Efecto de la suplementación con resveratrol sobre el rendimiento y la recuperación del ejercicio

Este estudio utilizará un diseño de medidas repetidas cruzadas, contrapesadas y aleatorias. Los participantes completarán un total de 13 visitas al laboratorio de Intervención y Colaboración en Fisiología del Ejercicio (EPIC).

6.2 Procedimientos de cada visita individual: Visita 1 (V1): consistirá en el consentimiento informado y la evaluación de elegibilidad. Las personas que hayan proporcionado su consentimiento informado por escrito para participar serán evaluados utilizando el Cuestionario de preparación para la actividad física (PAR-Q+), el Cuestionario de historial médico (MHQ) y el Cuestionario de consumo de cafeína (CCQ) para determinar la elegibilidad para participar en el estudio. Los participantes elegibles también serán examinados por un flebotomista certificado para determinar la probabilidad de una venopunción exitosa. Posteriormente, los participantes elegibles serán asignados al azar de forma contrapesada a dos grupos de tratamiento (n = 10/grupo) correspondientes a Verisperse® Resveratrol (VRES) o Placebo (PLA) utilizando una herramienta de aleatorización en línea. Los participantes también seleccionarán su refrigerio de una lista de opciones previamente aprobadas. Después de esto, se programará a los participantes para la visita 2 (V2), que ocurrirá al menos 24 horas después de la V1.

Visita 2 (V2): Los participantes llegarán a la V2 en ayunas (≥8 horas) habiéndose abstenido de alcohol durante al menos 12 horas antes. A su llegada, los participantes completarán una evaluación de hidratación orinando en un vaso de muestra provisto de no más de 4 oz. Luego, los participantes proporcionarán una muestra de sangre venosa para determinar las concentraciones sistémicas iniciales de creatina quinasa y proteína C reactiva. A continuación, los participantes completarán evaluaciones antropométricas de altura, peso y composición corporal mediante análisis de impedancia bioeléctrica (BIA). Se pedirá a los participantes que se quiten los zapatos y todas las joyas para BIA. No existen riesgos ni molestias asociadas con el análisis de impedancia bioeléctrica. A continuación, los participantes descansarán en un laboratorio tranquilo y con poca luz en una posición semiinclinada durante 15 minutos antes de completar la evaluación de dilatación mediada por flujo (FMD). Luego, a los participantes se les proporcionará el refrigerio estandarizado de su elección (barra energética) antes de familiarizarse con el rango de movimiento activo (AROM), el umbral de presión del dolor (PPT), el dolor muscular (MS), la escala de recuperación percibida (PRS), la escala isométrica voluntaria máxima. evaluaciones de contracción (MVIC) y salto vertical (VJ) y el protocolo de sentadilla isoinercial (ISP) (3 series de 6 repeticiones con una resistencia de 0,067 kg/mm2). Después del ISP, los participantes se familiarizarán con la aplicación MyFitnessPal en línea.

Visitas 3-5 (V3-V5): a su llegada para V3-V5, los participantes se someterán a un calentamiento estandarizado idéntico al V2 antes de completar una familiarización adicional con el ISP. Todos los procedimientos para V3-V5 serán idénticos. V2-V5 estarán separados por al menos 24 horas pero no más de 72 horas.

Visita 6 (V6): al llegar al laboratorio, los participantes completarán un cuestionario sobre la calidad del sueño (SQQ), proporcionarán una muestra de orina para evaluar el estado de hidratación y proporcionarán una muestra de sangre venosa antes del ejercicio para establecer medidas iniciales de creatina quinasa (CK). ) y proteína C reactiva (PCR). A continuación, los participantes completarán evaluaciones PRE ecográficas del grosor muscular (MT) y la intensidad del eco (EI), seguidas de la evaluación de la fiebre aftosa. Luego, los participantes recibirán el refrigerio estandarizado (barra energética) de su elección y completarán un calentamiento estandarizado idéntico al V2, antes de completar las evaluaciones PRE de AROM, PPT, MS, PRS, MVIC y VJ. Luego, a los participantes se les colocará un monitor de frecuencia cardíaca y completarán el ISP seguido de un período de enfriamiento basado en ciclos de 3 minutos, una muestra de sangre venosa y evaluaciones de seguimiento de MT, EI, AROM, PPT, MS, PRS, MVIC y VJ inmediatamente después del ejercicio (IP). MVIC y VJ estarán separados por 5 minutos para permitir una recuperación adecuada.

