Stråling, kemoterapi, vaccine og anti-MART-1 og anti-gp100 celler til patienter med metastatisk melanom

Baggrund:

• Vi har konstrueret humane perifere blodlymfocytter (PBL'er) til at udtrykke en T-cellereceptor (TCR), der genkender humane leukocytantigener (HLAA*0201) begrænsede epitoper afledt af gp100 eller MART-1 melanomantigenet.
• Vi konstruerede enkelte retrovirale vektorer, der indeholder både alfa- og beta-T-cellereceptorkæder (TCR) og kan mediere genetisk overførsel af denne TCR med høj effektivitet (større end 30 procent) uden behov for at udføre nogen selektion.
• I co-kulturer med HLA-A*0201 positive melanomer udskilte disse TCR-transducerede T-celler en betydelig mængde interferon-gamma (IFN-y), men ingen signifikant sekretion blev observeret i kontrol co-kulturer.
• gp100:154-162 TCR eller MART-1:27-35 TCR transducerede T-celler kunne effektivt dræbe HLAA*0201 positive tumorer. Der var ringe eller ingen genkendelse af normale fibroblaster.
• Adoptiv overførsel af en af ​​disse TCR-overførte genmodificerede perifere blodlymfocytter (PBL) efter et ikke-myeloablativt lymfodepleteringsregimen kunne mediere tumorregression hos 13-30 procent af patienterne med metastatisk melanom, selvom der ikke blev set fuldstændige responser.

Mål:

Primære mål:

• I kohorte 1 og 2 for at bestemme, om administrationen af ​​både anti-gp100:154-162 TCR-konstruerede og anti-MART-1:27-35 TCR-konstruerede perifere blodlymfocytter (PBL), aldesleukin og enten gp100: 154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet til patienter, der følger et præparativt kemoradiationslymfodepleterende regime, vil resultere i fuldstændig tumorregression hos patienter med metastatisk melanom.
• I kohorte 3 og 4, for at bestemme, om administrationen af ​​både anti-gp100:154-162 TCR-konstruerede og anti-MART-1:27-35 TCR-konstruerede CD8+ perifere blodlymfocytter (PBL), aldesleukin og enten gp100 :154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet til patienter, der følger et præparativt chemoradiation-lymfodepleterende regime, vil resultere i fuldstændig tumorregression hos patienter med metastatisk melanom.
• Bestem, om administrationen af ​​den specifikke vaccine (gp100:154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet) kan øge persistensen af ​​de specifikke overførte celler (anti-gp100:154-162 TCR PBL, anti-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, henholdsvis anti-MART-1:27-35 TCR PBL eller anti-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL.

Sekundære mål:

- Bestem toksicitetsprofilen for disse behandlingsregimer.

Berettigelse:

Patienter, der er HLA-A*0201 positive og 18 år eller ældre, skal have:

• metastatisk melanom med målbar sygdom
• tidligere blevet behandlet med IL-2 for melanom;
• normale værdier for grundlæggende laboratorieværdier.

Patienter har muligvis ikke:

• samtidige større medicinske sygdomme;
• enhver form for primær eller sekundær immundefekt;
• svær overfølsomhed over for et hvilket som helst af de midler, der anvendes i denne undersøgelse;
• kontraindikationer for høj dosis aldesleukin administration.

Design:

• I kohorte 1 og 2:

