Stråling, kjemoterapi, vaksine og anti-MART-1 og anti-gp100 celler for pasienter med metastatisk melanom

Bakgrunn:

• Vi har konstruert humane perifere blodlymfocytter (PBL) for å uttrykke en T-cellereseptor (TCR) som gjenkjenner humane leukocyttantigener (HLAA*0201) begrensede epitoper avledet fra gp100 eller MART-1 melanomantigenet.
• Vi konstruerte enkle retrovirale vektorer som inneholder både alfa- og beta-T-cellereseptorkjeder (TCR) og kan formidle genetisk overføring av denne TCR med høy effektivitet (større enn 30 prosent) uten behov for å utføre noen seleksjon.
• I kokulturer med HLA-A*0201 positive melanomer utskilte disse TCR-transduserte T-cellene betydelig mengde interferon-gamma (IFN-y), men ingen signifikant sekresjon ble observert i kontrollkokulturer.
• gp100:154-162 TCR eller MART-1:27-35 TCR transduserte T-celler kunne effektivt drepe HLAA*0201 positive svulster. Det var liten eller ingen gjenkjennelse av normale fibroblaster.
• Adoptiv overføring av en av disse TCR-overførte genmodifiserte perifere blodlymfocyttene (PBL) etter et ikke-myeloablativt lymfodepletteringsregime kunne mediere tumorregresjon hos 13-30 prosent av pasientene med metastatisk melanom, selv om ingen fullstendig respons ble sett.

Mål:

Primære mål:

• I kohort 1 og 2, for å bestemme om administrering av både anti-gp100:154-162 TCR-konstruerte og anti-MART-1:27-35 TCR-konstruerte perifere blodlymfocytter (PBL), aldesleukin og enten gp100: 154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet til pasienter som følger et kjemoradiasjonslymfodepletende preparativt regime, vil resultere i fullstendig tumorregresjon hos pasienter med metastatisk melanom.
• I kohort 3 og 4, for å bestemme om administreringen av både anti-gp100:154-162 TCR-konstruerte og anti-MART-1:27-35 TCR-konstruerte CD8+ perifere blodlymfocytter (PBL), aldesleukin og enten gp100 :154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet til pasienter som følger et kjemoradiasjonslymfodepletende preparativt regime vil resultere i fullstendig tumorregresjon hos pasienter med metastatisk melanom.
• Bestem om administrering av den spesifikke vaksinen (gp100:154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet) kan øke utholdenheten til de spesifikke overførte cellene (anti-gp100:154-162 TCR PBL, anti-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, henholdsvis anti-MART-1:27-35 TCR PBL eller anti-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL.

Sekundære mål:

- Bestem toksisitetsprofilen til disse behandlingsregimene.

Kvalifisering:

Pasienter som er HLA-A*0201 positive og 18 år eller eldre må ha:

• metastatisk melanom med målbar sykdom
• tidligere blitt behandlet med IL-2 for melanom;
• normale verdier for grunnleggende laboratorieverdier.

Pasienter har kanskje ikke:

• samtidige store medisinske sykdommer;
• enhver form for primær eller sekundær immunsvikt;
• alvorlig overfølsomhet overfor noen av midlene brukt i denne studien;
• kontraindikasjoner for høydose aldesleukinadministrasjon.

Design:

• I kohort 1 og 2:

