Effekten av Resveratrol-tilskudd på treningsytelse og restitusjon

Denne studien vil bruke et randomisert motbalansert cross-over-design for gjentatte mål. Deltakerne vil gjennomføre totalt 13 besøk til laboratoriet Exercise Physiology Intervention and Collaboration (EPIC).

6.2 Prosedyrer for hvert enkelt besøk: Besøk 1 (V1): vil bestå av informert samtykke og kvalifikasjonsscreening. Personer som har gitt skriftlig informert samtykke til å delta, vil bli screenet ved hjelp av Physical Activity Readiness Questionnaire (PAR-Q+), Medical History Questionnaire (MHQ) og et koffeinforbruksspørreskjema (CCQ) for å avgjøre om de er kvalifisert til å delta i studien. Kvalifiserte deltakere vil også bli undersøkt av en sertifisert phlebotomist for å fastslå sannsynligheten for vellykket venepunktur. Kvalifiserte deltakere vil deretter bli randomisert på en motbalansert måte i to behandlingsgrupper (n=10/gruppe) som tilsvarer enten Verisperse® Resveratrol (VRES) eller Placebo (PLA) ved bruk av et online randomiseringsverktøy. Deltakerne vil også velge snacks fra en liste over forhåndsgodkjente alternativer. Etter dette vil deltakerne planlegges for besøk 2 (V2), som vil finne sted minst 24 timer etter V1.

Besøk 2 (V2): Deltakerne kommer til V2 i fastende tilstand (≥8 timer) etter å ha avstått fra alkohol i minst 12 timer før. Ved ankomst vil deltakerne fullføre en hydreringsvurdering ved å urinere i en medfølgende prøvekopp på ikke mer enn 4 oz. Deltakerne vil deretter gi en venøs blodprøve for å bestemme baseline systemiske konsentrasjoner av kreatinkinase og C-reaktivt protein. Deretter vil deltakerne fullføre antropometriske vurderinger av høyde, vekt og kroppssammensetning via bioelektrisk impendensanalyse (BIA). Deltakerne vil bli bedt om å fjerne sko og alle smykker for BIA. Det er ingen risiko eller ubehag forbundet med den bioelektriske impendensanalysen. Deretter vil deltakerne hvile i et stille, svakt opplyst laboratorium i en halvt liggende stilling i 15 minutter før de fullfører vurderingen av strømningsmediert dilatasjon (FMD). Deltakerne vil deretter bli utstyrt med sin standardiserte mellommåltid (energibar) før de blir kjent med aktivt bevegelsesområde (AROM), smertetrykksterskel (PPT), muskelsårhet (MS) oppfattet restitusjonsskala (PRS), maksimal frivillig isometrisk kontraksjon (MVIC), og vertikalhopp (VJ) vurderinger og isoinertial squat protocol (ISP) (3 sett med 6 repetisjoner kl. en motstand på 0,067 kg/mm2). Etter Internett-leverandøren vil deltakerne bli kjent med den elektroniske MyFitnessPal-applikasjonen.

Besøk 3-5 (V3-V5): Ved ankomst for V3-V5 vil deltakerne gjennomgå en standardisert oppvarming identisk med V2 før de fullfører ytterligere kjennskap til ISP. Alle prosedyrer for V3-V5 vil være identiske. V2-V5 vil være atskilt med minst 24 timer, men ikke mer enn 72 timer.

Besøk 6 (V6): Ved ankomst til laboratoriet vil deltakerne fylle ut et søvnkvalitetsspørreskjema (SQQ), gi en urinprøve for å vurdere hydreringsstatus, og gi en venøs blodprøve før trening for å etablere baselinemål for kreatinkinase (CK). ) og C-reaktivt protein (CRP). Deretter vil deltakerne fullføre PRE-ultralydvurderinger av muskeltykkelse (MT) og ekkointensitet (EI) etterfulgt av FMD-vurderingen. Deltakerne vil da få den standardiserte snacksen (energibaren) etter eget valg og fullføre en standardisert oppvarming identisk med V2, før de fullfører PRE-vurderinger av AROM, PPT, MS, PRS, MVIC og VJ. Deltakerne vil deretter bli utstyrt med en pulsmåler og fullføre ISP etterfulgt av en 3-minutters syklusbasert nedkjølingsperiode, en venøs blodprøve og oppfølgingsvurderinger av MT, EI, AROM, PPT, MS, PRS, MVIC og VJ umiddelbart etter trening (IP). MVIC og VJ vil bli adskilt med 5 minutter for å tillate tilstrekkelig restitusjon.

