Radioterapia, chemioterapia, szczepionka i komórki anty-MART-1 i anty-gp100 dla pacjentów z czerniakiem z przerzutami

Tło:

• Zaprojektowaliśmy ludzkie limfocyty krwi obwodowej (PBL) do ekspresji receptora komórek T (TCR), który rozpoznaje epitopy ograniczone do ludzkich antygenów leukocytów (HLAA*0201) pochodzące z antygenu czerniaka gp100 lub MART-1.
• Skonstruowaliśmy pojedyncze wektory retrowirusowe, które zawierają łańcuchy receptorów komórek T alfa i beta (TCR) i mogą pośredniczyć w transferze genetycznym tego TCR z wysoką wydajnością (ponad 30 procent) bez konieczności przeprowadzania jakiejkolwiek selekcji.
• We wspólnych hodowlach z czerniakami dodatnimi pod względem HLA-A*0201 te transdukowane TCR limfocyty T wydzielały znaczną ilość interferonu-gamma (IFN-γ), ale nie obserwowano znaczącego wydzielania we wspólnych hodowlach kontrolnych.
• gp100:154-162 TCR lub MART-1:27-35 transdukowane limfocyty TCR mogą skutecznie zabijać nowotwory dodatnie pod względem HLAA*0201. Rozpoznanie normalnych fibroblastów było niewielkie lub żadne.
• Adaptacyjny transfer jednego z tych zmodyfikowanych genowo limfocytów krwi obwodowej (PBL) przeniesionych przez TCR ​​po niemieloablacyjnym schemacie limfodeplecji może pośredniczyć w regresji guza u 13-30 procent pacjentów z czerniakiem z przerzutami, chociaż nie zaobserwowano pełnej odpowiedzi.

Cele:

Główne cele:

• W kohorcie 1 i 2, w celu ustalenia, czy podawanie limfocytów krwi obwodowej (PBL), aldesleukiny i gp100: peptyd 154-162 lub peptyd MART-1:26-35(27L) pacjentom po preparatywnym schemacie chemioradioterapii limfodeplecyjnej spowoduje całkowitą regresję nowotworu u pacjentów z przerzutowym czerniakiem.
• W kohorcie 3 i 4, w celu ustalenia, czy podawanie zarówno limfocytów CD8+ z krwi obwodowej (PBL) skierowanych przeciwko gp100:154-162, jak i anty-MART-1:27-35 uzyskanych metodą inżynierii TCR, aldesleukiny i gp100 :154-162 lub peptydu MART-1:26-35(27L) pacjentom po preparatywnym schemacie chemioradioterapii limfodeplecyjnej spowoduje całkowitą regresję nowotworu u pacjentów z przerzutowym czerniakiem.
• Ustalić, czy podanie określonej szczepionki (peptydu gp100:154-162 lub peptydu MART-1:26-35(27L)) może zwiększyć trwałość przeniesionych komórek (anty-gp100:154-162 TCR PBL, odpowiednio anty-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, anty-MART-1:27-35 TCR PBL lub anty-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL).

Cele drugorzędne:

- Określenie profilu toksyczności tych schematów leczenia.

Kwalifikowalność:

Pacjenci, którzy są HLA-A*0201 dodatni i mają co najmniej 18 lat, muszą mieć:

• przerzutowy czerniak z mierzalną chorobą
• był wcześniej leczony IL-2 z powodu czerniaka;
• wartości normalne dla podstawowych wartości laboratoryjnych.

Pacjenci mogą nie mieć:

• współistniejące poważne choroby medyczne;
• jakakolwiek forma pierwotnego lub wtórnego niedoboru odporności;
• ciężka nadwrażliwość na którykolwiek ze środków stosowanych w tym badaniu;
• przeciwwskazania do podawania dużych dawek aldesleukiny.

Projekt:

• W kohorcie 1 i 2:

  • Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) zostaną uzyskane przez leukaferezę (około 5 razy 10(9) komórek) i hodowane w obecności anty-CD3 (OKT3) i aldesleukiny, a oddzielne porcje zostaną transdukowane anty-gp100:154- 162 TCR i wektor retrowirusowy anty-MART-1:27-35 TCR.
  • Transdukcję inicjuje się przez wystawienie około 10(8) do 5 razy 10(8) komórek na supernatant zawierający wektory retrowirusowe. Te komórki stransdukowane gp100 i MART-1 TCR będą oddzielnie ekspandowane i badane pod kątem ich aktywności przeciwnowotworowej.
  • Po wykazaniu biologicznej aktywności zmodyfikowanych limfocytów zgodnie ze ścisłymi kryteriami określonymi w certyfikacie analizy, pacjenci otrzymają chemioradioterapię zubożającą limfocyty w schemat preparatywny składający się z cyklofosfamidu i fludarabiny oraz napromieniowanie całego ciała 600 cGy, a następnie dożylną infuzję ex vivo reaktywnego nowotworu , komórki transdukowane genem gp100 i MART-1 TCR plus aldesleukina IV (720 000 IU/kg co 8 godzin przez maksymalnie 15 dawek).
  • Pacjenci zostaną losowo przydzieleni do otrzymywania albo peptydu gp100:154-162 albo peptydu MART-1:26-35(27L) zemulgowanego w niekompletnym adiuwancie Freunda.
  • Pacjenci zostaną poddani pełnej ocenie guza z badaniem fizykalnym, tomografią komputerową (CT) klatki piersiowej, jamy brzusznej i miednicy oraz kliniczną oceną laboratoryjną cztery do sześciu tygodni po leczeniu, a następnie co miesiąc przez około 3 do 4 miesięcy lub do czasu spełnienia kryteriów wyłączenia z badania.
  • Badanie zostanie przeprowadzone przy użyciu optymalnego projektu fazy II, w którym początkowo 21 pacjentów kwalifikujących się do oceny zostanie włączonych do każdej z dwóch kohort. Jeśli u żadnego z 21 pacjentów na kohortę nie wystąpi pełna odpowiedź kliniczna, żadni kolejni pacjenci nie zostaną włączeni, ale jeśli u 1 lub więcej z pierwszych 21 pacjentów kwalifikujących się do oceny w tej kohorcie wystąpi pełna odpowiedź kliniczna, wówczas gromadzenie danych w tej kohorcie będzie kontynuowane do do tej kohorty włączono łącznie 41 pacjentów, których można było poddać ocenie.
  • Kohorty 1 i 2 zostaną zamknięte po zatwierdzeniu poprawki D.

• Kohorty 3 i 4 zostaną zainicjowane po zatwierdzeniu poprawki D.

  • Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) zostaną uzyskane przez leukaferezę (około 5 razy 10(9) komórek), a komórki CD8+ zostaną wybrane z hodowli, przy użyciu aparatu Miltenyi CliniMACS, przed stymulacją i transdukcją. Oddzielne porcje komórek CD8+ będą transdukowane wektorami retrowirusowymi anty-gp100:154-162 TCR i anty-MART-1:27-35 TCR.
  • Transdukcję inicjuje się przez wystawienie około 10(8) do 5 razy 10(8) komórek CD8+ na supernatant zawierający wektory retrowirusowe. Te komórki stransdukowane gp100 i MART-1 TCR będą oddzielnie ekspandowane i badane pod kątem ich aktywności przeciwnowotworowej.
  • Po wykazaniu biologicznej aktywności zmodyfikowanych limfocytów zgodnie ze ścisłymi kryteriami określonymi w certyfikacie analizy, pacjenci otrzymają chemioradioterapię zubożającą limfocyty w schemat preparatywny składający się z cyklofosfamidu i fludarabiny oraz napromieniowanie całego ciała 600 cGy, a następnie dożylną infuzję ex vivo reaktywnego nowotworu , komórki CD8+ transdukowane genem gp100 i MART-1 TCR plus aldesleukina IV (720 000 IU/kg co 8 godzin przez maksymalnie 15 dawek).
  • Pacjenci zostaną losowo przydzieleni do otrzymywania albo peptydu gp100:154-162 (kohorta 3) albo peptydu MART-1:26-35(27L) (kohorta 4) zemulgowanego w niekompletnym adiuwancie Freunda.
  • Pacjenci zostaną poddani pełnej ocenie guza z badaniem fizycznym, tomografią komputerową klatki piersiowej, jamy brzusznej i miednicy oraz kliniczną oceną laboratoryjną cztery do sześciu tygodni po leczeniu, a następnie co miesiąc przez około 3 do 4 miesięcy lub do czasu spełnienia kryteriów wyłączenia z badania.
  • Badanie zostanie przeprowadzone przy użyciu optymalnego projektu fazy II, w ramach którego początkowo 21 pacjentów kwalifikujących się do oceny zostanie włączonych do każdej z kohort 3 i 4. Jeśli u żadnego z 21 pacjentów w kohorcie nie wystąpi pełna odpowiedź kliniczna, to dalsi pacjenci nie zostaną włączeni, ale jeśli 1 lub więcej z pierwszych 21 pacjentów kwalifikujących się do oceny włączonych do tej kohorty ma pełną odpowiedź kliniczną, a następnie gromadzenie danych dla tej kohorty będzie kontynuowane do momentu zapisania do tej kohorty łącznie 41 pacjentów kwalifikujących się do oceny.