Sädehoito, kemoterapia, rokotteet ja anti-MART-1- ja anti-gp100-solut potilaille, joilla on metastaattinen melanooma

Tausta:

• Olemme kehittäneet ihmisen perifeerisen veren lymfosyyttejä (PBL:t) ekspressoimaan T-solureseptoria (TCR), joka tunnistaa ihmisen leukosyyttiantigeenien (HLAA*0201) rajoitetut epitoopit, jotka ovat peräisin gp100:sta tai MART-1-melanoomaantigeenistä.
• Rakensimme yksittäisiä retrovirusvektoreita, jotka sisältävät sekä alfa- että beeta-T-solureseptoriketjuja (TCR) ja jotka voivat välittää tämän TCR:n geneettistä siirtoa suurella tehokkuudella (yli 30 prosenttia) ilman, että tarvitsee suorittaa mitään valintaa.
• Yhteisviljelmissä HLA-A*0201-positiivisten melanoomien kanssa nämä TCR-transdusoidut T-solut erittivät merkittävän määrän gamma-interferonia (IFN-y), mutta merkittävää eritystä ei havaittu kontrolliyhteisviljelmissä.
• gp100:154-162 TCR- tai MART-1:27-35 TCR-transdusoidut T-solut voivat tappaa tehokkaasti HLAA*0201-positiivisia kasvaimia. Normaalit fibroblastit tunnistettiin vain vähän tai ei ollenkaan.
• Jommankumman näistä TCR:llä siirretyn geenimuunneltujen perifeerisen veren lymfosyyttien (PBL) siirto ei-myeloablatiivisen lymfosyyttien hoidon jälkeen saattoi välittää kasvaimen regressiota 13-30 prosentilla potilaista, joilla oli metastaattinen melanooma, vaikka täydellisiä vasteita ei havaittu.

Tavoitteet:

Ensisijaiset tavoitteet:

• Kohortissa 1 ja 2 sen määrittämiseksi, annetaanko sekä anti-gp100:154-162 TCR-muokattuja että anti-MART-1:27-35 TCR-muokattuja perifeerisen veren lymfosyyttejä (PBL), aldesleukiinia ja joko gp100:a: 154-162-peptidin tai MART-1:26-35(27L)-peptidin antaminen potilaille, jotka seuraavat kemosäteilyn lymfooddepletoivaa preparatiivista hoito-ohjelmaa, johtaa täydelliseen kasvaimen regressioon potilailla, joilla on metastaattinen melanooma.
• Kohortissa 3 ja 4 sen määrittämiseksi, annetaanko sekä anti-gp100:154-162 TCR-muokattuja että anti-MART-1:27-35 TCR-muokattuja CD8+ perifeerisen veren lymfosyyttejä (PBL), aldesleukiinia ja joko gp100:aa. :154-162-peptidi tai MART-1:26-35(27L)-peptidi potilaille, jotka seuraavat kemosäteilyn lymfooddepletoivaa preparatiivista hoito-ohjelmaa, johtaa täydelliseen kasvaimen regressioon potilailla, joilla on metastaattinen melanooma.
• Selvitä, voiko tietyn rokotteen (gp100:154-162-peptidi tai MART-1:26-35(27L)-peptidi) antaminen lisätä tiettyjen siirrettyjen solujen pysyvyyttä (anti-gp100:154-162 TCR PBL, anti-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, anti-MART-1:27-35 TCR PBL tai anti-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL), vastaavasti.

Toissijaiset tavoitteet:

- Määritä näiden hoito-ohjelmien toksisuusprofiili.

Kelpoisuus:

Potilailla, jotka ovat HLA-A*0201-positiivisia ja jotka ovat vähintään 18-vuotiaita, tulee olla:

• metastaattinen melanooma, jossa on mitattavissa oleva sairaus
• on aiemmin hoidettu IL-2:lla melanoomaan;
• laboratorioarvojen normaaliarvot.

Potilailla ei välttämättä ole:

• samanaikaisesti esiintyvät vakavat lääketieteelliset sairaudet;
• minkä tahansa muodon primaarinen tai sekundaarinen immuunipuutos;
• vakava yliherkkyys jollekin tässä tutkimuksessa käytetylle aineelle;
• vasta-aiheet suurten aldesleukiiniannosten antamiselle.

