Efeito da suplementação de resveratrol no desempenho e recuperação do exercício

Este estudo utilizará um projeto de medidas repetidas cruzadas e contrabalançadas randomizadas. Os participantes completarão um total de 13 visitas ao laboratório de Intervenção e Colaboração em Fisiologia do Exercício (EPIC).

6.2 Procedimentos de cada visita individual: Visita 1 (V1): consistirá em consentimento informado e triagem de elegibilidade. Indivíduos que forneceram consentimento informado por escrito para participar serão selecionados usando o Questionário de Prontidão para Atividade Física (PAR-Q+), Questionário de Histórico Médico (MHQ) e um Questionário de Consumo de Cafeína (CCQ) para determinar a elegibilidade para participar do estudo. Os participantes elegíveis também serão examinados por um flebotomista certificado para determinar a probabilidade de punção venosa bem-sucedida. Os participantes elegíveis serão posteriormente randomizados de forma contrabalançada em dois grupos de tratamento (n=10/grupo) correspondentes a Verisperse® Resveratrol (VRES) ou Placebo (PLA) usando uma ferramenta de randomização online. Os participantes também selecionarão sua opção de lanche em uma lista de opções pré-aprovadas. Em seguida, os participantes serão agendados para a visita 2 (V2), que ocorrerá pelo menos 24 horas após a V1.

Visita 2 (V2): Os participantes chegarão para V2 em jejum (≥8 horas) tendo se abstido de álcool por pelo menos 12 horas antes. Na chegada, os participantes farão uma avaliação de hidratação urinando em um copo de amostra fornecido de no máximo 4 onças. Os participantes fornecerão uma amostra de sangue venoso para determinar as concentrações sistêmicas basais de creatina quinase e proteína C reativa. Em seguida, os participantes realizarão avaliações antropométricas de altura, peso e composição corporal por meio de análise de impendência bioelétrica (BIA). Os participantes serão solicitados a retirar os sapatos e todas as joias para a BIA. Não há riscos ou desconforto associados à análise de impendência bioelétrica. Em seguida, os participantes descansarão em um laboratório silencioso e mal iluminado em uma posição semi-reclinada por 15 minutos antes de completar a avaliação da dilatação mediada por fluxo (FMD). Os participantes receberão então seu lanche padronizado de escolha (barra energética) antes de serem submetidos à familiarização com a amplitude de movimento ativa (AROM), limiar de pressão de dor (PPT), dor muscular (MS), escala de recuperação percebida (PRS), isométrica voluntária máxima avaliações de contração (CIVM) e salto vertical (VJ) e protocolo de agachamento isoinercial (ISP) (3 séries de 6 repetições com resistência de 0,067kg/mm2). Seguindo o ISP, os participantes estarão familiarizados com o aplicativo online MyFitnessPal.

Visitas 3-5 (V3-V5): Na chegada para V3-V5, os participantes passarão por um aquecimento padronizado idêntico ao V2 antes de completarem familiarização adicional com o ISP. Todos os procedimentos para V3-V5 serão idênticos. V2-V5 serão separados por pelo menos 24 horas, mas não mais que 72 horas.

Visita 6 (V6): Ao chegar ao laboratório, os participantes preencherão um questionário de qualidade do sono (SQQ), fornecerão uma amostra de urina para avaliar o estado de hidratação e fornecerão uma amostra de sangue venoso pré-exercício para estabelecer medidas basais de creatina quinase (CK ) e proteína C reativa (PCR). Em seguida, os participantes realizarão avaliações de ultrassom PRÉ da espessura muscular (MT) e intensidade do eco (EI) seguidas pela avaliação da FMD. Os participantes receberão então o lanche padronizado (barra energética) de sua escolha e completarão um aquecimento padronizado idêntico ao V2, antes de completar as avaliações PRÉ de AROM, PPT, MS, PRS, MVIC e VJ. Os participantes serão então equipados com um monitor de frequência cardíaca e completarão o ISP seguido por um período de resfriamento baseado em ciclo de 3 minutos, uma amostra de sangue venoso e avaliações de acompanhamento de MT, EI, AROM, PPT, MS, PRS, MVIC e VJ imediatamente pós-exercício (IP). MVIC e VJ serão separados por 5 minutos para permitir uma recuperação adequada.

