Radiación, quimioterapia, vacunas y células anti-MART-1 y anti-gp100 para pacientes con melanoma metastásico

Fondo:

• Hemos diseñado linfocitos de sangre periférica humana (PBL) para expresar un receptor de células T (TCR) que reconoce epítopos restringidos de antígenos leucocitarios humanos (HLAA*0201) derivados de gp100 o el antígeno de melanoma MART-1.
• Construimos vectores retrovirales únicos que contienen cadenas de receptores de células T (TCR) Alfa y Beta y pueden mediar la transferencia genética de este TCR con alta eficiencia (más del 30 por ciento) sin necesidad de realizar ninguna selección.
• En cocultivos con melanomas positivos para HLA-A*0201, estas células T transducidas con TCR secretaron una cantidad significativa de interferón-gamma (IFN-γ), pero no se observó secreción significativa en los cocultivos de control.
• Las células T transducidas con gp100:154-162 TCR o MART-1:27-35 TCR podrían eliminar eficazmente los tumores positivos para HLAA*0201. Hubo poco o ningún reconocimiento de fibroblastos normales.
• La transferencia adoptiva de cualquiera de estos linfocitos de sangre periférica (PBL) modificados genéticamente transferidos por TCR después de un régimen de linfodepleción no mieloablativo podría mediar la regresión del tumor en el 13-30 por ciento de los pacientes con melanoma metastásico, aunque no se observaron respuestas completas.

Objetivos:

Objetivos principales:

• En las cohortes 1 y 2, para determinar si la administración de linfocitos de sangre periférica (PBL) anti-gp100:154-162 TCR y anti-MART-1:27-35 TCR, aldesleucina y gp100: 154-162 o el péptido MART-1:26-35(27L) a pacientes que siguen un régimen preparatorio de eliminación de linfocitos con quimiorradiación dará como resultado una regresión completa del tumor en pacientes con melanoma metastásico.
• En las cohortes 3 y 4, para determinar si la administración de linfocitos de sangre periférica CD8+ (PBL) anti-gp100:154-162 y anti-MART-1:27-35 TCR, aldesleukina y gp100 :154-162 o el péptido MART-1:26-35(27L) a pacientes que siguen un régimen preparatorio de eliminación de linfocitos con quimiorradiación dará como resultado una regresión tumoral completa en pacientes con melanoma metastásico.
• Determinar si la administración de la vacuna específica (el péptido gp100:154-162 o el péptido MART-1:26-35(27L)) puede aumentar la persistencia de las células transferidas específicas (anti-gp100:154-162 TCR PBL, anti-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, anti-MART-1:27-35 TCR PBL, o anti-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL), respectivamente.

Objetivos secundarios:

- Determinar el perfil de toxicidad de este régimen de tratamiento.

Elegibilidad:

Los pacientes con HLA-A*0201 positivo y mayores de 18 años deben tener:

• melanoma metastásico con enfermedad medible
• sido tratado previamente con IL-2 para el melanoma;
• Valores normales para valores básicos de laboratorio.

Los pacientes pueden no tener:

• enfermedades médicas importantes concurrentes;
• cualquier forma de inmunodeficiencia primaria o secundaria;
• hipersensibilidad grave a cualquiera de los agentes utilizados en este estudio;
• contraindicaciones para la administración de dosis altas de aldesleukina.

Diseño:

• En la cohorte 1 y 2:

