Облучение, химиотерапия, вакцина и клетки анти-MART-1 и анти-gp100 для пациентов с метастатической меланомой

Задний план:

• Мы сконструировали лимфоциты периферической крови человека (PBL) для экспрессии Т-клеточного рецептора (TCR), который распознает рестриктированные эпитопы человеческих лейкоцитарных антигенов (HLAA*0201), полученные из gp100 или антигена меланомы MART-1.
• Мы сконструировали одиночные ретровирусные векторы, которые содержат цепи альфа- и бета-Т-клеточного рецептора (TCR) и могут опосредовать генетический перенос этого TCR с высокой эффективностью (более 30 процентов) без необходимости проведения какой-либо селекции.
• В кокультурах с HLA-A*0201-положительными меланомами эти TCR-трансдуцирующие Т-клетки секретировали значительное количество интерферона-гамма (IFN-γ), но в контрольных кокультурах значительной секреции не наблюдалось.
• T-клетки, трансдуцированные gp100:154-162 TCR или MART-1:27-35 TCR, могут эффективно уничтожать HLAA*0201-положительные опухоли. Распознавание нормальных фибробластов было незначительным или отсутствовало вообще.
• Адаптивный перенос любого из этих TCR-перенесенных геномодифицированных лимфоцитов периферической крови (PBL) после немиелоаблативного лимфодеплетирующего режима может опосредовать регрессию опухоли у 13-30% пациентов с метастатической меланомой, хотя полного ответа не наблюдалось.

Цели:

Основные цели:

• В когорте 1 и 2, чтобы определить, было ли введение анти-gp100:154-162 TCR-инженерных и анти-MART-1:27-35 TCR-инженерных лимфоцитов периферической крови (PBL), альдеслейкина и любого gp100: 154-162 или пептид MART-1:26-35(27L) пациентам после химиолучевого лимфодеплетирующего подготовительного режима приведет к полной регрессии опухоли у пациентов с метастатической меланомой.
• В когорте 3 и 4, чтобы определить, было ли введение анти-gp100:154-162 TCR-инженерных и анти-MART-1:27-35 TCR-инженерных CD8+ лимфоцитов периферической крови (PBL), альдеслейкина и любого gp100 :154-162 пептид или пептид MART-1:26-35(27L) пациентам после химиолучевого лимфодеплетирующего подготовительного режима приведет к полной регрессии опухоли у пациентов с метастатической меланомой.
• Определить, может ли введение специфической вакцины (пептида gp100:154-162 или пептида MART-1:26-35(27L)) увеличить персистенцию специфических перенесенных клеток (анти-gp100:154-162 TCR PBL, анти-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, анти-MART-1:27-35 TCR PBL или анти-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL) соответственно.

Второстепенные цели:

- Определить профиль токсичности этих схем лечения.

Право на участие:

Пациенты с положительным результатом на HLA-A*0201 в возрасте 18 лет и старше должны иметь:

• метастатическая меланома с измеримым заболеванием
• ранее лечился ИЛ-2 от меланомы;
• нормальные значения основных лабораторных показателей.

У пациентов может отсутствовать:

• сопутствующие серьезные медицинские заболевания;
• любая форма первичного или вторичного иммунодефицита;
• тяжелая гиперчувствительность к любому из агентов, используемых в этом исследовании;
• противопоказания для введения высоких доз альдеслейкина.

Дизайн:

• В когорте 1 и 2:

  • Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) будут получены с помощью лейкафереза ​​(приблизительно 5×10(9) клеток) и культивированы в присутствии анти-CD3 (ОКТ3) и альдеслейкина, а отдельные аликвоты будут трансдуцированы анти-gp100:154- 162 TCR и ретровирусный вектор против MART-1:27-35 TCR.
  • Трансдукция инициируется экспонированием приблизительно от 10(8) до 5×10(8) клеток супернатантом, содержащим ретровирусные векторы. Эти клетки, трансдуцированные gp100 и MART-1 TCR, будут отдельно размножаться и тестироваться на их противоопухолевую активность.
  • После подтверждения биологической активности сконструированных лимфоцитов в соответствии со строгими критериями, изложенными в Сертификате анализа, пациенты будут получать химиолучевой препарат, истощающий лимфоциты, состоящий из циклофосфамида и флударабина, а также облучение всего тела в дозе 600 сГр с последующим внутривенным вливанием опухолереактивного препарата ex vivo. , gp100 и клетки, трансдуцированные геном TCR MART-1, плюс внутривенно альдеслейкин (720 000 МЕ/кг каждые 8 ​​часов, максимум 15 доз).
  • Пациенты будут рандомизированы для получения либо пептида gp100:154-162, либо пептида MART-1:26-35(27L), эмульгированного в неполном адъюванте Фрейнда.
  • Пациенты проходят полную оценку опухоли с физическим осмотром, компьютерной томографией (КТ) грудной клетки, брюшной полости и таза и клинико-лабораторным обследованием через четыре-шесть недель после лечения, а затем ежемесячно в течение примерно 3-4 месяцев или до тех пор, пока не будут соблюдены критерии вне исследования.
  • Исследование будет проводиться с использованием оптимального дизайна фазы II, при котором первоначально 21 поддающийся оценке пациент будет включен в каждую из двух когорт. Если ни у одного из 21 пациента в когорте не наблюдается полного клинического ответа, то дальнейшие пациенты не будут зачислены, но если у 1 или более из первых 21 пациента, поддающихся оценке, включенных в эту когорту, будет полный клинический ответ, то набор в эту когорту будет продолжаться до тех пор, пока всего в эту когорту был включен 41 поддающийся оценке пациент.
  • Когорты 1 и 2 будут закрыты после утверждения поправки D.

• Когорты 3 и 4 будут начаты после утверждения поправки D.

  • Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) будут получены с помощью лейкафереза ​​(примерно 5×10 (9) клеток), а клетки CD8+ будут отобраны из культур с использованием аппарата Miltenyi CliniMACS до стимуляции и трансдукции. Отдельные аликвоты клеток CD8+ будут трансдуцированы ретровирусными векторами анти-gp100:154-162 TCR и анти-MART-1:27-35 TCR.
  • Трансдукцию инициируют путем воздействия приблизительно от 10(8) до 5×10(8) клеток CD8+ на супернатант, содержащий ретровирусные векторы. Эти клетки, трансдуцированные gp100 и MART-1 TCR, будут отдельно размножаться и тестироваться на их противоопухолевую активность.
  • После подтверждения биологической активности сконструированных лимфоцитов в соответствии со строгими критериями, изложенными в Сертификате анализа, пациенты будут получать химиолучевой препарат, истощающий лимфоциты, состоящий из циклофосфамида и флударабина, а также облучение всего тела в дозе 600 сГр с последующим внутривенным вливанием опухолереактивного препарата ex vivo. , gp100 и MART-1 трансдуцированные геном TCR клетки CD8+ плюс внутривенно альдеслейкин (720 000 МЕ/кг каждые 8 ​​часов, максимум 15 доз).
  • Пациенты будут рандомизированы для получения пептида gp100:154-162 (группа 3) или пептида MART-1:26-35(27L) (группа 4), эмульгированного в неполном адъюванте Фрейнда.
  • Пациенты будут проходить полную оценку опухоли с физическим осмотром, КТ грудной клетки, брюшной полости и таза и клинической лабораторной оценкой через четыре-шесть недель после лечения, а затем ежемесячно в течение примерно 3-4 месяцев или до тех пор, пока не будут соблюдены критерии вне исследования.
  • Исследование будет проводиться с использованием оптимального дизайна фазы II, при котором первоначально 21 поддающийся оценке пациент будет включен в каждую из когорт 3 и 4. У 1 или более из первых 21 поддающихся оценке пациентов, зарегистрированных в этой когорте, наблюдается полный клинический ответ, затем набор в эту когорту будет продолжаться до тех пор, пока в этой когорте не будет зачислен в общей сложности 41 поддающийся оценке пациент.