Design:

• Kohortissa 1 ja 2:

  • Perifeerisen veren mononukleaarisolut (PBMC) saadaan leukafereesillä (noin 5 kertaa 10(9) solua) ja viljellään anti-CD3:n (OKT3) ja aldesleukiinin läsnä ollessa ja erilliset erät transdusoidaan anti-gp100:154-. 162 TCR ja anti-MART-1:27-35 TCR retrovirusvektori.
  • Transduktio aloitetaan altistamalla noin 10 (8) - 5 kertaa 10 (8) solua supernatantille, joka sisältää retrovirusvektorit. Näitä gp100- ja MART-1-TCR-transdusoituja soluja kasvatetaan erikseen ja niiden kasvainten vastainen aktiivisuus testataan.
  • Kun muokatut lymfosyytit on osoitettu olevan biologisesti aktiivisia analyysitodistuksessa esitettyjen tiukkojen kriteerien mukaisesti, potilaat saavat kemosäteilyä sisältävän lymfosyyttejä tuhoavan preparatiivisen hoito-ohjelman, joka koostuu syklofosfamidista ja fludarabiinista ja 600 cGy:n koko kehon säteilytyksestä, mitä seuraa suonensisäinen ex vivo kasvainreaktiivinen infuusio. , gp100 ja MART-1 TCR-geenitransdusoidut solut plus IV aldesleukiini (720 000 IU/kg q8h, enintään 15 annosta).
  • Potilaat satunnaistetaan saamaan joko gp100:154-162-peptidiä tai MART-1:26-35(27L)-peptidiä emulgoituna epätäydelliseen Freundin adjuvanttiin.
  • Potilaille tehdään täydellinen kasvainarviointi fyysisellä tutkimuksella, rintakehän, vatsan ja lantion tietokonetomografialla (CT) ja kliinisen laboratorion arvioinnilla neljästä kuuteen viikkoa hoidon jälkeen ja sitten kuukausittain noin 3-4 kuukauden ajan tai kunnes tutkimuksen lopettamisen kriteerit täyttyvät.
  • Tutkimus suoritetaan käyttäen vaiheen II optimaalista suunnittelua, jossa aluksi 21 arvioitavaa potilasta rekisteröidään kumpaankin kahteen kohorttiin. Jos yksikään kohortin 21 potilaasta ei saa täydellistä kliinistä vastetta, uusia potilaita ei oteta mukaan, mutta jos yhdellä tai useammalla ensimmäisestä 21 arvioitavasta potilaasta, jotka on otettu kyseiseen kohorttiin, on täydellinen kliininen vaste, kertyminen kyseiseen kohorttiin jatkuu, kunnes tähän kohorttiin on otettu yhteensä 41 arvioitavaa potilasta.
  • Kohortit 1 ja 2 suljetaan, kun muutos D hyväksytään.

• Kohortti 3 ja 4 käynnistetään, kun muutos D hyväksytään.

  • Perifeerisen veren mononukleaariset solut (PBMC) saadaan leukafereesillä (noin 5 kertaa 10(9) solua) ja CD8+-solut valitaan viljelmistä Miltenyi CliniMACS -laitteella ennen stimulaatiota ja transdusointia. Erilliset CD8+-solujen erät transdusoidaan anti-gp100:154-162 TCR- ja anti-MART-1:27-35 TCR-retrovirusvektoreilla.
  • Transduktio aloitetaan altistamalla noin 10(8) - 5 kertaa 10(8) CD8+-solua supernatantille, joka sisältää retrovirusvektoreita. Näitä gp100- ja MART-1-TCR-transdusoituja soluja kasvatetaan erikseen ja niiden kasvainten vastainen aktiivisuus testataan.
  • Kun muokatut lymfosyytit on osoitettu olevan biologisesti aktiivisia analyysitodistuksessa esitettyjen tiukkojen kriteerien mukaisesti, potilaat saavat kemosäteilyä sisältävän lymfosyyttejä tuhoavan preparatiivisen hoito-ohjelman, joka koostuu syklofosfamidista ja fludarabiinista ja 600 cGy:n koko kehon säteilytyksestä, mitä seuraa suonensisäinen ex vivo kasvainreaktiivinen infuusio. , gp100 ja MART-1 TCR-geenin transdusoimat CD8+-solut plus IV aldesleukiini (720 000 IU/kg q8h enintään 15 annosta).
  • Potilaat satunnaistetaan saamaan joko gp100:154-162-peptidiä (kohortti 3) tai MART-1:26-35(27L)-peptidiä (kohortti 4), joka on emulgoitu epätäydelliseen Freundin adjuvanttiin.
  • Potilaille tehdään täydellinen kasvainarviointi fyysisen tutkimuksen, rintakehän, vatsan ja lantion TT:n ja kliinisen laboratorion arvioinnin kera neljästä kuuteen viikkoa hoidon jälkeen ja sitten kuukausittain noin 3-4 kuukauden ajan tai kunnes tutkimuksen päättymiskriteerit täyttyvät.
  • Tutkimus suoritetaan käyttäen vaiheen II optimaalista suunnittelua, jossa aluksi 21 arvioitavaa potilasta otetaan mukaan kumpaankin kohorttiin 3 ja 4. Jos yksikään kohortin 21 potilaasta ei koe täydellistä kliinistä vastetta, uusia potilaita ei oteta mukaan, mutta jos Yhdellä tai useammalla ensimmäisestä 21 arvioitavasta potilaasta, jotka on otettu kyseiseen kohorttiin, on täydellinen kliininen vaste, sitten kertyminen kyseiseen kohorttiin jatkuu, kunnes yhteensä 41 arvioitavaa potilasta on otettu kyseiseen kohorttiin.