TRACE-BTC. Vztah biomarkerů a kvality života hlášené pacienty k výsledkům u pacientů s karcinomem žlučových cest: reálná kohorta (TRACE-BTC)

Tato prospektivní, neintervenční observační studie zkoumá longitudinální dynamiku cirkulující nádorové DNA (ctDNA), cirkulujících biomarkerů a pacienty hlášených výsledků u pacientů s karcinomem žlučových cest (BTC) podstupujících standardní onkologickou léčbu v běžné klinické praxi. Studie je prováděna v participujících onkologických centrech a integruje translační laboratorní analýzy se strukturovaným sběrem klinických a pacienty hlášených dat.

# Design studie a populace

Účastníci jsou zapojováni postupně z klinické populace pacientů s diagnózou BTC a indikovaných k léčebně zaměřené (včetně adjuvantních nebo downstagingových strategií) nebo paliativní onkologické léčbě. Zahrnutí probíhá v rámci běžných cest péče a účast ve studii neovlivňuje alokaci léčby, klinické rozhodování nebo plány sledování. Veškeré terapeutické intervence jsou poskytovány podle institucionálních standardů a národních směrnic.

# Rámec longitudinálního odběru vzorků

Periferní vzorky krve jsou odebírány v předem definovaných klinicky relevantních milnících napříč trajektorií léčby, včetně výchozího stavu, během systémové terapie, perioperačních období (pokud je to možné), hodnocení odpovědi a sledování. Plány odběru jsou protokolizovány a mohou být resetovány v případě změny léčebné strategie, aby bylo zajištěno časové sladění s klinickým průběhem. Každý odběr umožňuje získat až 40 ml krve, s maximálně 20 studijně souvisejícími vzorky na účastníka po dobu trvání studie.

Vzorky jsou zpracovávány pomocí standardizovaných preanalytických postupů a skladovány při -80 °C v centrální výzkumné biobance. Před odesláním do centrální biobanky za kontrolovaných podmínek je povoleno dočasné lokální skladování v participujících místech (maximálně 5–7 dní). Všechny vzorky jsou pseudonymizovány pomocí unikátních studijních identifikátorů.

# Program translačního výzkumu

Retrospektivní hromadné analýzy jsou prováděny na centrálně uložených vzorcích plazmy, aby byla zajištěna metodologická konzistence a snížena analytická variabilita. Translační laboratorní program zahrnuje:

• Testy ctDNA informované nádorem a neinformované nádorem
• Detekci jednoduchých nukleotidových variant, inzercí/delecí, změn v počtu kopií a genových fúzí
• Analýzy cílených metylačních markerů
• Komparativní analýzy mezi plazmatickými biomarkery a archivovanou nádorovou tkání
• Imunohistochemickou charakterizaci nádorové tkáně, pokud je dostupná
• Explorativní hodnocení dalších cirkulujících biomarkerů souvisejících s nádorovou zátěží, zánětem a imunitním stavem

Celogenomové a celoexomové sekvenování se neprovádí. Všechny laboratorní analýzy následují validované, standardizované postupy a jsou prováděny v akreditovaných akademických laboratorních zařízeních, včetně Aarhus University Hospital a spolupracujících molekulárně diagnostických laboratoří.

# Výsledky hlášené pacienty

Zdravím související kvalita života (HRQoL) je hodnocena longitudinálně pomocí validovaných nástrojů v dánském jazyce v předem definovaných časových bodech sladěných s léčbou a návštěvami sledování. Zátěž dotazníků je minimalizována při zachování metodologické robustnosti. Data PROM jsou integrována s klinickými a biomarkovými datovými soubory, aby umožnila explorativní analýzy asociací mezi biologickými markery a pacienty hlášenými výsledky.

• Sběr a správa dat

Klinická data jsou extrahována z elektronických zdravotních záznamů a zadávána do zabezpečené, centralizované databáze REDCap hostované Aarhus University. Databáze zahrnuje řízení přístupu na základě rolí, auditní stopy, předdefinovaná validační pravidla a strukturované elektronické formuláře záznamů případů. Všechna data jsou pseudonymizována a žádná studijní data nejsou zaznamenána před písemným informovaným souhlasem.

Zdroje dat zahrnují rutinní klinickou dokumentaci, laboratorní záznamy a dotazníky PROM. Předdefinovaný datový slovník zajišťuje standardizované definice proměnných, harmonizovanou terminologii a reprodukovatelnost napříč místy.

# Zajištění kvality a řízení

Studie je centrálně koordinována a prováděna v souladu se standardizovanými operačními postupy pokrývajícími procedury souhlasu, nakládání s biologickými vzorky, laboratorní postupy, zadávání dat a správu odchylek od protokolu. Automatizovaná validační pravidla, kontroly logické konzistence a periodické interní přezkumy dat jsou implementovány, aby bylo zajištěno kvalita a úplnost dat. Ověření zdrojových dat je podporováno auditními stopami a řízeným přístupem k lékařským záznamům pro autorizovaný personál.

# Statistický a analytický přístup

Analýzy se zaměřují na asociaci mezi dynamikou ctDNA, klinickými proměnnými a výsledky. Statistický rámec zahrnuje deskriptivní analýzy, korelační analýzy, modelování přežití pomocí Kaplan-Meierovy metody a multivariabilní Coxovu regresi pro adjustaci relevantních klinických rušivých faktorů. Komparativní analýzy mezi plazmatickými biomarkery a nálezy nádorové tkáně budou provedeny tam, kde jsou dostupné. Integrace biomarkerových dat s longitudinálními daty PROM bude explorativní.

Cíle velikosti vzorku jsou založeny na proveditelnosti a předdefinovaných translačních cílech pro monitorování léčebného záměru, detekci ctDNA výchozího stavu u pokročilého onemocnění a časné dynamice ctDNA během léčby.

# Etické aspekty a bezpečnost

Studie zahrnuje minimální riziko, protože jediným studijně specifickým postupem je dodatečný odběr periferní krve. Potenciální rizika jsou omezena na přechodné nepohodlí nebo drobné modřiny. Účast nezasahuje do standardní klinické péče a pacienti mohou kdykoli odvolat souhlas bez následků pro léčbu.

Veškeré biologické materiály a studijní data jsou zpracovávány v souladu s platnou legislativou na ochranu dat a etickými předpisy. Zbytkový biologický materiál může být skladován pro budoucí eticky schválený výzkum, pokud je poskytnut samostatný souhlas; jinak je přebytečný materiál po dokončení studijně specifických analýz zničen.

# Časový plán studie

Zařazování pacientů je plánováno od roku 2026 do roku 2030, s longitudinálním sledováním a finálními analýzami očekávanými k dokončení v roce 2031. Výsledky budou šířeny prostřednictvím recenzovaných publikací a vědeckých konferencí bez ohledu na výsledky studie.