Fællesskabsbaseret klinisk forsøg med mikrobiota-styret komplementære fødevarer (MDCF'er) lavet af lokalt tilgængelige fødevareingredienser til håndtering af børn med primær moderat akut underernæring

Baggrund:

Moderat akut underernæring (MAM), et stort globalt sundhedsproblem, defineres som spild (dvs. vægt-for-højde mellem < -2 og -3 Z-scores af WHO Child Growth Standards) og/eller mid-upper-arm circumference (MUAC) større eller lig med 115 mm og mindre end 125 mm. Ifølge Global Nutrition Report 2017 var 8 % eller 52 millioner børn under fem år akut underernærede globalt i 2016. Stunting ramte 23 % eller 155 millioner børn. Cirka et ud af 6 børn under 5 år i Sydasien led af MAM i 2013 (dvs. 17 %). Disse børn har øget risiko for alvorlig akut underernæring (SAM) og har en tre gange højere risiko for dødelighed af almindelige smitsomme sygdomme end de velernærede jævnaldrende. Bangladesh har en af ​​de højeste underernæringsbyrder blandt børn i verden. Ifølge Bangladesh Demographic Health Survey (BDHS) 2014 er forekomsten af ​​stunting blandt børn under fem år 36 %, blandt dem lider 12 % af alvorlig stunting (Length-for-Age-Z score, LAZ <-3). Omkring 15 % af børnene går til spilde (Vægt-til-længde Z-score, WLZ <-2); mere end 2 millioner børn lider af MAM, mens 3 % eller 450.000 børn lider af den dødelige form for SAM. Underernæring koster Bangladesh anslået 1 milliard USD om året. Ifølge WHOs anbefalinger skal spædbørn og børn i alderen 6-59 måneder med MAM indtage næringstætte fødevarer for at opfylde deres ekstra behov for vægt- og højdeforøgelse og funktionel restitution. På nuværende tidspunkt er der ingen evidensbaserede anbefalinger om sammensætningen af ​​supplerende fødevarer til behandling af børn med MAM. I situationer med fødevaremangel er supplerende fødevarer blevet brugt til at behandle børn med moderat akut underernæring. Interventioner, der skal behandles under ernæring, bør derfor omfatte en stærk komponent i MAM-håndtering. MAM-forebyggelse bør tages i betragtning i fødevaresikkerheden og andre udviklingsstrategier, da situationen bliver kritisk i befolkninger, hvor fødevareusikkerheden er udbredt. Fødevareusikkerhed er blevet en verdensomspændende bekymring på grund af det stigende antal mennesker, der forbliver underernærede, svarende til 842 millioner, cirka 12 % af verdens samlede befolkning. Fra den nationale undersøgelse af mikronæringsstofstatus i Bangladesh, som vi gennemførte i 2011-12, blev alvorlig fødevareusikkerhed oftest fundet i slumbebyggelser (17,2 %) sammenlignet med 12,3 % på nationalt plan, 12 % i landdistrikter og 12,4 % i landets byområder. Da fødevareusikkerhed ikke kan overvindes ganske let, er det derfor vigtigt at udvikle interventioner, der afhænger af lokalt tilgængelige fødevareingredienser og er i stand til at udnytte tarmmikrobiotaens gavnlige kraft på spædbørns og børns vækst.

En af de vigtigste faktorer, der begrænser virkningen af ​​ernæringsintervention, er de underernærede børns manglende evne til at øge deres indtag for at imødekomme øgede metaboliske krav. I samarbejdsundersøgelser mellem icddr,b og Gordon Lab ved Washington University i St. Louis under Jump start Phase af Breast Milk, Microbiota and Immunity (BMMI) Project, anvendte vi Random Forests, en maskinlæringsbaseret tilgang til at bakterielle 16S rRNA-datasæt (ribosomal ribonukleinsyre) genereret fra månedlige fækale prøver opnået fra en fødselskohorte af børn, der bor i en urban slum i Dhaka, Bangladesh. Disse børn udviste konsekvent sund vækst (WLZ -0,32+0,98). Bakteriestammer blev identificeret, hvis proportionale repræsentation definerer en sund tarmmikrobiota, som den samler sig i løbet af de første 2-3 postnatale år. I et randomiseret klinisk forsøg på icddr,b af to terapeutiske fødevarer (importeret brugsklar terapeutisk mad [RUTF (Ready to Use Therapeutic Food), Plumpy'Nut] versus lokalt tilberedt ris/linsebaseret Khichuri og Halwa) i Bangladesh børn med svær akut underernæring (SAM), blev det observeret, at mikrobiota-umodenhed er ufuldstændig og kun forbigående forbedret, hvor børn forbliver markant forkrøblede og undervægtige gennem hele opfølgningsperioden. Bangladeshiske børn med MAM udviste også betydelig mikrobiotaumodenhed, selvom de var mindre alvorlige end børn med SAM. Mikrobiota umodenhed tjener således som en potentiel biomarkør til at identificere spædbørn med risiko for underernæring og til at overvåge behandlings- og forebyggelsesstrategier.