Visitas 7-9 (V7-V9): V7-V9 serão de natureza idêntica e ocorrerão 24, 48 e 72 horas após V6, respectivamente. Ao chegar ao laboratório para cada ensaio experimental (V7-V9), os participantes preencherão um questionário de qualidade do sono (SQQ), fornecerão uma amostra de urina para avaliar o estado de hidratação e fornecerão uma amostra de sangue venoso pré-exercício para estabelecer medidas basais de creatina. quinase (CK) e proteína C reativa (PCR). Em seguida, os participantes irão realizar avaliações ultrassonográficas de espessura muscular (MT) e intensidade de eco (EI) seguidas pela avaliação de FMD. Os participantes irão então completar um aquecimento padronizado idêntico ao V2, antes de completar as avaliações de AROM, PPT, MS, PRS, MVIC e VJ. MVIC e VJ serão separados por 5 minutos para permitir uma recuperação adequada.

Visita 10 (V10): V10 ocorrerá 32 dias após V9 e será conduzida de forma idêntica a V6.

Visitas 11-13 (V11-V13): V11-V13 ocorrerão 24, 48 e 72 horas após V10, respectivamente. V11-V13 será conduzido de forma idêntica a V7-V9)

Consentimento e triagem Antes de iniciar o estudo, os interessados ​​em participar do estudo serão solicitados a se apresentar ao laboratório EPIC para revisar e assinar um documento de consentimento informado. Os participantes que fornecerem consentimento para participar serão então avaliados quanto à elegibilidade por meio do PAR-Q+, MHQ e CCQ. Os participantes também serão solicitados a preencher um formulário de contato que registrará seu e-mail e número de celular preferidos.

Avaliação do estado de hidratação Ao chegar ao laboratório, os participantes receberão um copo de amostra para levar ao banheiro e fornecer uma amostra de urina, para que a hidratação possa ser avaliada. Depois de fornecer uma amostra de urina, um membro da equipe de pesquisa medirá a gravidade específica da urina (USG) usando um refratômetro para garantir que os participantes estejam euhidratados (1,002-1,025). Se desidratados (> 1,025), eles serão solicitados a consumir 16 onças de água e serão testados novamente após esperar 15 minutos após a ingestão. Se hiperidratados (<1.002) suas visitas serão remarcadas. O estado de hidratação será verificado imediatamente na chegada ao laboratório para V2 e cada ensaio experimental (V6-V13). As amostras de urina serão descartadas de acordo com a política da UCF.

Coleta de amostra de sangue venoso Amostras de sangue em V2, PRE-, IP, 24H, 48H e 72H serão obtidas usando uma agulha de coleta de sangue vacutainer de calibre 21 e 1¼ polegada ou agulha borboleta de calibre 23 retirada de uma veia superficial do antebraço. Serão feitas no máximo 2 tentativas sem sucesso de inserção de agulha em um dos braços do participante e, com sua permissão, uma terceira e última tentativa será feita no braço oposto. Três tentativas malsucedidas de punção venosa resultarão no término da coleta de sangue. Problemas com dispositivos de coleta de sangue que impedem a coleta de sangue não são motivos para remoção do estudo e não afetarão a continuação dos participantes com o restante do estudo. Todas as coletas de sangue serão realizadas sob condições assépticas. Para minimizar os riscos, a área da pele onde a agulha é inserida será limpa e preparada com um pano com álcool desinfetante antes da inserção da agulha. Após a coleta de sangue, o local da punção será coberto com um curativo.

Um total de 8mL (um pouco menos de 2 colheres de chá) de sangue será coletado em cada ponto de tempo (V2 e V6-V13) em um tubo de separação de soro BD Vacutainer™ (SST) de 4mL e um tubo de plasma K2EDTA de 4mL (EDTA).

Amostras de sangue coletadas no tubo SST de 4mL serão utilizadas para determinar as concentrações séricas de proteína C reativa (PCR) e creatina quinase (CK). Os tubos de soro serão invertidos dez vezes e deixados coagular em temperatura ambiente por 30 minutos antes da centrifugação por 10 minutos a 4.000 rpm. Após a centrifugação, o soro será dividido em alíquotas e congelado a -80°C dentro de uma hora após a coleta.

Amostras de sangue coletadas em tubo de EDTA serão invertidas suavemente dez vezes e deixadas em temperatura ambiente para análise no mesmo dia. Amostras de sangue total com EDTA serão analisadas diretamente internamente usando um analisador hematológico automatizado (Sysmex XN-450 Automated Hematology Analyzer) localizado no Laboratório de Fisiologia Celular do Exercício (CEPL) no BIO 224, Edifício 20 (Ciências Biológicas). Os analitos da amostra incluirão hematócrito, hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e total (glóbulos brancos e glóbulos vermelhos) e diferencial (linfócitos, monócitos e granulócitos). , contagem de células de plaquetas.

