TRACE-BTC. Relação entre Biomarcadores e Qualidade de Vida Reportada pelos Pacientes com os Resultados em Doentes com Cancro do Trato Biliar: uma Coorte do Mundo Real (TRACE-BTC)

Este estudo prospetivo, observacional e não intervencionista investiga a dinâmica longitudinal do ADN tumoral circulante (ctDNA), dos biomarcadores circulantes e dos resultados reportados pelos doentes em doentes com cancro do trato biliar (BTC) submetidos a tratamento oncológico padrão na prática clínica de rotina. O estudo é realizado em centros de oncologia participantes e integra análises laboratoriais translacionais com a recolha estruturada de dados clínicos e reportados pelos doentes.

# Desenho do Estudo e População

Os participantes são recrutados consecutivamente da população clínica de doentes diagnosticados com BTC e avaliados para tratamento oncológico com intenção curativa (incluindo estratégias adjuvantes ou de downstaging) ou paliativo. A inclusão ocorre no âmbito dos percursos de cuidados de rotina, e a participação no estudo não influencia a atribuição do tratamento, a tomada de decisão clínica ou os esquemas de seguimento. Todas as intervenções terapêuticas são administradas de acordo com os padrões institucionais e as diretrizes nacionais.

# Estrutura de Amostragem Longitudinal

As amostras de sangue periférico são recolhidas em marcos clinicamente relevantes predefinidos ao longo da trajetória do tratamento, incluindo a linha de base, durante a terapêutica sistémica, períodos perioperatórios (se aplicável), avaliação da resposta e seguimento. Os cronogramas de amostragem são protocolados e podem ser reiniciados se a estratégia de tratamento mudar, para garantir o alinhamento temporal com o curso clínico. Cada amostragem permite a recolha de até 40 mL de sangue, com um máximo de 20 amostras relacionadas com o estudo por participante durante o período do estudo.

As amostras são processadas utilizando fluxos de trabalho pré-analíticos padronizados e armazenadas a -80°C num biobanco de investigação central. É permitido o armazenamento local temporário nos locais participantes (máximo de 5-7 dias) antes do envio para o biobanco central em condições controladas. Todas as amostras são pseudonimizadas utilizando identificadores únicos do estudo.

# Programa de Investigação Translacional

As análises em lote retrospetivas são realizadas nas amostras de plasma armazenadas centralmente para garantir a consistência metodológica e reduzir a variabilidade analítica. O programa laboratorial translacional inclui:

• Ensaios de ctDNA informados e não informados pelo tumor
• Detecção de variantes de nucleótido único, indels, alterações no número de cópias e fusões génicas
• Análises de marcadores de metilação dirigidos
• Análises comparativas entre biomarcadores derivados do plasma e tecido tumoral arquivado
• Caracterização imuno-histoquímica do tecido tumoral, quando disponível
• Avaliação exploratória de biomarcadores circulantes adicionais relacionados com a carga tumoral, inflamação e estado imunitário

Não são realizados sequenciação do genoma completo nem do exoma completo. Todas as análises laboratoriais seguem fluxos de trabalho padronizados validados e são realizadas em instalações laboratoriais académicas acreditadas, incluindo o Hospital Universitário de Aarhus e laboratórios de diagnóstico molecular colaboradores.

# Resultados Reportados pelos Doentes

A qualidade de vida relacionada com a saúde (HRQoL) é avaliada longitudinalmente utilizando instrumentos validados em língua dinamarquesa em momentos predefinidos alinhados com as consultas de tratamento e seguimento. A carga dos questionários é minimizada, mantendo a robustez metodológica. Os dados PROM são integrados com conjuntos de dados clínicos e de biomarcadores para permitir análises exploratórias das associações entre marcadores biológicos e resultados reportados pelos doentes.

• Recolha e Gestão de Dados

Os dados clínicos são extraídos dos registos médicos eletrónicos e inseridos numa base de dados REDCap segura e centralizada, alojada pela Universidade de Aarhus. A base de dados incorpora controlo de acesso baseado em funções, trilhos de auditoria, regras de validação predefinidas e formulários eletrónicos de relato de casos estruturados. Todos os dados são pseudonimizados, e nenhum dado do estudo é registado antes do consentimento informado por escrito.

As fontes de dados incluem documentação clínica de rotina, registos laboratoriais e questionários PROM. Um dicionário de dados predefinido garante definições de variáveis padronizadas, terminologia harmonizada e reprodutibilidade entre locais.

# Garantia de Qualidade e Governação

O estudo é coordenado centralmente e realizado de acordo com procedimentos operacionais padronizados que abrangem procedimentos de consentimento, manuseamento de biospécimens, fluxos de trabalho laboratoriais, entrada de dados e gestão de desvios do protocolo. São implementadas regras de validação automáticas, verificações de consistência lógica e revisões internas periódicas de dados para garantir a qualidade e a integridade dos dados. A verificação dos dados de origem é suportada por trilhos de auditoria e acesso controlado aos registos médicos para pessoal autorizado.

# Abordagem Estatística e Analítica

As análises focam-se na associação entre a dinâmica do ctDNA, variáveis clínicas e resultados. A estrutura estatística inclui análises descritivas, análises de correlação, modelação de sobrevivência utilizando métodos de Kaplan-Meier e regressão multivariável de Cox para ajustar para confundidores clínicos relevantes. Serão realizadas análises comparativas entre biomarcadores baseados em plasma e achados de tecido tumoral, quando disponíveis. A integração dos dados de biomarcadores com os dados longitudinais PROM será exploratória.

Os objetivos de tamanho da amostra baseiam-se na viabilidade e nos objetivos translacionais predefinidos para monitorização com intenção curativa, detecção de ctDNA na linha de base em doença avançada e dinâmica precoce do ctDNA durante o tratamento.

# Considerações Éticas e Segurança

O estudo envolve risco mínimo, uma vez que o único procedimento específico do estudo é a colheita adicional de sangue periférico. Os riscos potenciais limitam-se a desconforto transitório ou hematomas menores. A participação não interfere com os cuidados clínicos padrão, e os doentes podem retirar o consentimento a qualquer momento sem consequências para o tratamento.

Todos os materiais biológicos e dados do estudo são manuseados em conformidade com a legislação aplicável de proteção de dados e regulamentos éticos. O material biológico residual pode ser armazenado para investigação futura aprovada eticamente se for fornecido consentimento separado; caso contrário, o material em excesso é destruído após a conclusão das análises específicas do estudo.

# Cronograma do Estudo

A inclusão de doentes está planeada de 2026 a 2030, com seguimento longitudinal e análises finais previstas para serem concluídas em 2031. Os resultados serão divulgados através de publicações revistas por pares e conferências científicas, independentemente dos resultados do estudo.