Visitas 7-9 (V7-V9): V7-V9 serán de naturaleza idéntica y ocurrirán 24, 48 y 72 horas después de V6, respectivamente. Al llegar al laboratorio para cada prueba experimental (V7-V9), los participantes completarán un cuestionario sobre la calidad del sueño (SQQ), proporcionarán una muestra de orina para evaluar el estado de hidratación y proporcionarán una muestra de sangre venosa antes del ejercicio para establecer medidas de referencia de creatina. quinasa (CK) y proteína C reactiva (PCR). A continuación, los participantes completarán evaluaciones ecográficas del grosor muscular (MT) y la intensidad del eco (EI), seguidas de la evaluación de la fiebre aftosa. Luego, los participantes completarán un calentamiento estandarizado idéntico al V2, antes de completar las evaluaciones de AROM, PPT, MS, PRS, MVIC y VJ. MVIC y VJ estarán separados por 5 minutos para permitir una recuperación adecuada.

Visita 10 (V10): La V10 ocurrirá 32 días después de la V9 y se realizará de manera idéntica a la V6.

Visitas 11-13 (V11-V13): V11-V13 ocurrirán 24, 48 y 72 horas después de V10, respectivamente. V11-V13 se llevará a cabo de manera idéntica a V7-V9)

Consentimiento y evaluación Antes de comenzar el estudio, se pedirá a las personas interesadas en participar en el estudio que se presenten en el laboratorio EPIC para revisar y firmar un documento de consentimiento informado. Los participantes que brinden su consentimiento para participar serán evaluados para determinar su elegibilidad a través de PAR-Q+, MHQ y CCQ. También se pedirá a los participantes que completen un formulario de contacto que registrará su correo electrónico y número de teléfono celular preferidos.

Evaluación del estado de hidratación Al llegar al laboratorio, a los participantes se les entregará un vaso de muestra para llevar al baño y proporcionar una muestra de orina, para que se pueda evaluar la hidratación. Después de proporcionar una muestra de orina, un miembro del equipo de investigación medirá la gravedad específica de la orina (USG) utilizando un refractómetro para garantizar que los participantes estén euhidratados (1,002-1,025). Si están deshidratados (>1,025), se les pedirá que consuman 16 oz de agua y se les volverá a realizar la prueba después de esperar 15 minutos después de la ingestión. Si están hiperhidratados (<1.002) se reprogramarán sus visitas. El estado de hidratación se verificará inmediatamente al llegar al laboratorio para V2 y cada prueba experimental (V6-V13). Las muestras de orina se eliminarán de acuerdo con la política de la UCF.

Recolección de muestras de sangre venosa Las muestras de sangre en V2, PRE-, IP, 24 H, 48 H y 72 H se obtendrán utilizando una aguja de recolección de sangre vacutainer de calibre 21 y 1¼ de pulgada o una aguja de mariposa de calibre 23 extraída de una vena superficial del antebrazo. Se realizarán un máximo de 2 intentos fallidos de insertar una aguja en uno de los brazos del participante y, con su permiso, se realizará un tercer y último intento en el brazo opuesto. Tres intentos fallidos de punción venosa darán como resultado la finalización de la extracción de sangre. Los problemas con los dispositivos de extracción de sangre que impiden la extracción de sangre no son motivo de exclusión del estudio y no afectarán la continuación de los participantes con el resto del estudio. Todas las extracciones de sangre se realizarán en condiciones asépticas. Para minimizar los riesgos, el área de la piel donde se inserta la aguja se limpiará y preparará con una toallita desinfectante con alcohol antes de insertar la aguja. Después de la extracción de sangre, se cubrirá el lugar de la punción con una venda.

