Bestämning av RNA/DNA-skador associerade med oxidativ stress hos patienter med parodontit

Periodontit är en kronisk inflammatorisk sjukdom som leder till progressiv förstörelse av de tandstödjande vävnaderna. Oxidativ stress spelar en central roll i dess patogenes, eftersom överproduktion av reaktiva syrearter (ROS) kan skada cellulära strukturer, inklusive lipider, proteiner och nukleinsyror. Bland oxidativ stress-relaterade biomarkörer är 8-hydroxy-2'-deoxyguanosin (8-OHdG) och 8-hydroxyguanosin (8-OHG) allmänt erkända indikatorer på DNA- respektive RNA-skada. Dessa biomarkörer återspeglar de biokemiska konsekvenserna av oxidativ stress och används i allt högre grad för att utvärdera värdresponser vid parodontalsjukdom.

Cigarettrökning är en av de starkaste miljömässiga riskfaktorerna för periodontit och är känd för att förstärka oxidativ stress genom flera mekanismer. Den kombinerade effekten av rökning och avancerad periodontit på oxidativ DNA- och RNA-skada i saliv har dock inte fullständigt klarlagts. Att bedöma både 8-OHdG och 8-OHG samtidigt kan ge djupare insikt i de molekylära vägarna som länkar rökning, inflammation och förstörelse av parodontal vävnad.

Denna studie utformades för att utvärdera salivnivåer av oxidativ nukleinsyreskada hos individer med Stadium III-periodontit som röker eller inte röker, samt hos parodontalt friska kontroller. Studien syftade också till att undersöka förhållandet mellan dessa biomarkörer och kliniska parodontala mätningar. Genom att undersöka DNA- och RNA-oxidation tillsammans strävade studien efter att ge en flerdimensionell förståelse av värdens oxidativa respons vid periodontit.

Alla deltagare genomgick en fullständig munparodontal undersökning utförd av en kalibrerad kliniker. Ostimulerade salivprover samlades in under standardiserade morgonförhållanden, bearbetades genom centrifugering för att avlägsna cellulärt skräp och förvarades vid -80°C tills biokemisk analys. Nivåer av 8-OHdG och 8-OHG kvantifierades med en högkänslig ELISA-metod som kan detektera flera oxiderade guaninderivat.

Biokemiska fynd visade att oxidativa DNA- och RNA-skadenivåer var högre hos individer med periodontit jämfört med friska kontroller, där rökare uppvisade de högsta nivåerna totalt sett. Oxidativa biomarkörnivåer visade positiva korrelationer med nyckelparametrar för parodontit, inklusive sonddjup, klinisk fästningsförlust, plackackumulering, gingival inflammation och blödning vid sondering. Dessa resultat tyder på att den inflammatoriska belastningen av periodontit förstärker oxidativ stress på nukleinsyrenivå och att rökning bidrar med ytterligare en biologisk belastning.

Förutom biokemisk bedömning utvärderades buccalmukosaprover cytologiskt med hematoxylin- och eosin-färgning. Alla prover visade adekvat cellularitet, och inga signifikanta skillnader i epiteldysplasi observerades mellan studiegrupperna. Detta kan vara relaterat till övervikten av ytliga epitelceller i de insamlade proverna.

Sammantaget ger denna studie en integrerad biokemisk och cytomorfologisk bedömning av oxidativ stress vid periodontit. Resultaten stöder den potentiella användningen av saliv-8-OHdG och 8-OHG som icke-invasiva biomarkörer för sjukdomsövervakning och bidrar med nytt bevis om interaktionen mellan rökning, oxidativ stress och parodontal inflammation.