Besøk 7-9 (V7-V9): V7-V9 vil være identisk av natur og vil finne sted henholdsvis 24, 48 og 72 timer etter V6. Ved ankomst til laboratoriet for hver eksperimentell studie (V7-V9) vil deltakerne fylle ut et søvnkvalitetsspørreskjema (SQQ), gi en urinprøve for å vurdere hydreringsstatus og gi en venøs blodprøve før trening for å etablere baselinemål for kreatin kinase (CK) og C-reaktivt protein (CRP). Deretter vil deltakerne fullføre ultralydvurderinger av muskeltykkelse (MT) og ekkointensitet (EI) etterfulgt av MKS-vurderingen. Deltakerne vil deretter fullføre en standardisert oppvarming identisk med V2, før de fullfører vurderinger av AROM, PPT, MS, PRS, MVIC og VJ. MVIC og VJ vil bli adskilt med 5 minutter for å tillate tilstrekkelig restitusjon.

Besøk 10 (V10): V10 vil finne sted 32 dager etter V9 og gjennomføres på samme måte som V6.

Besøk 11-13 (V11-V13): V11-V13 vil finne sted henholdsvis 24, 48 og 72 timer etter V10. V11-V13 vil bli utført på samme måte som V7-V9)

Samtykke og screening Før studien starter, vil personer som er interessert i å delta i studien bli bedt om å rapportere til EPIC-laboratoriet for å gjennomgå og signere et informert samtykkedokument. Deltakere som gir samtykke til å delta, vil deretter bli screenet for kvalifisering via PAR-Q+, MHQ og CCQ. Deltakerne vil også bli bedt om å fylle ut et kontaktskjema som registrerer deres foretrukne e-post og mobiltelefonnummer.

Vurdering av hydreringsstatus Ved ankomst til laboratoriet vil deltakerne få en prøvekopp som de skal ta med på toalettet og gi en urinprøve, slik at hydreringen kan vurderes. Etter å ha gitt en urinprøve, vil et medlem av forskerteamet måle urinens egenvekt (USG) ved hjelp av et refraktometer for å sikre at deltakerne er euhydrert (1.002-1.025). Hvis de er dehydrert (>1,025), vil de bli bedt om å konsumere 16 oz vann og testes på nytt etter å ha ventet 15 minutter etter inntak. Hvis de er hyperhydrert (<1.002) vil besøkene deres bli omlagt. Hydreringsstatus vil bli kontrollert umiddelbart ved ankomst til laboratoriet for V2 og hver eksperimentelle forsøk (V6-V13). Urinprøver vil bli kastet i henhold til UCFs retningslinjer.

Venøs blodprøvetaking Blodprøver ved V2, PRE-, IP, 24H, 48H og 72H vil bli tatt med en 21-gauge, 1¼ tommers vacutainer-blodprøvenål eller 23-gauge sommerfuglnål tatt fra en overfladisk underarmsvene. Maksimalt 2 mislykkede forsøk på å sette inn en nål i en av deltakerens armer vil bli gjort og, med deres tillatelse, vil det bli gjort et tredje og siste forsøk i motsatt arm. Tre mislykkede venepunkturforsøk vil resultere i avslutning av blodprøvetakingen. Problemer med blodprøvetakingsutstyr som forhindrer blodtapping er ikke grunnlag for å fjernes fra studien og vil ikke påvirke deltakernes fortsettelse med resten av studien. Alle blodprøver vil bli utført under aseptiske forhold. For å minimere risikoen, vil hudområdet der nålen settes inn rengjøres og klargjøres med en desinfiserende alkoholserviett før nålen settes inn. Etter blodprøvetakingen vil stikkstedet dekkes med en bandasje.