Efterforskere har for nylig udviklet brugsklare terapeutiske fødevarer ved hjælp af lokalt tilgængelige fødevareingredienser-ris, linser og kikærter, der er kulturelt relevante og acceptable. De fandt gennem en dobbeltblind RCT (Randomized Controlled Trial), at kikærtebaseret og ris-linsebaseret RUTF var lige så effektive som den kommercielle jordnøddebaserede RUTF og godt accepteret af børn med SAM. Gennem en kombination af ovennævnte RCT og kliniske translationelle undersøgelser har de identificeret vækstfremmende aldersdiskriminerende gavnlig mikrobiota og lokalt tilgængelige fødevareingredienser, der understøtter spredning af disse gavnlige mikrobioter. Desuden har resultater af tidligere undersøgelser udført på gnotobiotiske dyr i Washington University Center for Genome Science fået os til at foreslå, at en kombination af fødevareingredienser (kikærter, sojamel, jordnødder og grøn banan) vil være værd at studere med hensyn til kostens indvirkning på stimulere spredning af vækstdiskriminerende mikrobiota samt omkostninger og bæredygtighed. For at vurdere, i hvilken grad resultaterne opnået fra de gnotobiotiske muse- og pattegrisemodeller oversættes til mennesker, udførte efterforskere for nylig en RRC (Research Review Committee) og ERC (Ethecial Review Committee) godkendt undersøgelse, icddr,b protokol (PR-16099) ' Pre-Proof of Concept kliniske forsøg for at optimere lead microbiota-directed complementary food (MDCF) prototyper for deres evne til at reparere mikrobiota umodenhed og etablere deres organoleptiske acceptabilitet 'og gennemførte undersøgelsen med succes. Denne undersøgelse var designet til at teste virkningerne af tre lokalt producerede MDCF-prototyper (MDCF-1, MDCF-2 og MDCF-3) og en lokalt produceret ris-linser-baseret RUSF. Formålet med denne pilotundersøgelse var at demonstrere et Pre-proof of Concept, at visse komplementære fødevarer ville have en gavnlig effekt på små børn, der lider af moderat akut underernæring ved at stimulere spredningen af ​​bestemte medlemmer af tarmmikrobiotaen, som er kendt for deres vækstfremmende effekt. I det pilotstudie undersøgte de mikrobiota-for-alder Z-score samt virkningen af ​​spredningen af ​​gode medlemmer af tarmmikrobiotaen på visse kropssystemer. Resultaterne af Pre-POC pilotforsøget viste endegyldigt, at en af ​​de tre mikrobiota-rettede komplementære fødevarer, nemlig (MDCF-2; sammensat af en kombination af kikærter, sojamel, jordnødder, grøn banan, olie, sukker og mikronæringsstoffer) var forbundet med øgede niveauer af visse aminosyrer, som har en nøglerolle i udviklingen af ​​de lange knogler, udvikling af hjernen og øget produktion af IGF-1. Dette blev gjort ved hjælp af den avancerede DNA-aptamer-baserede SomaLogic-scanning. Og resultaterne tyder på, at denne kandidat MDCF-2 er effektiv til at stimulere væksten af ​​vækstfremmende medlemmer af tarmmikrobiotaen, for eksempel Faecalibacterium prausnitzii. Således fremmer MDCF-2 tarmmikrobiota, der inducerer hormonet insulinlignende vækstfaktor 1 (IGF-1), som fremmer knoglevækst og ombygning.

Baseret på denne evidens vil efterforskerne nu gerne lave et meget større klinisk forsøg med den mest lovende MDCF, som er MDCF-2, hvor det primære slutpunkt er lineær vækst. Dette forsøg ville være på børn med primær MAM.

Forskningsdesign og -metoder Undersøgere vil udføre et klinisk forsøg blandt 12-18 måneder gamle børn med primær MAM (WLZ <-2 til -3).

Studiedesign: Randomiseret kontrolleret interventionsforsøg. Undersøgelsessted: Denne undersøgelse vil blive udført på Bauniabadh, RADDA MCH-FP (Maternal and Child Health - Family Planning) klinik i Mirpur-området og Gabtoli i Dhaka by, og muligvis på Special Nutrition Unit, der drives af Terre des Hommes i Kurigram.

Studiedeltagere: Studiedeltagerne vil være 12-18 måneder gamle børn af begge køn med MAM (WLZ <-2 til -3).

Indledende screening og tilmelding: Børn vil blive screenet og tilmeldt gennem husstandsundersøgelser af Field Research Assistants (FRA) efter foruddefinerede inklusionskriterier. Når tilmeldingskriterierne er opfyldt og efter at have modtaget samtykke til studiedeltagelse fra forældre eller værger, vil børnene med den respektive mor/plejer blive tilmeldt og tilfældigt tildelt en af ​​de to arme i henhold til computergenererede tilfældige tal. Koden for den tildelte diættype vil blive opbevaret i lukkede uigennemsigtige kuverter for hver enkelt person og vil kun blive åbnet, når omsorgspersonen underskriver samtykkeerklæringen.

