Stanovení poškození RNA/DNA spojeného s oxidačním stresem u pacientů s parodontitidou

Parodontitida je chronické zánětlivé onemocnění, které vede k progresivní destrukci tkání podpírajících zuby. Oxidační stres hraje klíčovou roli v její patogenezi, protože nadměrná produkce reaktivních forem kyslíku (ROS) může poškodit buněčné struktury včetně lipidů, proteinů a nukleových kyselin. Mezi biomarkery souvisejícími s oxidačním stresem jsou 8-hydroxy-2'-deoxyguanosin (8-OHdG) a 8-hydroxyguanosin (8-OHG) široce uznávanými indikátory poškození DNA a RNA. Tyto biomarkery odrážejí biochemické důsledky oxidačního stresu a stále častěji se používají k vyhodnocení hostitelských reakcí u parodontálního onemocnění.

Kouření cigaret je jedním z nejsilnějších environmentálních rizikových faktorů pro parodontitidu a je známo, že zvyšuje oxidační stres prostřednictvím více mechanismů. Kombinovaný vliv kouření a pokročilé parodontitidy na oxidační poškození DNA a RNA ve slinách však nebyl plně objasněn. Současné hodnocení 8-OHdG i 8-OHG může poskytnout hlubší vhled do molekulárních drah spojujících kouření, zánět a destrukci parodontálních tkání.

Tato studie byla navržena k vyhodnocení hladin oxidačního poškození nukleových kyselin ve slinách u jedinců se stadiem III parodontitidy, kteří kouří nebo nekouří, a také u parodontálně zdravých kontrol. Studie také usilovala o prozkoumání vztahu mezi těmito biomarkery a klinickými parodontálními měřeními. Zkoumáním oxidace DNA a RNA společně se studie snažila poskytnout multidimenzionální porozumění hostitelské oxidační odpovědi u parodontitidy.

Všichni účastníci podstoupili celoústní parodontologické vyšetření provedené kalibrovaným klinikem. Nestimulované vzorky slin byly odebrány za standardizovaných ranních podmínek, zpracovány centrifugací k odstranění buněčných úlomků a skladovány při -80 °C až do biochemické analýzy. Hladiny 8-OHdG a 8-OHG byly kvantifikovány pomocí vysoce citlivé ELISA metody schopné detekovat více oxidovaných guaninových derivátů.

Biochemické nálezy prokázaly, že hladiny oxidačního poškození DNA a RNA byly vyšší u jedinců s parodontitidou ve srovnání se zdravými kontrolami, přičemž kuřáci vykazovali celkově nejvyšší hladiny. Hladiny oxidačních biomarkerů vykazovaly pozitivní korelace s klíčovými parodontálními parametry včetně hloubky sondáže, klinické ztráty přichycení, akumulace plaku, zánětu dásní a krvácení při sondáži. Tyto výsledky naznačují, že zánětlivá zátěž parodontitidy zesiluje oxidační stres na úrovni nukleových kyselin a že kouření přispívá další biologickou zátěží.

Kromě biochemického hodnocení byly vzorky bukální sliznice cytologicky vyhodnoceny pomocí barvení hematoxylinem a eosinem. Všechny vzorky vykazovaly dostatečnou buněčnost a mezi studijními skupinami nebyly pozorovány významné rozdíly v epiteliální dysplazii. To může souviset s převahou povrchových epiteliálních buněk v odebraných vzorcích.

Celkově tato studie poskytuje integrované biochemické a cytomorfologické hodnocení oxidačního stresu u parodontitidy. Zjištění podporují potenciální využití slinných 8-OHdG a 8-OHG jako neinvazivních biomarkerů pro monitorování onemocnění a přinášejí nové důkazy týkající se interakce mezi kouřením, oxidačním stresem a parodontálním zánětem.