Totalt 8mL (litt mindre enn 2 ts) blod vil samles inn ved hvert tidspunkt (V2 & V6-V13) i ett 4mL BD Vacutainer™ serumseparasjonsrør (SST) og ett 4mL K2EDTA plasmarør (EDTA).

Blodprøver samlet i 4mL SST-røret vil bli brukt til å bestemme serumkonsentrasjoner av C-reaktivt protein (CRP) og kreatinkinase (CK). Serumrør vendes ti ganger og får koagulere ved romtemperatur i 30 minutter før sentrifugering i 10 minutter ved 4000 rpm. Etter sentrifugering vil serum bli alikvotert og frosset ved -80°C innen én time etter innsamling.

Blodprøver samlet i EDTA-rør vil bli forsiktig invertert ti ganger og stå i romtemperatur for analyse samme dag. EDTA fullblodprøver vil bli analysert direkte internt ved hjelp av en automatisert hematologianalysator (Sysmex XN-450 Automated Hematology Analyzer) plassert i Cellular Exercise Physiology Laboratory (CEPL) i BIO 224, Building 20 (Biological Sciences). Prøveanalytter vil inkludere hematokrit, hemoglobin, gjennomsnittlig korpuskulært volum (MCV), gjennomsnittlig korpuskulært hemoglobin (MCH), gjennomsnittlig korpuskulært hemoglobinkonsentrasjon (MCHC), og totalt (hvite blodlegemer og røde blodlegemer) og differensial (lymfocytt, monocytt og granulocytt) , blodplater) celletall.

Standardisert oppvarming Før alle ytelsesvurderinger vil deltakerne bli bedt om å gjennomføre en dynamisk oppvarming. Deltakerne vil begynne med å tråkke på et sykkelergometer i 5 minutter i et selvvalgt tempo med en innstilt motstand på 75 watt. Deltakerne vil deretter fullføre ti knebøy med kroppsvekt, ti kroppsvekte gåutfall, ti dynamiske spark med rette ben og ti dynamiske gå-quadriceps-strekk.

Spørreskjema for søvnkvalitet Deltakerne vil bli bedt om å fylle ut et kort søvnskjema med syv spørsmål som består av spørsmål knyttet til deres søvn og søvnkvalitet i løpet av de siste 24 timene. Deltakerne vil fullføre SQQ umiddelbart etter ankomst for hver eksperimentelle prøveversjon (V6-V13). Diett- og diettlogg Deltakerne vil bli bedt om å opprettholde to separate 5-dagers kostholdslogger ved å bruke "MyFitnessPal"-applikasjonen på sin egen mobil- eller datamaskinenhet. Deltakerne vil bli bedt om å starte hver 5-dagers logg 24 timer før ET1 og ET2 og å opprettholde loggen ved å spore alt mat- og drikkeforbruk etter beste evne i de 5 dagene frem til fullføringen av 72H oppfølgingsbesøkene (besøk henholdsvis 9 og 13). I tillegg vil deltakerne bli bedt om å holde forbruket av mat og drikke i løpet av de to 5-dagers periodene så konsistent som mulig og å matche forbruket av makronæringsstoffer (fett, karbohydrater og proteiner) mellom de to periodene etter beste evne. Deltakere som nekter å frivillig rapportere mat- og drikkeforbruk vil bli trukket fra studien.