  • Se obtendrán células mononucleares de sangre periférica (PBMC) mediante leucaféresis (aproximadamente 5 veces 10(9) células) y se cultivarán en presencia de anti-CD3 (OKT3) y aldesleucina y se transducirán alícuotas separadas con anti-gp100:154- 162 TCR y el vector retroviral anti-MART-1:27-35 TCR.
  • La transducción se inicia mediante la exposición de aproximadamente 10(8) a 5 veces 10(8) células al sobrenadante que contiene los vectores retrovirales. Estas células transducidas con gp100 y MART-1 TCR se expandirán por separado y se analizarán para determinar su actividad antitumoral.
  • Una vez que se demuestre que los linfocitos modificados son biológicamente activos de acuerdo con los criterios estrictos descritos en el Certificado de análisis, los pacientes recibirán un régimen preparatorio de eliminación de linfocitos de quimiorradiación que consta de ciclofosfamida y fludarabina y 600 cGy de irradiación corporal total seguida de una infusión intravenosa de reactivo tumoral ex vivo. , gp100 y células transducidas con el gen MART-1 TCR más aldesleucina IV (720 000 UI/kg q8h para un máximo de 15 dosis).
  • Los pacientes serán aleatorizados para recibir el péptido gp100:154-162 o el péptido MART-1:26-35(27L) emulsionado en adyuvante incompleto de Freund.
  • Los pacientes se someterán a una evaluación completa del tumor con examen físico, tomografía computarizada (TC) de tórax, abdomen y pelvis y evaluación de laboratorio clínico de cuatro a seis semanas después del tratamiento y luego mensualmente durante aproximadamente 3 a 4 meses o hasta que se cumplan los criterios del estudio.
  • El estudio se llevará a cabo utilizando un diseño óptimo de fase II en el que inicialmente se inscribirán 21 pacientes evaluables en cada una de las dos cohortes. Si ninguno de los 21 pacientes por cohorte experimenta una respuesta clínica completa, no se inscribirán más pacientes, pero si 1 o más de los primeros 21 pacientes evaluables inscritos en esa cohorte tienen una respuesta clínica completa, la acumulación en esa cohorte continuará hasta se inscribió un total de 41 pacientes evaluables en esa cohorte.
  • Las cohortes 1 y 2 se cerrarán con la aprobación de la enmienda D.

• Las cohortes 3 y 4 se iniciarán con la aprobación de la enmienda D.

  • Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se obtendrán mediante leucaféresis (aproximadamente 5 veces 10(9) células) y las células CD8+ se seleccionarán de los cultivos, utilizando el aparato Miltenyi CliniMACS, antes de estimularlas y transducirlas. Se transducirán alícuotas separadas de células CD8+ con los vectores retrovirales anti-gp100:154-162 TCR y anti-MART-1:27-35 TCR.
  • La transducción se inicia mediante la exposición de aproximadamente 10(8) a 5 veces 10(8) células CD8+ al sobrenadante que contiene los vectores retrovirales. Estas células transducidas con gp100 y MART-1 TCR se expandirán por separado y se analizarán para determinar su actividad antitumoral.
  • Una vez que se demuestre que los linfocitos modificados son biológicamente activos de acuerdo con los criterios estrictos descritos en el Certificado de análisis, los pacientes recibirán un régimen preparatorio de eliminación de linfocitos de quimiorradiación que consta de ciclofosfamida y fludarabina y 600 cGy de irradiación corporal total seguida de una infusión intravenosa de reactivo tumoral ex vivo. , células CD8+ transducidas con el gen TCR gp100 y MART-1 más aldesleucina IV (720 000 UI/kg q8h para un máximo de 15 dosis).
  • Los pacientes serán aleatorizados para recibir el péptido gp100:154-162 (cohorte 3) o el péptido MART-1:26-35(27L) (cohorte 4) emulsionado en adyuvante incompleto de Freund.
  • Los pacientes se someterán a una evaluación completa del tumor con examen físico, tomografía computarizada de tórax, abdomen y pelvis y evaluación de laboratorio clínico de cuatro a seis semanas después del tratamiento y luego mensualmente durante aproximadamente 3 a 4 meses o hasta que se cumplan los criterios fuera del estudio.
  • El estudio se llevará a cabo utilizando un diseño óptimo de fase II en el que inicialmente se inscribirán 21 pacientes evaluables en cada una de las cohortes 3 y 4. Si ninguno de los 21 pacientes por cohorte experimenta una respuesta clínica completa, entonces no se inscribirán más pacientes, pero si 1 o más de los primeros 21 pacientes evaluables inscritos en esa cohorte tienen una respuesta clínica completa, luego la acumulación en esa cohorte continuará hasta que se haya inscrito un total de 41 pacientes evaluables en esa cohorte.