, IP, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního pokusu.

Vertikální skokový protokol (VJ) Vertikální protipohybové skoky budou posuzovány na stejných silových deskách používaných pro MVIC. Účastníci podstoupí 3 zkoušky vertikálního skoku s 1 minutou odpočinku. Účastníci budou instruováni, aby skákali co nejvýše s rukama v bok. Nejvyšší hodnota dosažená ve třech zkouškách bude použita k označení maximální výšky vertikálního skoku účastníka. VJ bude hodnocena při PRE, IP, 24H, 48H a 72H během každého experimentálního pokusu.

Isoinertial Squat Protocol (ISP) ISP bude veden pomocí zařízení pro izoinerciální trénink Desmotec (D11 evo, Desmotec, Biella, Itálie). Během ISP bude síla a výkon účastníka měřeny zařízením Desmotec prostřednictvím dvou podnožních silových desek. Účastníci budou požádáni, aby udrželi polohu ve stoje s chodidly na šířku identickou s tou, která se obvykle používá při tradičním dřepu na zádech, zkřížili ruce před sebou na opačné rameno a udrželi tuto pozici pro každé hodnocení ISP. Účastníci budou poté připoutáni k zařízení desmotec pomocí kabelu setrvačníku připojeného k bedernímu popruhu podle pokynů výrobce. Po správném upevnění bude napětí kabelu nastaveno na 15 kg pomocí ruční váhy (ROMECH, Paisley, Spojené království), aby bylo zajištěno konzistentní napnutí kabelu mezi účastníky. Výsledná délka kabelu každého účastníka bude zaznamenána během V2 a standardizována pro všechna následná hodnocení. ISP se bude skládat ze 6 sad po 10 maximálních opakováních při isoinerciálním odporu 0,067 kg/mm2. Bezprostředně před každou sadou účastníci dokončí dvě „volná opakování“ s nízkým úsilím, aby připravili účastníka na rytmus nadcházejícího izoinerciálního pohybu. Účastníci budou instruováni, aby vynaložili maximální úsilí během soustředné (nahoru) fáze pohybu tím, že dosáhnou úplné extenze kolena a kyčle a zhoupnou se na bříškách chodidel, ale aby svou brzdnou sílu během excentrické (dolů) fáze zdrželi na poslední možnou dobu. okamžik. Lano připevněné ke dvěma výškově nastavitelným stojanům bude umístěno vodorovně za účastníkem, aby poskytlo referenci pro konec excentrické (dolů) fáze pohybu ve výšce, která vyvolá úhel kolena ~90 stupňů, když se jemně dotkne hýždě účastníka. . Výška lana bude stanovena během V2 a standardizována pro každého následujícího ISP. Účastníci budou instruováni, aby opakovali tuto hloubku dřepu pro každou kontrakci a vynaložili maximální úsilí po celou dobu trvání každé série, přičemž je výzkumník neustále verbálně povzbuzuje.

Standardizované ochlazení Po ISP budou účastníci povinni dokončit dynamické ochlazení šlapáním na cykloergometru po dobu 3 minut samostatně zvoleným tempem při nastaveném odporu 75 wattů.