Vurderinger Antropometriske vurderinger: I løpet av V2 vil deltakerne fullføre antropometriske vurderinger av høyde, vekt og kroppssammensetning. Høyde og vekt vil bli vurdert ved hjelp av et stadiometer og skala (Health-o-meter Professional Patient Weighing Scale, Model 500 KL, Pelstar, Alsip, IL, USA). Kroppssammensetning vil bli vurdert ved hjelp av bioelektrisk impedansanalyse (BIA; InBody 770, Biospace Co, Ltd. Seoul, Korea) eller bioelektrisk impedansspektroskopianalysator (Sozo; Carlsbad, CA, USA). Deltakerne vil bli bedt om å tømme blæren og fjerne sko, sokker og alle smykker for denne vurderingen. De vil også bli bedt om å være åtte timer fastende og godt hydrert som bestemt ved USG-analyse. Det er ingen risiko eller ubehag forbundet med BIA-analysen.

Flow Mediated Dilatation (FMD) Standardisering av MKS-prosedyrer og protokoll vil bli utført etter etablerte retningslinjer (40). Før testing vil forsøkspersonene hvile i et stille, svakt opplyst laboratorium i en halvt liggende stilling i 15 minutter. Automatisert brachial arterie sfygmomanometri (IntelliSense® Professional Monitor, OMRON Healthcare Inc., Lake Forest, IL) vil bli brukt til å måle systolisk blodtrykk i hvile (SBP), diastolisk blodtrykk (DBP) og hjertefrekvens (HR) på venstre arm. Gjennomsnittlig arterielt trykk (MAP) vil bli beregnet for å bestemme perifer vaskulær motstand ved å bruke følgende ligning: {MAP=[0,33×(SBP-DBP)]+DBP}. Brachialis arteriediameter og blodhastighet vil bli målt ved dupleks, høyoppløselig doppler-ultralyd (GE Logiq P9, GE Healthcare, Chicago, IL) ved bruk av en (5) MHz lineær array-transduser. En arm-turniquet-mansjett med hurtig oppblåsingssystem (Hokanson E20; D.E. Hokanson Inc., Bellevue, WA) vil bli plassert rundt høyre underarm, umiddelbart distalt for antecubital fossa for vurdering av reaktiv hyperemi og brachial arterie FMD. Stabil avbildning av brachialisarterien vil bli oppnådd ved hjelp av skumposisjoneringshjelpemidler og transduserstabiliserende klemme.

Brachial arterie FMD vil bli kontinuerlig målt og registrert ved bruk av en 10-minutters protokoll. Baseline diameter og blodhastighet vil bli registrert i to minutter. Tourniquet-mansjetten vil deretter blåses opp til ca. 240 mmHg for å okkludere brachialisarterien i fem minutter. Etter tømming av mansjetten vil registreringen fortsette i tre minutter for å vurdere endringer i diameter og blodhastighet. Alle ultralydinnstillinger vil bli holdt konsekvente, og målingene vil bli utført av samme tekniker (Mr. Dufner). Skanninger vil bli tatt opp direkte fra ultralydsystemet ved hjelp av kommersiell videoopptaksprogramvare (Snagit, TechSmith Corp., Michigan, USA) og lagret på en online filstasjon. Offline analyser vil bli utført ved hjelp av kantdeteksjon og veggsporingsprogramvare (FMD Studio, Cardiovascular Suite, Quipu, Pisa). Etter databehandling vil alle makro- og mikrovaskulære funksjonsparametere beregnes ved hjelp av en tilpasset visuell grunnleggende makro i Microsoft Excel (3). MKS vil bli vurdert under V2 og ved PRE, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentell studie.

