Reversibel sekundær myelofibrose eller klonal myeloproliferativ lidelse

Pulmonal arteriel hypertension: Pulmonal arteriel hypertension (PAH) er en sygdom, der primært påvirker de små prækapillære lungekar. Det er karakteriseret ved vedvarende forhøjelse af den pulmonale vaskulære modstand (PVR). Uden terapi opstår højre hjertesvigt og død til sidst. PAH forekommer i en idiopatisk form, primær pulmonal hypertension (PPH), og i forbindelse med andre lidelser såsom bindevævssygdomme eller medfødt hjertesygdom (CHD). PAH er fortsat en sygdom af ukendt ætiologi. Indtil for nylig var prognosen for PAH dårlig, med en median overlevelse på mindre end 3 år.

Prostacyclin (PGI2) er hovedproduktet af arachidonsyre i alle vaskulære endoteler. Det er en potent vasodilator i alle vaskulære senge. Derudover er det en potent endogen hæmmer af blodpladeaggregation og glat muskelvækst. Prostacyclinreceptoren (IP) er placeret på en række forskellige celletyper, hvilket gør det muligt for prostacyclin at udøve en række biologiske virkninger ved hjælp af at hæve intracellulære niveauer af cAMP gennem aktivering af adenylatcyclase. Det stabile, frysetørrede saltpræparat af prostacyclin er kendt som epoprostenol og er tilgængeligt til IV-administration under varemærket Flolan (Glaxo Wellcome, Research Triangle Park, N.C.). Det første randomiserede kliniske forsøg i PPH viste, at epoprostenol forbedrede livskvalitet, hæmodynamik, træningstolerance og overlevelse over en 12-ugers periode. Epoprostenol er blevet standardbehandlingen for patienter med fremskreden PPH. For nylig har kronisk intravenøs epoprostenol vist sig at være en effektiv terapi til at forbedre langsigtet livskvalitet og overlevelse hos patienter med PPH. Epoprostenol forbedrer også hæmodynamik, træningskapacitet og livskvalitet (men ikke overlevelse) i PAH forbundet med CHD og bindevævssygdom.

Bivirkninger af epoprostenol-infusion omfatter udslæt, hovedpine, kæbesmerter, bensmerter, diarré, kvalme, kateterinfektioner, brystsmerter, angst svimmelhed, bradykardi, dyspnø, mavesmerter, muskuloskeletale smerter, takykardi, influenza-lignende symptomer og angst/nervøs. . Trombocytopeni ses almindeligvis hos patienter med PPH behandlet med PG12. Lejlighedsvis forekommer et fald i andre blodcellelinjer, hvilket fører til anæmi eller pancytopeni. Splenomegali og hypersplenisme observeres til tider. Mens trombocytopeni er blevet tilskrevet de trombocythæmmende virkninger af prostacyclin, er patofysiologien af ​​pancytopeni dårligt forstået. Der er ingen undersøgelser, der adresserer trombocytopeni og andre hæmopoietiske abnormiteter hos personer med pulmonal hypertension, der får epoprostenol. Muligheden for myelofibrose, der forårsager disse hæmatologiske abnormiteter, er ikke blevet undersøgt.

Primær myelofibrose er en myeloproliferativ lidelse, typisk karakteriseret ved pancytopeni, splenomegali, en leukoerytroblastisk blodudstrygning, fibrose på knoglemarvsundersøgelse og myeloid metaplasi. Som alle myeloproliferative lidelser skyldes det somatisk mutation og klonal proliferation af hæmatopoietiske stamceller. Fibrose forekommer sekundært til cytokiner udskilt af maligne celler. Disse patienter er symptomatiske på grund af cytopenier. Knoglemarvssvigt og transformation til akut myeloid leukæmi er hovedårsagen til dødelighed hos disse patienter. Forhøjede blodniveauer af hæmatopoietiske progenitorer (identificeret ved positivitet for CD34-antigenet) er veldokumenterede og korrelerer med prognose. Derfor er to væsentlige identificerende træk ved primær myelofibrose i modsætning til sekundær fibrose i marven: 1) klonal hæmatopoiese og 2) høj CD 34 positive hæmatopoietiske prækursorer.

Vi antager derfor, at disse to vil være normale hos patienter med sekundær myelofibrose og hjælper os med at skelne de to enheder.

Klonalitetsundersøgelser: Klonalitet er baseret på princippet om X-kromosominaktivering, og til klonalitetsundersøgelser kan kun kvinder bruges som forsøgspersoner. Det er baseret på princippet om, at mens kvindelige celler har to X-kromosomer, er det ene tilfældigt inaktiveret under tidlig embryonal udvikling, og derfor er kvindeligt væv en blanding af celler, der udtrykker enten paternale eller maternelle nedarvede x-kromosomgener. I det første trin vil DNA-analysen studere 5 exoniske polymorfier for X-kromosomgener, som tidligere har vist sig at være nyttige til disse formål. Hvis nogen af ​​de fem loci er heterozygot, siges individet at være informativt for klonalitet. Undersøgelser, som vil forløbe som følger: De friske blodplader og granulocytter vil blive isoleret og RNA'et isoleret og brugt senere til revers transkription til cDNA, som derefter vil blive analyseret for X-kromosom allel-anvendelsesforhold ved enkeltstrengede konformationelle polymorfismer (SSCP). Hvis kun én allel udtrykkes i blodplader eller granulocytter, siges patienten at være klonal og foretrækker en diagnose af myeloproliferativ lidelse (såsom AMM), mens polyklonalt blod (både X-kromosom alleler udtrykt i blodplader og granulocytter) er foreneligt med sekundær myelofibrose .

En tre-farvet direkte immunfluorescerende farvningsmetode vil blive brugt i evalueringen af ​​CD34+ celler. I vores foreløbige erfaring observerede vi fire Flolan-behandlede patienter med PPH, som havde splenomegali, anæmi og/eller trombocytopeni. Alle disse patienter havde svær marvfibrose. Formålet med denne undersøgelse er at bestemme, om forekomsten af ​​knoglemarvsfibrose i denne patientpopulation er primær eller sekundær, og om en sekundær effekt er en fibrose, der forventes at være forbigående og forsvinde efter seponering af Flolan.

Deltagende forsøgspersoner vil Patienterne vil gennemgå følgende undersøgelser:

1. Historie og fysisk undersøgelse
2. Udstrygning af perifert blod
3. Knoglemarvsundersøgelse for at bestemme tilstedeværelsen og sværhedsgraden af ​​fibrose. Knoglemarvsprøven taget til diagnostiske formål vil blive undersøgt af tre uafhængige hæmatologer/hæmatopatologer på en maskeret måde for tilstedeværelsen af ​​fibrose ved hjælp af rutinemetoder.

4. Blod: Der indsamles 30 cc blod for

   1. Klonalitetsundersøgelser (kun kvindelige forsøgspersoner),
   2. CD34 kvantificering.
   3. Yderligere undersøgelser vil blive udført for at overvåge den afvigende handel med hæmopoietiske stamceller, adhæsionsmolekylerne og eventuelle sygdomsrelaterede gener, såsom JAK2V617F og cMPL, hvis indiceret.
   4. Ovenstående undersøgelser vil blive gentaget hos patienter, der gennemgår lungetransplantationer 3 måneder, 6 måneder og 1 år efter transplantationen.