  • Mononukleære celler fra perifert blod (PBMC) vil blive opnået ved leukaferese (ca. 5 gange 10(9) celler) og dyrket i nærvær af anti-CD3 (OKT3) og aldesleukin, og separate alikvoter vil blive transduceret med anti-gp100:154- 162 TCR og anti-MART-1:27-35 TCR retroviral vektor.
  • Transduktion initieres ved eksponering af ca. 10(8) til 5 gange 10(8) celler for supernatant indeholdende de retrovirale vektorer. Disse gp100- og MART-1 TCR-transducerede celler vil blive ekspanderet separat og testet for deres antitumoraktivitet.
  • Når konstruerede lymfocytter er påvist at være biologisk aktive i henhold til de strenge kriterier, der er skitseret i analysecertifikatet, vil patienter modtage et præparativt kemoradiationslymfocytdepleterende regime bestående af cyclophosphamid og fludarabin og 600 cGy total kropsbestråling efterfulgt af intravenøs tumorreaktiv infusion af ex vivo. , gp100 og MART-1 TCR-gentransducerede celler plus IV aldesleukin (720.000 IE/kg q8h for maksimalt 15 doser).
  • Patienter vil blive randomiseret til at modtage enten gp100:154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet emulgeret i Freunds ufuldstændige adjuvans.
  • Patienterne vil gennemgå en fuldstændig evaluering af tumor med fysisk undersøgelse, computertomografi (CT) af brystet, maven og bækkenet og klinisk laboratorieevaluering fire til seks uger efter behandlingen og derefter månedligt i ca. 3 til 4 måneder eller indtil kriterierne uden for undersøgelsen er opfyldt.
  • Studiet vil blive udført ved hjælp af et fase II optimalt design, hvor indledningsvis 21 evaluerbare patienter vil blive indskrevet i hver af to kohorter. Hvis ingen af ​​de 21 patienter pr. kohorte oplever et fuldstændigt klinisk respons, vil der ikke blive indskrevet flere patienter, men hvis 1 eller flere af de første 21 evaluerbare patienter, der er indskrevet i den kohorte, har et fuldstændigt klinisk respons, fortsætter tildelingen af ​​denne kohorte indtil i alt 41 evaluerbare patienter er blevet indskrevet i denne kohorte.
  • Kohorte 1 og 2 vil blive lukket med godkendelse af ændring D.

• Kohorte 3 og 4 vil blive indledt med godkendelse af ændring D.

  • Mononukleære celler fra perifert blod (PBMC) opnås ved leukaferese (ca. 5 gange 10(9) celler), og CD8+-celler vil blive udvalgt fra kulturerne ved hjælp af Miltenyi CliniMACS-apparatet, før de stimuleres og transduceres. Separate alikvoter af CD8+-celler vil blive transduceret med anti-gp100:154-162 TCR og anti-MART-1:27-35 TCR retrovirale vektorer.
  • Transduktion initieres ved eksponering af ca. 10(8) til 5 gange 10(8) CD8+-celler for supernatant indeholdende de retrovirale vektorer. Disse gp100- og MART-1 TCR-transducerede celler vil blive ekspanderet separat og testet for deres antitumoraktivitet.
  • Når konstruerede lymfocytter er påvist at være biologisk aktive i henhold til de strenge kriterier, der er skitseret i analysecertifikatet, vil patienter modtage et præparativt kemoradiationslymfocytdepleterende regime bestående af cyclophosphamid og fludarabin og 600 cGy total kropsbestråling efterfulgt af intravenøs tumorreaktiv infusion af ex vivo. , gp100 og MART-1 TCR gentransducerede CD8+ celler plus IV aldesleukin (720.000 IE/kg q8h for maksimalt 15 doser).
  • Patienter vil blive randomiseret til at modtage enten gp100:154-162-peptidet (kohorte 3) eller MART-1:26-35(27L)-peptidet (kohorte 4) emulgeret i Freunds ufuldstændige adjuvans.
  • Patienterne vil gennemgå en fuldstændig evaluering af tumor med fysisk undersøgelse, CT af bryst, mave og bækken og klinisk laboratorieevaluering fire til seks uger efter behandling og derefter månedligt i ca. 3 til 4 måneder, eller indtil kriterierne uden for undersøgelsen er opfyldt.
  • Studiet vil blive udført ved hjælp af et fase II optimalt design, hvor indledningsvis 21 evaluerbare patienter vil blive indskrevet i hver af kohorte 3 og 4. Hvis ingen af ​​de 21 patienter pr. kohorte oplever et fuldstændigt klinisk respons, vil der ikke blive indskrevet yderligere patienter, men hvis 1 eller flere af de første 21 evaluerbare patienter, der er indskrevet i den kohorte, har et fuldstændigt klinisk respons, hvorefter tilfaldet til denne kohorte vil fortsætte, indtil i alt 41 evaluerbare patienter er blevet indskrevet i den kohorte.