Aquecimento padronizado Antes de todas as avaliações de desempenho, os participantes deverão realizar um aquecimento dinâmico. Os participantes começarão pedalando em um cicloergômetro por 5 minutos em um ritmo auto-selecionado e com uma resistência definida de 75 watts. Os participantes irão então completar dez agachamentos com peso corporal, dez estocadas com peso corporal, dez chutes dinâmicos com as pernas retas e dez alongamentos dinâmicos de quadríceps com caminhada.

Questionário de qualidade do sono Os participantes serão solicitados a preencher um breve questionário de sono de 7 perguntas, composto por perguntas relacionadas ao sono e à qualidade do sono nas últimas 24 horas. Os participantes preencherão o SQQ imediatamente ao chegar para cada ensaio experimental (V6-V13). Dieta e registro dietético Os participantes serão solicitados a manter dois registros dietéticos separados de 5 dias usando o aplicativo "MyFitnessPal" em seu próprio celular ou dispositivo de computador. Os participantes serão solicitados a iniciar cada registro de 5 dias 24 horas antes do ET1 e ET2 e manter o registro rastreando todo o consumo de alimentos e bebidas da melhor maneira possível durante os 5 dias até a conclusão das visitas de acompanhamento de 72 horas (visitas 9 e 13, respectivamente). Além disso, os participantes serão solicitados a manter o consumo de alimentos e bebidas durante os dois períodos de 5 dias o mais consistente possível e a combinar o consumo de macronutrientes (gorduras, carboidratos e proteínas) entre os dois períodos da melhor maneira possível. Os participantes que se recusarem a relatar voluntariamente o consumo de alimentos e bebidas serão retirados do estudo.

Avaliações Avaliações antropométricas: Durante a V2, os participantes realizarão avaliações antropométricas de altura, peso e composição corporal. A altura e o peso serão avaliados por meio de estadiômetro e balança (Health-o-meter Professional Patient Weighing Scale, Modelo 500 KL, Pelstar, Alsip, IL, EUA). A composição corporal será avaliada por meio de análise de impedância bioelétrica (BIA; InBody 770, Biospace Co, Ltd. Seul, Coreia) ou analisador de espectroscopia de impedância bioelétrica (Sozo; Carlsbad, CA, EUA). Os participantes serão solicitados a esvaziar a bexiga e remover sapatos, meias e todas as joias para esta avaliação. Eles também deverão estar em jejum de oito horas e bem hidratados, conforme determinado pela análise do USG. Não há riscos ou desconfortos associados à análise BIA.

Dilatação Mediada por Fluxo (FMD) A padronização dos procedimentos e protocolos de FMD será conduzida seguindo as diretrizes estabelecidas (40). Antes do teste, os participantes descansarão em um laboratório silencioso e mal iluminado em uma posição semi-reclinada por 15 minutos. Esfigmomanometria automatizada da artéria braquial (IntelliSense® Professional Monitor, OMRON Healthcare Inc., Lake Forest, IL) será usada para medir a pressão arterial sistólica (PAS) em repouso, pressão arterial diastólica (PAD) e frequência cardíaca (FC) no braço esquerdo. A pressão arterial média (PAM) será calculada para determinar a resistência vascular periférica usando a seguinte equação: {PAM=[0,33×(PAS-PAD)]+PAD}. O diâmetro da artéria braquial e a velocidade do sangue serão medidos por ultrassom Doppler duplex de alta resolução (GE Logiq P9, GE Healthcare, Chicago, IL) usando um transdutor de matriz linear de (5) MHz. Um manguito de torniquete de braço com sistema de inflação rápida (Hokanson E20; D.E. Hokanson Inc., Bellevue, WA) será colocado ao redor do antebraço direito, imediatamente distal à fossa antecubital para avaliação de hiperemia reativa e febre aftosa da artéria braquial. A imagem estável da artéria braquial será obtida usando auxiliares de posicionamento de espuma e pinça estabilizadora do transdutor.

