Radiothérapie, chimiothérapie, vaccin et cellules anti-MART-1 et anti-gp100 pour les patients atteints de mélanome métastatique

Fond:

• Nous avons conçu des lymphocytes du sang périphérique humain (PBL) pour qu'ils expriment un récepteur des lymphocytes T (TCR) qui reconnaît les épitopes restreints aux antigènes leucocytaires humains (HLAA*0201) dérivés de la gp100 ou de l'antigène de mélanome MART-1.
• Nous avons construit des vecteurs rétroviraux uniques contenant à la fois des chaînes de récepteurs de cellules T alpha et bêta (TCR) et pouvant assurer le transfert génétique de ce TCR avec une efficacité élevée (supérieure à 30%) sans qu'il soit nécessaire d'effectuer une sélection.
• Dans les co-cultures avec des mélanomes HLA-A*0201 positifs, ces lymphocytes T transduits par le TCR ont sécrété une quantité significative d'interféron gamma (IFN-y), mais aucune sécrétion significative n'a été observée dans les co-cultures témoins.
• gp100: 154-162 TCR ou MART-1: 27-35 TCR transduits pourraient tuer efficacement les tumeurs HLAA * 0201 positives. Il y avait peu ou pas de reconnaissance des fibroblastes normaux.
• Le transfert adoptif de l'un ou l'autre de ces lymphocytes du sang périphérique (PBL) modifiés par le gène transféré par TCR à la suite d'un régime lymphodéplétif non myéloablatif pourrait entraîner une régression tumorale chez 13 à 30 % des patients atteints de mélanome métastatique, bien qu'aucune réponse complète n'ait été observée.

Objectifs:

Objectifs principaux:

• Dans les cohortes 1 et 2, pour déterminer si l'administration des lymphocytes du sang périphérique (PBL) anti-gp100:154-162 modifiés par TCR et anti-MART-1:27-35 modifiés par TCR, de l'aldesleukine et de la gp100 : 154-162 ou le peptide MART-1:26-35(27L) à des patients suivant un régime préparatif de chimioradiothérapie lymphodéplétive entraînera une régression complète de la tumeur chez les patients atteints de mélanome métastatique.
• Dans les cohortes 3 et 4, pour déterminer si l'administration à la fois des lymphocytes du sang périphérique CD8+ (PBL) anti-gp100:154-162 TCR et anti-MART-1:27-35 TCR-modifiés, de l'aldesleukine et soit de la gp100 :154-162 ou le peptide MART-1:26-35(27L) à des patients suivant un régime préparatif de chimioradiothérapie lymphodéplétive entraînera une régression complète de la tumeur chez les patients atteints de mélanome métastatique.
• Déterminer si l'administration du vaccin spécifique (le peptide gp100:154-162 ou le peptide MART-1:26-35(27L)) peut augmenter la persistance des cellules spécifiques transférées (anti-gp100:154-162 TCR PBL, anti-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, anti-MART-1:27-35 TCR PBL ou anti-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL), respectivement.

Objectifs secondaires :

- Déterminer le profil de toxicité de ces schémas thérapeutiques.

Admissibilité:

Les patients HLA-A*0201 positifs et âgés de 18 ans ou plus doivent avoir :

• mélanome métastatique avec maladie mesurable
• déjà été traité par IL-2 pour un mélanome ;
• valeurs normales pour les valeurs de laboratoire de base.

Les patients peuvent ne pas avoir :

• maladies médicales majeures concomitantes ;
• toute forme d'immunodéficience primaire ou secondaire ;
• hypersensibilité sévère à l'un des agents utilisés dans cette étude ;
• contre-indications à l'administration de fortes doses d'aldesleukine.