Se recolectará un total de 8 ml (un poco menos de 2 cucharaditas) de sangre en cada momento (V2 y V6-V13) en un tubo de separación de suero (SST) BD Vacutainer™ de 4 ml y un tubo de plasma K2EDTA (EDTA) de 4 ml.

Se utilizarán muestras de sangre recolectadas en el tubo SST de 4 ml para determinar las concentraciones séricas de proteína C reactiva (PCR) y creatina quinasa (CK). Los tubos de suero se invertirán diez veces y se dejarán coagular a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de la centrifugación durante 10 minutos a 4000 rpm. Después de la centrifugación, el suero se dividirá en alícuotas y se congelará a -80 °C dentro de una hora después de su recolección.

Las muestras de sangre recolectadas en un tubo de EDTA se invertirán suavemente diez veces y se dejarán a temperatura ambiente para su análisis el mismo día. Las muestras de sangre total con EDTA se analizarán directamente internamente utilizando un analizador de hematología automatizado (Analizador de hematología automatizado Sysmex XN-450) ubicado en el Laboratorio de fisiología del ejercicio celular (CEPL) en BIO 224, Edificio 20 (Ciencias biológicas). Los analitos de muestra incluirán hematocrito, hemoglobina, volumen corpuscular medio (MCV), hemoglobina corpuscular media (MCH), concentración de hemoglobina corpuscular media (MCHC) y total (glóbulos blancos y glóbulos rojos) y diferencial (linfocitos, monocitos y granulocitos). , plaquetas) recuentos de células.

Calentamiento estandarizado Antes de todas las evaluaciones de desempeño, los participantes deberán completar un calentamiento dinámico. Los participantes comenzarán pedaleando en un cicloergómetro durante 5 minutos a un ritmo autoseleccionado con una resistencia establecida de 75 vatios. Luego, los participantes completarán diez sentadillas con el peso del cuerpo, diez estocadas para caminar con el peso del cuerpo, diez patadas dinámicas con las piernas estiradas y diez estiramientos dinámicos del cuádriceps al caminar.

Cuestionario sobre la calidad del sueño A los participantes se les pedirá que completen un breve cuestionario sobre el sueño de 7 preguntas que consta de preguntas relacionadas con su sueño y la calidad del sueño en las últimas 24 horas. Los participantes completarán el SQQ inmediatamente al llegar a cada prueba experimental (V6-V13). Dieta y registro dietético. Se pedirá a los participantes que mantengan dos registros dietéticos de 5 días separados utilizando la aplicación "MyFitnessPal" en su propio dispositivo celular o informático. Se pedirá a los participantes que comiencen cada registro de 5 días 24 horas antes de ET1 y ET2 y que mantengan el registro rastreando todo el consumo de alimentos y bebidas lo mejor que puedan durante los 5 días hasta la finalización de las visitas de seguimiento de 72 horas (visitas 9 y 13, respectivamente). Además, se pedirá a los participantes que mantengan su consumo de alimentos y bebidas durante los dos períodos de 5 días lo más consistente posible y que igualen el consumo de macronutrientes (grasas, carbohidratos y proteínas) entre los dos períodos lo mejor que puedan. Los participantes que se nieguen a informar voluntariamente el consumo de alimentos y bebidas serán retirados del estudio.

Evaluaciones Evaluaciones antropométricas: durante la V2, los participantes completarán evaluaciones antropométricas de altura, peso y composición corporal. La altura y el peso se evaluarán utilizando un estadiómetro y una báscula (báscula profesional para pacientes Health-o-meter, modelo 500 KL, Pelstar, Alsip, IL, EE. UU.). La composición corporal se evaluará mediante análisis de impedancia bioeléctrica (BIA; InBody 770, Biospace Co, Ltd. Seúl, Corea) o analizador de espectroscopia de impedancia bioeléctrica (Sozo; Carlsbad, CA, EE. UU.). Se pedirá a los participantes que vacíen la vejiga y se quiten los zapatos, los calcetines y todas las joyas para esta evaluación. También se les pedirá que ayunen durante ocho horas y estén bien hidratados, según lo determinado por el análisis USG. No existen riesgos ni molestias asociados con el análisis BIA.