A FMD da artéria braquial será continuamente medida e registrada usando um protocolo de 10 minutos. O diâmetro da linha de base e a velocidade do sangue serão registrados por dois minutos. O manguito do torniquete será então insuflado até aproximadamente 240 mmHg para ocluir a artéria braquial por cinco minutos. Após a desinsuflação do manguito, a gravação continuará por três minutos para avaliar as mudanças no diâmetro e na velocidade do sangue. Todas as configurações de ultrassom serão mantidas consistentes e a medição será realizada pelo mesmo técnico (Sr. Dufner). As varreduras serão gravadas diretamente do sistema de ultrassom usando software comercial de captura de vídeo (Snagit, TechSmith Corp., Michigan, EUA) e salvo em uma unidade de arquivo online. As análises offline serão realizadas usando software de detecção de borda e rastreamento de parede (FMD Studio, Cardiovascular Suite, Quipu, Pisa). Após o processamento dos dados, todos os parâmetros de função macro e microvascular serão calculados usando uma macro visual básica personalizada no Microsoft Excel (3). A FMD será avaliada durante V2 e PRÉ, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

Medição de ultrassom (MT e EI) As avaliações de reto femoral (RF), vasto medial (VM) e vasto lateral (VL) MT e EI serão feitas na perna direita usando ultrassom modo B (GE Logiq, General Electric Medical Systems, Milwaukee , WI, EUA) e uma sonda de matriz linear (L4-12t, 4,2-13,0 MHz, campo de visão de 38,4 mm, GE Healthcare, Milwaukee, WI, EUA). Todas as medidas de ultrassom serão realizadas em 12 MHz, ganho de 50 dB, profundidade de 5cm e faixa dinâmica de 72. Um gel de transmissão solúvel em água será aplicado na pele para melhorar o acoplamento acústico. Três imagens de cada músculo serão capturadas no plano sagital. As imagens de RF serão capturadas na metade da distância entre a borda superior da patela e o centro da prega inguinal. As imagens VM serão capturadas entre o centro da prega inguinal e 3 polegadas proximais ao epicôndilo medial do fêmur. As imagens de VL serão capturadas na metade da distância entre o trocânter maior e a borda superior da patela. As imagens de ultrassom serão analisadas no software ImageJ (versão 1.53v., National Institutes of Health, Bethesda, MD, EUA), conforme procedimentos descritos por Girts. Et al. (41). MT e EI serão avaliados em PRE, IP, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

Amplitude de movimento ativa (AROM) A AROM será avaliada após o aquecimento padronizado enquanto os participantes estão em posição prona em uma mesa de teste acolchoada com as pernas totalmente apoiadas. Um goniômetro portátil será usado para avaliar AROM do joelho direito. O goniômetro será ancorado no epicôndilo lateral do fêmur com o braço estacionário alinhado com o trocânter maior do fêmur e o braço móvel alinhado com o maléolo lateral do tornozelo. Os participantes serão instruídos a mover o joelho desde a extensão total máxima em toda a amplitude de movimento até a flexão completa máxima, mantendo cada ponto final por dois segundos. A média de duas medições consecutivas será usada para determinar AROM. AROM será avaliada em PRE, IP, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

O PPT do limiar de pressão da dor será avaliado imediatamente após a avaliação AROM, enquanto os participantes sentaram-se na extremidade da mesa acolchoada com as pernas apoiadas e as pernas penduradas livremente. Usando um dolorímetro portátil de 15 kg com ponta de borracha de 1 cm, a pressão será aplicada ao RF, VM e VL em locais idênticos aos das avaliações ultrassonográficas, aumentando a uma taxa de 1 kg/s até que os participantes relatem pela primeira vez sentir dor, em ponto em que o algômetro será retirado da pele. O PPT será avaliado uma vez em cada local antes de uma segunda medida de PPT em cada local ser adquirida. O valor do algômetro no início da dor será registrado e a média de duas medidas será usada para denotar PPT. O PPT será avaliado em PRE, IP, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

Escala de recuperação percebida (PRS) A PRS será avaliada como uma sensação total de recuperação nas extremidades inferiores (cintura para baixo) e será realizada enquanto o participante estiver em um ângulo de joelho de 140 graus imediatamente antes do teste de MS. Os participantes serão solicitados a classificar seu nível de recuperação em um VAS de 100 mm variando de 0 a 100, sendo 0 nada recuperado e 100 muito bem recuperado. PRS será avaliado em PRE, IP, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