Ultralydmåling (MT og EI) Rectus femoris (RF), vastus medialis (VM) og vastus lateralis (VL) MT og EI-vurderinger vil bli tatt på høyre ben ved bruk av B-modus ultralyd (GE Logiq, General Electric Medical Systems, Milwaukee , WI, USA) og en lineær array-sonde (L4-12t, 4.2-13.0 MHz, 38,4 mm synsfelt, GE Healthcare, Milwaukee, WI, USA). Alle ultralydmålinger vil bli utført ved 12 MHz, forsterkning på 50 dB, dybde på 5 cm og dynamisk rekkevidde på 72. En vannløselig transmisjonsgel vil påføres huden for å forbedre akustisk kobling. Tre bilder av hver muskel vil bli fanget i sagittalplanet. RF-bilder vil bli tatt på halve avstanden mellom den øvre kanten av patella og midten av lyskefolden. VM-bilder vil bli tatt mellom midten av lyskefolden og 3 tommer proksimalt til den mediale epikondylen av lårbenet. VL-bilder vil bli tatt på halvparten av avstanden mellom den større trochanter og den øvre kanten av patella. Ultralydbilder vil bli analysert ved hjelp av ImageJ-programvare (versjon 1.53v., National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA), i henhold til prosedyrene beskrevet av Girts. Et al. (41). MT og EI vil bli vurdert ved PRE, IP, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentelle prøve.

Active Range of Motion (AROM) AROM vil bli vurdert etter den standardiserte oppvarmingen mens deltakerne er i liggende stilling på et polstret testbord med bena fullt støttet. Et håndholdt goniometer vil bli brukt til å vurdere AROM i høyre kne. Goniometeret vil være forankret ved den laterale epikondylen av femur med den stasjonære armen på linje med den større trochanter av femur og bevegelsesarmen på linje med den laterale malleolen i ankelen. Deltakerne vil bli instruert om å bevege kneet fra maksimal full ekstensjon gjennom hele bevegelsesområdet til maksimal full fleksjon ved å holde hvert endepunkt i to sekunder. Gjennomsnittet av to påfølgende målinger vil bli brukt for å bestemme AROM. AROM vil bli vurdert ved PRE, IP, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentelle prøve.

Smertetrykksterskel PPT vil bli vurdert umiddelbart etter AROM-vurderingen mens deltakerne satt på enden av et polstret bord med overbena støttet og underbena hengende fritt. Ved å bruke et håndholdt 15 kg dolorimeter med en 1 cm gummitupp, vil trykk påføres RF, VM og VL på steder som er identiske med ultralydvurderingene som øker med en hastighet på 1 kg/s til deltakerne først rapporterer at de føler smerte, kl. hvilket punkt algometeret vil bli fjernet fra huden. PPT vil bli vurdert én gang ved hvert syn før et andre mål av PPT på hvert sted blir tatt. Algometerverdien ved smertedebut vil bli registrert og gjennomsnittet av to mål med vil bli brukt for å betegne PPT. PPT vil bli vurdert ved PRE, IP, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentelle prøve.

Perceived Recovery Scale (PRS) PRS vil bli vurdert som en total følelse av restitusjon i underekstremitetene (midje ned) og utføres mens deltakeren står i en knevinkel på 140 grader rett før MS-testing. Deltakerne vil bli bedt om å rangere restitusjonsnivået sitt på en 100 mm VAS fra 0 til 100, hvor 0 ikke er i det hele tatt og 100 er veldig godt restituert. PRS vil bli vurdert ved PRE, IP, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentelle prøve.

Muskelømhet (MS) MS vil bli vurdert som en total følelse av sårhet i underekstremitetene (midje ned) og utføres mens deltakeren står i en knevinkel på 140 grader rett før MVIC-testing. Deltakerne vil bli bedt om å rangere MS-nivået i hele underekstremitetene på en 100 mm VAS som strekker seg fra 0 til 100, hvor 0 er ingen smerte i det hele tatt og 100 er den mest smerte som kan tenkes. MS vil bli vurdert ved PRE, IP, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentell studie.