Dilatación mediada por flujo (FMD) La estandarización de los procedimientos y protocolos de FMD se llevará a cabo siguiendo pautas establecidas (40). Antes de la prueba, los sujetos descansarán en un laboratorio tranquilo y con poca luz en una posición semireclinada durante 15 minutos. Se utilizará esfigmomanometría automatizada de la arteria braquial (IntelliSense® Professional Monitor, OMRON Healthcare Inc., Lake Forest, IL) para medir la presión arterial sistólica (PAS), la presión arterial diastólica (PAD) y la frecuencia cardíaca (FC) en reposo en el brazo izquierdo. La presión arterial media (PAM) se calculará para determinar la resistencia vascular periférica utilizando la siguiente ecuación: {PAM=[0,33 × (PAS-PAD)]+PAD}. El diámetro de la arteria braquial y la velocidad de la sangre se medirán mediante ecografía Doppler dúplex de alta resolución (GE Logiq P9, GE Healthcare, Chicago, IL) utilizando un transductor de matriz lineal (5) MHz. Un manguito de torniquete para el brazo con sistema de inflado rápido (Hokanson E20; D.E. Hokanson Inc., Bellevue, WA) se colocará alrededor del antebrazo derecho, inmediatamente distal a la fosa antecubital para evaluar la hiperemia reactiva y la fiebre aftosa de la arteria braquial. Se lograrán imágenes estables de la arteria braquial utilizando ayudas de posicionamiento de espuma y una abrazadera estabilizadora del transductor.

La fiebre aftosa de la arteria braquial se medirá y registrará continuamente mediante un protocolo de 10 minutos. El diámetro inicial y la velocidad de la sangre se registrarán durante dos minutos. Luego, se inflará el manguito del torniquete a aproximadamente 240 mmHg para ocluir la arteria humeral durante cinco minutos. Después de desinflar el manguito, el registro continuará durante tres minutos para evaluar los cambios en el diámetro y la velocidad de la sangre. Todas las configuraciones de ultrasonido se mantendrán consistentes y las mediciones las completará el mismo técnico (Sr. Dufner). Las exploraciones se grabarán directamente desde el sistema de ultrasonido utilizando un software comercial de captura de video (Snagit, TechSmith Corp., Michigan, EE. UU.) y se guardarán en una unidad de archivos en línea. Los análisis fuera de línea se realizarán utilizando software de detección de bordes y seguimiento de paredes (FMD Studio, Cardiovascular Suite, Quipu, Pisa). Después del procesamiento de datos, todos los parámetros de función macro y microvascular se calcularán utilizando una macro visual básica personalizada en Microsoft Excel (3). La fiebre aftosa se evaluará durante V2 y PRE, 24 h, 48 h y 72 h durante cada prueba experimental.

Medición por ultrasonido (MT y EI) Las evaluaciones de MT y EI del recto femoral (RF), vasto medial (VM) y vasto lateral (VL) se tomarán en la pierna derecha mediante ultrasonido en modo B (GE Logiq, General Electric Medical Systems, Milwaukee , WI, EE. UU.) y una sonda de matriz lineal (L4-12t, 4.2-13.0 MHz, campo de visión de 38,4 mm, GE Healthcare, Milwaukee, WI, EE. UU.). Todas las mediciones de ultrasonido se realizarán a 12 MHz, ganancia de 50 dB, profundidad de 5 cm y rango dinámico de 72. Se aplicará un gel de transmisión soluble en agua sobre la piel para mejorar el acoplamiento acústico. Se capturarán tres imágenes de cada músculo en el plano sagital. Las imágenes de RF se capturarán a la mitad de la distancia entre el borde superior de la rótula y el centro del pliegue inguinal. Las imágenes de VM se capturarán entre el centro del pliegue inguinal y 3 pulgadas proximal al epicóndilo medial del fémur. Las imágenes de VL se capturarán a la mitad de la distancia entre el trocánter mayor y el borde superior de la rótula. Las imágenes de ultrasonido se analizarán utilizando el software ImageJ (Versión 1.53v., Institutos Nacionales de Salud, Bethesda, MD, EE. UU.), según los procedimientos descritos por Girts. Et al. (41). MT y EI se evaluarán en PRE, IP, 24 H, 48 H y 72 H durante cada prueba experimental.