  • Mononukleære celler fra perifert blod (PBMC) vil bli oppnådd ved leukaferese (ca. 5 ganger 10(9) celler) og dyrket i nærvær av anti-CD3 (OKT3) og aldesleukin, og separate alikvoter vil bli transdusert med anti-gp100:154- 162 TCR og anti-MART-1:27-35 TCR retroviral vektor.
  • Transduksjon initieres ved eksponering av ca. 10(8) til 5 ganger 10(8) celler for supernatant som inneholder retrovirale vektorer. Disse gp100- og MART-1 TCR-transduserte cellene vil bli utvidet separat og testet for deres antitumoraktivitet.
  • Så snart konstruerte lymfocytter er demonstrert å være biologisk aktive i henhold til de strenge kriteriene som er skissert i analysesertifikatet, vil pasienter motta et kjemoradiasjonslymfocytt-depleterende preparativt regime bestående av cyklofosfamid og fludarabin og 600 cGy total kroppsbestråling etterfulgt av intravenøs tumorinfusjon av ex vivo. , gp100 og MART-1 TCR gentransduserte celler pluss IV aldesleukin (720 000 IE/kg q8h for maksimalt 15 doser).
  • Pasienter vil bli randomisert til å motta enten gp100:154-162-peptidet eller MART-1:26-35(27L)-peptidet emulgert i Freunds ufullstendige adjuvans.
  • Pasienter vil gjennomgå fullstendig evaluering av svulsten med fysisk undersøkelse, computertomografi (CT) av brystet, magen og bekkenet og klinisk laboratorieevaluering fire til seks uker etter behandling og deretter månedlig i ca. 3 til 4 måneder eller inntil kriteriene utenfor studien er oppfylt.
  • Studien vil bli utført ved å bruke et fase II optimalt design hvor i utgangspunktet 21 evaluerbare pasienter vil bli registrert i hver av to kohorter. Hvis ingen av de 21 pasientene per kohort opplever en fullstendig klinisk respons, vil ingen flere pasienter bli registrert, men hvis 1 eller flere av de første 21 evaluerbare pasientene som er registrert i den kohorten har en fullstendig klinisk respons, vil opptjeningen til den kohorten fortsette til totalt 41 evaluerbare pasienter har blitt registrert i denne kohorten.
  • Kohort 1 og 2 vil bli avsluttet med godkjenning av endring D.

• Kohort 3 og 4 vil bli initiert med godkjenning av endring D.

  • Mononukleære celler fra perifert blod (PBMC) vil bli oppnådd ved leukaferese (ca. 5 ganger 10(9) celler) og CD8+-celler vil bli valgt fra kulturene, ved bruk av Miltenyi CliniMACS-apparatet, før de blir stimulert og transdusert. Separate alikvoter av CD8+-celler vil bli transdusert med anti-gp100:154-162 TCR og anti-MART-1:27-35 TCR retrovirale vektorer.
  • Transduksjon initieres ved eksponering av ca. 10(8) til 5 ganger 10(8) CD8+-celler for supernatant som inneholder de retrovirale vektorene. Disse gp100- og MART-1 TCR-transduserte cellene vil bli utvidet separat og testet for deres antitumoraktivitet.
  • Så snart konstruerte lymfocytter er demonstrert å være biologisk aktive i henhold til de strenge kriteriene som er skissert i analysesertifikatet, vil pasienter motta et kjemoradiasjonslymfocytt-depleterende preparativt regime bestående av cyklofosfamid og fludarabin og 600 cGy total kroppsbestråling etterfulgt av intravenøs tumorinfusjon av ex vivo. , gp100 og MART-1 TCR-gentransduserte CD8+-celler pluss IV aldesleukin (720 000 IE/kg q8t for maksimalt 15 doser).
  • Pasienter vil bli randomisert til å motta enten gp100:154-162-peptidet (kohort 3) eller MART-1:26-35(27L)-peptidet (kohort 4) emulgert i Freunds ufullstendige adjuvans.
  • Pasienter vil gjennomgå fullstendig evaluering av svulsten med fysisk undersøkelse, CT av bryst, mage og bekken og klinisk laboratorieevaluering fire til seks uker etter behandling og deretter månedlig i ca. 3 til 4 måneder eller inntil kriteriene utenfor studien er oppfylt.
  • Studien vil bli utført ved å bruke et fase II optimalt design der i utgangspunktet 21 evaluerbare pasienter vil bli registrert i hver av kohort 3 og 4. Hvis ingen av de 21 pasientene per kohort opplever en fullstendig klinisk respons, vil ingen flere pasienter bli registrert, men hvis 1 eller flere av de første 21 evaluerbare pasientene som er registrert i den kohorten har en fullstendig klinisk respons, deretter vil opptjening av den kohorten fortsette inntil totalt 41 evaluerbare pasienter har blitt registrert i den kohorten.