Maksimal frivillig isometrisk sammentrekning (MVIC) og Rate of Force Development (RFD) MVIC-vurderinger vil bli fullført inne i et spesialisert isometrisk knebøy stativ og plattform med en ubevegelig stang. Stanghøyde for hver deltaker vil bli satt til en høyde som gir deltakerens knevinkel på 140 grader. Stanghøyde vil bli etablert under V2 og standardisert for alle etterfølgende MVIC-vurderinger. Hver MVIC-vurdering vil bestå av 3 x 5s maksimale isometriske sammentrekninger. For hver sammentrekning vil deltakerne bli instruert om å kjøre oppover maksimalt mot stangen ved å forlenge knærne og hoftene i 5 sekunder på en måte som er identisk med bevegelsesmønsteret til en typisk knebøy med høy stang. Hver sammentrekning vil bli initiert etter en verbal oppfordring fra forskeren, og konsekvent verbal oppmuntring vil bli gitt for hele 5-ene av hver sammentrekning. Ett minutt hvile vil bli gitt mellom hver sammentrekning for å tillate restitusjon. Sammentrekningen som inneholder den høyeste toppkraften vil bli betegnet som deltakerens MVIC fra hvilken kraftutviklingshastighet (RFD) vil bli registrert ved 0-250ms, diktert av begynnelsen av muskelkontraksjon. MVIC og RFD vil bli vurdert ved PRE, IP, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentell studie.

Vertical Jump Protocol (VJ) Vertikale motbevegelseshopp vil bli vurdert på de samme kraftplatene som brukes for MVIC. Deltakerne vil gjennomgå 3 vertikale hoppforsøk med 1 minutts hvile mellom. Deltakerne vil bli instruert til å hoppe så høyt som mulig med hendene på hoftene. Den høyeste verdien oppnådd i de tre forsøkene vil bli brukt for å angi deltakerens maksimale vertikale hopphøyde. VJ vil bli vurdert ved PRE, IP, 24H, 48H og 72H under hver eksperimentelle prøve.

Isoinertial Squat Protocol (ISP) ISP vil bli utført ved hjelp av Desmotec isoinertial treningsenhet (D11 evo, Desmotec, Biella, Italia). Under ISP vil deltakerens kraft og effekt måles av Desmotec-enheten via to kraftplater under føttene. Deltakerne vil bli bedt om å opprettholde en stående stilling med føttene i en bredde som er identisk med den som vanligvis brukes under en tradisjonell ryggknebøy, å krysse armene foran dem til den motsatte skulderen, og å opprettholde den posisjonen for hver ISP-vurdering. Deltakerne vil deretter bli festet i desmotec-enheten via svinghjulskabelen koblet til en midjestropp i henhold til produsentens instruksjoner. Når kabelen er ordentlig festet, vil kabelspenningen bli satt til 15 kg ved hjelp av en håndholdt vekt (ROMECH, Paisley, Storbritannia) for å sikre konsekvent kabelstramming mellom deltakerne. Den resulterende lengden på hver deltakers kabel vil bli registrert under V2 og standardisert for alle påfølgende vurderinger. ISPen vil bestå av 6 sett med 10 maksimale repetisjoner ved en isoinertiell motstand på 0,067 kg/mm2. Umiddelbart før hvert sett vil deltakerne fullføre to "gratis repetisjoner" med lav innsats for å forberede deltakeren på rytmen til den forestående isoinertielle bevegelsen. Deltakerne vil bli instruert til å yte maksimal innsats under den konsentriske (oppover) fasen av bevegelsen ved å nå full kne- og hofteforlengelse og vugge på fotballene, men å utsette bremsekraften under den eksentriske (nedover) fasen til det siste mulige. øyeblikk. Et tau festet til to høydejusterbare stativer vil bli plassert horisontalt bak deltakeren for å gi en referanse for slutten av den eksentriske (nedover) fasen av bevegelsen i en høyde som fremkaller en knevinkel på ~90 grader når den berøres mykt av deltakerens setemuskler. . Tauhøyde vil bli etablert under V2 og standardisert for hver påfølgende ISP. Deltakerne vil bli bedt om å gjenta den knebøydybden for hver sammentrekning og yte maksimal innsats gjennom hele varigheten av hvert sett mens de blir konsekvent muntlig oppmuntret av forskeren.

Standardisert nedkjøling Etter ISP vil deltakerne bli bedt om å fullføre en dynamisk nedkjøling ved å tråkke på et sykkelergometer i 3 minutter i et selvvalgt tempo med en innstilt motstand på 75 watt.