Rango de movimiento activo (AROM) El AROM se evaluará después del calentamiento estandarizado mientras los participantes están en decúbito prono sobre una mesa de prueba acolchada con las piernas totalmente apoyadas. Se utilizará un goniómetro de mano para evaluar la AROM de la rodilla derecha. El goniómetro se anclará en el epicóndilo lateral del fémur con el brazo estacionario alineado con el trocánter mayor del fémur y el brazo de movimiento alineado con el maléolo lateral del tobillo. Se indicará a los participantes que muevan la rodilla desde la extensión máxima completa en todo el rango de movimiento hasta la flexión máxima máxima sosteniendo cada punto final durante dos segundos. Se utilizará el promedio de dos mediciones consecutivas para determinar la AROM. AROM se evaluará en PRE, IP, 24 H, 48 H y 72 H durante cada prueba experimental.

El PPT del umbral de presión del dolor se evaluará inmediatamente después de la evaluación AROM mientras los participantes se sentaban en el extremo de la mesa acolchada con la parte superior de las piernas apoyada y la parte inferior de las piernas colgando libremente. Usando un dolorímetro portátil de 15 kg con una punta de goma de 1 cm, se aplicará presión a RF, VM y VL en ubicaciones idénticas a las de las evaluaciones de ultrasonido aumentando a una velocidad de 1 kg/s hasta que los participantes informen por primera vez que sienten dolor, en en qué punto se retirará el algómetro de la piel. El PPT se evaluará una vez en cada vista antes de adquirir una segunda medida de PPT en cada ubicación. Se registrará el valor del algómetro al inicio del dolor y se utilizará el promedio de dos medidas para indicar PPT. El PPT se evaluará en PRE, IP, 24 h, 48 h y 72 h durante cada prueba experimental.

Escala de recuperación percibida (PRS) La PRS se evaluará como una sensación total de recuperación en las extremidades inferiores (cintura hacia abajo) y se realizará mientras el participante está de pie en un ángulo de rodilla de 140 grados inmediatamente antes de la prueba de EM. Se pedirá a los participantes que califiquen su nivel de recuperación en una VAS de 100 mm que va de 0 a 100, siendo 0 nada recuperado y 100 muy bien recuperado. PRS se evaluará en PRE, IP, 24 H, 48 H y 72 H durante cada prueba experimental.

Dolor muscular (EM) La EM se evaluará como una sensación total de dolor en las extremidades inferiores (cintura hacia abajo) y se realizará mientras el participante está de pie en un ángulo de rodilla de 140 grados inmediatamente antes de la prueba MVIC. Se pedirá a los participantes que califiquen su nivel de EM en todas sus extremidades inferiores en una EVA de 100 mm que va de 0 a 100, siendo 0 ningún dolor y 100 el mayor dolor imaginable. La EM se evaluará en PRE, IP, 24 h, 48 h y 72 h durante cada prueba experimental.