Concevoir:

• Dans les cohortes 1 et 2 :

  • Des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) seront obtenues par leucaphérèse (environ 5 fois 10(9) cellules) et cultivées en présence d'anti-CD3 (OKT3) et d'aldesleukine et des aliquotes séparées seront transduites avec l'anti-gp100:154- 162TCR et le vecteur rétroviral anti-MART-1:27-35TCR.
  • La transduction est initiée par l'exposition d'environ 10(8) à 5 fois 10(8) cellules au surnageant contenant les vecteurs rétroviraux. Ces cellules transduites par gp100 et MART-1 TCR seront développées séparément et testées pour leur activité anti-tumorale.
  • Une fois qu'il aura été démontré que les lymphocytes modifiés sont biologiquement actifs selon les critères stricts décrits dans le certificat d'analyse, les patients recevront un régime préparatif d'épuisement des lymphocytes par chimioradiothérapie composé de cyclophosphamide et de fludarabine et d'une irradiation corporelle totale de 600 cGy, suivie d'une perfusion intraveineuse d'un réactif tumoral ex vivo. , gp100 et cellules transduites par le gène MART-1 TCR plus aldesleukine IV (720 000 UI/kg q8h pour un maximum de 15 doses).
  • Les patients seront randomisés pour recevoir soit le peptide gp100:154-162, soit le peptide MART-1:26-35(27L) émulsifié dans de l'adjuvant incomplet de Freund.
  • Les patients subiront une évaluation complète de la tumeur avec un examen physique, une tomodensitométrie (TDM) du thorax, de l'abdomen et du bassin et une évaluation en laboratoire clinique quatre à six semaines après le traitement, puis une fois par mois pendant environ 3 à 4 mois ou jusqu'à ce que les critères de l'étude soient remplis.
  • L'étude sera menée en utilisant une conception optimale de phase II où initialement 21 patients évaluables seront inscrits dans chacune des deux cohortes. Si aucun des 21 patients par cohorte ne présente de réponse clinique complète, aucun autre patient ne sera recruté, mais si 1 ou plusieurs des 21 premiers patients évaluables recrutés dans cette cohorte présentent une réponse clinique complète, l'acquisition de cette cohorte se poursuivra jusqu'à un total de 41 patients évaluables ont été inscrits dans cette cohorte.
  • Les cohortes 1 et 2 seront fermées avec l'approbation de l'amendement D.

• Les cohortes 3 et 4 seront lancées avec l'approbation de l'amendement D.

  • Les cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) seront obtenues par leucaphérèse (environ 5 fois 10(9) cellules) et les cellules CD8+ seront sélectionnées dans les cultures, à l'aide de l'appareil Miltenyi CliniMACS, avant d'être stimulées et transduites. Des aliquotes séparées de cellules CD8+ seront transduites avec les vecteurs rétroviraux anti-gp100:154-162 TCR et anti-MART-1:27-35 TCR.
  • La transduction est initiée par l'exposition d'environ 10(8) à 5 fois 10(8) cellules CD8+ au surnageant contenant les vecteurs rétroviraux. Ces cellules transduites par gp100 et MART-1 TCR seront développées séparément et testées pour leur activité anti-tumorale.
  • Une fois qu'il aura été démontré que les lymphocytes modifiés sont biologiquement actifs selon les critères stricts décrits dans le certificat d'analyse, les patients recevront un régime préparatif d'épuisement des lymphocytes par chimioradiothérapie composé de cyclophosphamide et de fludarabine et d'une irradiation corporelle totale de 600 cGy, suivie d'une perfusion intraveineuse d'un réactif tumoral ex vivo. , gp100 et cellules CD8+ transduites par le gène MART-1 TCR plus aldesleukine IV (720 000 UI/kg q8h pour un maximum de 15 doses).
  • Les patients seront randomisés pour recevoir soit le peptide gp100:154-162 (cohorte 3) soit le peptide MART-1:26-35(27L) (cohorte 4) émulsifié dans de l'adjuvant incomplet de Freund.
  • Les patients subiront une évaluation complète de la tumeur avec un examen physique, une TDM de la poitrine, de l'abdomen et du bassin et une évaluation en laboratoire clinique quatre à six semaines après le traitement, puis une fois par mois pendant environ 3 à 4 mois ou jusqu'à ce que les critères de l'étude soient remplis.
  • L'étude sera menée en utilisant une conception optimale de phase II où initialement 21 patients évaluables seront inscrits dans chacune des cohortes 3 et 4. Si aucun des 21 patients par cohorte ne présente une réponse clinique complète, alors aucun autre patient ne sera inscrit mais si 1 ou plusieurs des 21 premiers patients évaluables inscrits dans cette cohorte ont une réponse clinique complète, puis l'accumulation dans cette cohorte se poursuivra jusqu'à ce qu'un total de 41 patients évaluables aient été inscrits dans cette cohorte.