Dor muscular (MS) MS será avaliada como uma sensação total de dor nas extremidades inferiores (cintura para baixo) e será realizada enquanto o participante estiver em um ângulo de joelho de 140 graus imediatamente antes do teste de CIVM. Os participantes serão solicitados a classificar seu nível de EM em todas as extremidades inferiores em um VAS de 100 mm variando de 0 a 100, sendo 0 nenhuma dor e 100 sendo a maior dor imaginável. A MS será avaliada em PRE, IP, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

As avaliações de contração isométrica voluntária máxima (CIVM) e taxa de desenvolvimento de força (RFD) serão concluídas dentro de um rack e plataforma de agachamento isométrico especializado com uma barra imóvel. A altura da barra para cada participante será definida em uma altura que produza um ângulo de joelho do participante de 140 graus. A altura da barra será estabelecida durante V2 e padronizada para todas as avaliações subsequentes de CIVM. Cada avaliação CIVM consistirá em contrações isométricas máximas de 3 x 5s. Para cada contração, os participantes serão instruídos a subir ao máximo contra a barra, estendendo os joelhos e quadris por 5s de maneira idêntica ao padrão de movimento de um típico agachamento com barra alta nas costas. Cada contração será iniciada seguindo uma solicitação verbal do pesquisador e encorajamento verbal consistente será fornecido durante todos os 5s de cada contração. Um minuto de descanso será fornecido entre cada contração para permitir a recuperação. A contração contendo o pico de força mais alto será denotada como a CIVM do participante, a partir da qual a taxa de desenvolvimento de força (RFD) será registrada em 0-250ms, ditada pelo início da contração muscular. CIVM e RFD serão avaliados em PRE, IP, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

Protocolo de Salto Vertical (VJ) Os saltos verticais com contramovimento serão avaliados nas mesmas plataformas de força utilizadas para a CIVM. Os participantes serão submetidos a 3 tentativas de salto vertical com 1 minuto de descanso entre elas. Os participantes serão instruídos a saltar o mais alto possível com as mãos na cintura. O maior valor alcançado nas três tentativas será usado para denotar a altura máxima do salto vertical do participante. VJ será avaliado em PRE, IP, 24H, 48H e 72H durante cada ensaio experimental.

Protocolo de agachamento isoinercial (ISP) O ISP será realizado usando o dispositivo de treinamento isoinercial Desmotec (D11 evo, Desmotec, Biella, Itália). Durante o ISP, a força e a potência do participante serão medidas pelo dispositivo Desmotec por meio de duas plataformas de força sob os pés. Os participantes serão solicitados a manter uma posição em pé com os pés em uma largura idêntica à normalmente usada durante um agachamento tradicional, cruzar os braços na frente deles até o ombro oposto e manter essa posição para cada avaliação do ISP. Os participantes serão então amarrados ao dispositivo desmotec por meio do cabo do volante conectado a uma cinta de cintura de acordo com as instruções do fabricante. Uma vez devidamente fixado, a tensão do cabo será ajustada em 15kg usando uma balança portátil (ROMECH, Paisley, Reino Unido) para garantir uma tensão consistente do cabo entre os participantes. O comprimento resultante do cabo de cada participante será registrado durante V2 e padronizado para todas as avaliações subsequentes. O ISP consistirá em 6 séries de 10 repetições máximas com resistência isoinercial de 0,067kg/mm2. Imediatamente antes de cada série, os participantes completarão duas "repetições livres" de baixo esforço para preparar o participante para o ritmo do movimento isoinercial iminente. Os participantes serão instruídos a dar o esforço máximo durante a fase concêntrica (ascendente) do movimento, alcançando a extensão total do joelho e do quadril e balançando na planta dos pés, mas a atrasar a força de frenagem durante a fase excêntrica (descendente) até o último possível. momento. Uma corda fixada em dois suportes ajustáveis ​​em altura será posicionada horizontalmente atrás do participante para fornecer uma referência para o final da fase excêntrica (para baixo) do movimento a uma altura que provoca um ângulo do joelho de ~90 graus quando tocado suavemente pelos glúteos do participante . A altura da corda será estabelecida durante a V2 e padronizada para cada ISP subsequente. Os participantes serão instruídos a repetir a profundidade do agachamento para cada contração e dar o esforço máximo durante toda a duração de cada série, sendo consistentemente encorajados verbalmente pelo pesquisador.

Desaquecimento padronizado Seguindo o ISP, os participantes serão obrigados a completar um desaquecimento dinâmico pedalando em uma bicicleta ergométrica por 3 minutos em um ritmo auto-selecionado com uma resistência definida de 75 watts.