Las evaluaciones MVIC de contracción isométrica voluntaria máxima (MVIC) y desarrollo de tasa de fuerza (RFD) se completarán dentro de una plataforma y soporte para sentadillas isométricas especializadas con una barra inamovible. La altura de la barra para cada participante se establecerá a una altura que provoque un ángulo de rodilla del participante de 140 grados. La altura de la barra se establecerá durante V2 y se estandarizará para todas las evaluaciones MVIC posteriores. Cada evaluación MVIC constará de contracciones isométricas máximas de 3 x 5 s. Para cada contracción, se indicará a los participantes que impulsen hacia arriba al máximo contra la barra extendiendo las rodillas y las caderas durante 5 segundos de una manera idéntica al patrón de movimiento de una típica sentadilla trasera con barra alta. Cada contracción se iniciará siguiendo una indicación verbal del investigador y se proporcionará un estímulo verbal constante durante los 5 segundos completos de cada contracción. Se proporcionará un minuto de descanso entre cada contracción para permitir la recuperación. La contracción que contiene la fuerza máxima más alta se denominará MVIC del participante a partir de la cual se registrará la tasa de desarrollo de fuerza (RFD) en 0-250 ms, dictada por el inicio de la contracción muscular. MVIC y RFD se evaluarán en PRE, IP, 24 h, 48 h y 72 h durante cada prueba experimental.

Protocolo de salto vertical (VJ) Los saltos verticales con contramovimiento se evaluarán en las mismas placas de fuerza utilizadas para el MVIC. Los participantes se someterán a 3 pruebas de salto vertical con 1 minuto de descanso entre ellas. Se indicará a los participantes que salten lo más alto posible con las manos en las caderas. El valor más alto logrado en las tres pruebas se utilizará para indicar la altura máxima del salto vertical del participante. VJ se evaluará en PRE, IP, 24 H, 48 H y 72 H durante cada prueba experimental.

Protocolo de sentadilla isoinercial (ISP) El ISP se llevará a cabo utilizando el dispositivo de entrenamiento isoinercial Desmotec (D11 evo, Desmotec, Biella, Italia). Durante el ISP, la fuerza y ​​​​la producción de potencia del participante se medirán mediante el dispositivo Desmotec a través de dos placas de fuerza debajo de los pies. Se pedirá a los participantes que mantengan una posición de pie con los pies en un ancho idéntico al que se usa normalmente durante una sentadilla trasera tradicional, que crucen los brazos frente a ellos hasta el hombro opuesto y que mantengan esa posición para cada evaluación del ISP. Luego, se sujetará a los participantes al dispositivo desmotec mediante el cable del volante conectado a una correa para la cintura de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Una vez sujeto correctamente, la tensión del cable se establecerá en 15 kg utilizando una báscula portátil (ROMECH, Paisley, Reino Unido) para garantizar una tensión constante del cable entre los participantes. La longitud resultante del cable de cada participante se registrará durante la V2 y se estandarizará para todas las evaluaciones posteriores. El ISP constará de 6 series de 10 repeticiones máximas con una resistencia isoinercial de 0,067 kg/mm2. Inmediatamente antes de cada serie, los participantes completarán dos "repeticiones libres" de bajo esfuerzo para preparar al participante para el ritmo del movimiento isoinercial inminente. Se instruirá a los participantes para que realicen el máximo esfuerzo durante la fase concéntrica (hacia arriba) del movimiento alcanzando la extensión completa de la rodilla y la cadera y balanceándose sobre las puntas de los pies, pero retrasando su fuerza de frenado durante la fase excéntrica (hacia abajo) hasta el último momento posible. momento. Se colocará una cuerda fijada a dos soportes de altura ajustable horizontalmente detrás del participante para proporcionar una referencia para el final de la fase excéntrica (hacia abajo) del movimiento a una altura que provoque un ángulo de rodilla de ~90 grados cuando los glúteos del participante la toquen suavemente. . La altura de la cuerda se establecerá durante V2 y se estandarizará para cada ISP posterior. Se indicará a los participantes que repitan esa profundidad de sentadilla para cada contracción y realicen el máximo esfuerzo durante toda la duración de cada serie mientras el investigador los alienta verbalmente de manera constante.

Enfriamiento estandarizado Después del ISP, los participantes deberán completar un enfriamiento dinámico pedaleando en un cicloergómetro durante 3 minutos a un ritmo autoseleccionado con una resistencia establecida de 75 vatios.