Studere design:

Arm 1 - Ris-linsebaseret RUSF (rationale: referencestandard for pleje for MAM; baseret på viden om dets virkninger på tarmmikrobiota eller mikrobiota umodenhed) Arm 2 - MDCF2 (Microbiota Directed Complementary Food 2) med fire komplementære fødevareingredienser (rationale : bly med evidens fra præ-POC kliniske forsøg for at optimere blymikrobiota-rettede komplementære fødevareprototyper for deres evne til at reparere mikrobiota umodenhed og positive effekter på vækst) Fækal prøveindsamling Ugentlig afføringsprøve (1-2g) vil blive indsamlet inden for 30 minutter efter udskillelse (hjemme og transporteret tilbage til icddr,b) ved hjælp af den flydende nitrogenholdige tør afsender. Prøver vil blive opbevaret ved -80°C, før de sendes til Gordon Lab-analyse af mikrobiotamodenhed (målt før, under og efter ophør af behandling med MDCF og RUSF) og PCR (Polymerase Chain Reaction)-baseret vurdering af enteropatogen byrde i fækal prøver (målt før og efter MDCF-behandling).

1-2 g afføringsprøver vil blive indsamlet fra hvert barn ved indskrivning, ugentligt i løbet af den første interventionsmåned og 4 ugentligt i løbet af den anden og tredje måned af interventionen og i slutningen af ​​post-interventionsfasen. Forudsat at der er 62 forsøgsdeltagere/arm, vil i alt 992 fækale prøver blive indsamlet i denne undersøgelse. 2 g afføringsprøver vil blive indsamlet fra mødre på tidspunktet for tilmeldingen.

Urinprøvetagning 2 ml urinprøver vil blive indsamlet fra hvert barn ved indskrivning, en uge efter indskrivning og månedligt én gang i interventions- og post-interventionsfasen. Forudsat at der er 62 forsøgsdeltagere/arm, vil der blive indsamlet i alt 744 urinprøver i denne undersøgelse. 5 mL urinprøver vil blive indsamlet fra mødre på tidspunktet for tilmelding.

Blodprøvetagning 2 ml blodprøver hver vil blive indsamlet fra hvert barn før intervention, slutningen af ​​den første interventionsmåned og lige efter at interventionen er afsluttet. I alt 372 plasmaprøver vil blive indsamlet i denne undersøgelse. 5 ml blodprøver vil blive indsamlet fra mødre på tidspunktet for tilmeldingen.

Moderens ernæringsstatus er forbundet med barnets ernæringsstatus, som vist gennem resultaterne af vores otte lande MAL-ED (Malnutrition and Enteric Diseases) undersøgelse. Derudover var neonatale og andre maternelle faktorer tidlige determinanter for lavere længde for alder, og deres bidrag forblev vigtigt gennem de første 24 måneder af livet.9 De andre maternelle faktorer, mener efterforskere, vil omfatte moderens tarmmikrobiota såvel som moderens blods aminosyreprofil. Initiativer til behandling af hæmning i barndommen bør også overveje forbedringer af sammensætningen af ​​komplementære fødevarer (dvs. højere protein) og strategier til at reducere tarmpatogeneksponering. Som sådan vil de registrere moderens højde og vægt. For at forstå moderens biologiske ernæringstilstand vil moderen blive bedt om indskrivningsprøver af afføring, blod og urin. Disse prøver vil blive analyseret for tarmmikrobiota og proteomik, og resultaterne vil blive korreleret med resultaterne fra de tilmeldte børn.

Ernæringssessioner Børnene og mødrene/plejepersonalet vil blive bedt om at komme til de ernæringscentre, der er etableret på stederne, helst mellem kl. 9-11 og 15-17 på dag 1. Mødrene vil blive bedt om ikke at give mad og modermælk i de 2 timer før det observerede måltid. Barnet vil blive tilbudt 25 gram MDCF eller RUSF efter tilfældig tildeling i hvert af de to måltider mellem kl. 9-11 og 15-17. Mødrene vil blive bedt om at fodre deres børn med den på forhånd vejede diæt, indtil hun/han nægter at spise, som beskrevet nedenfor. Efter en pause på to minutter vil den samme diæt blive tilbudt en anden gang, indtil han/hun nægter igen. Efter en anden pause på to minutter vil diæten blive tilbudt en tredje gang, indtil den afvises igen. Efter dette tredje afslag vil fodringsepisoden blive betragtet som 'afsluttet'. Fodringens varighed (eksklusive de mellemliggende 'hvileperioder') vil blive registreret med stopur, og den samlede varighed af fodringen noteres. Denne fodringsepisode varer maksimalt 60 minutter. Målte mængder almindeligt vand vil også blive givet, og mængden af ​​vand, der tages i løbet af denne måltidsperiode på 60 minutter, vil blive målt. Fodringsepisoden vil foregå under direkte opsyn af uddannet studiepersonale. Børn vil blive betragtet som at nægte yderligere indtagelse, hvis de flytter hovedet væk fra maden, græder, klemmer munden eller sætter tænderne sammen, eller bliver ophidsede, spytter maden ud eller nægter at synke. Mængden af ​​MDCF/RUSF faktisk indtaget vil blive beregnet ved at trække restmængden fra den tilbudte mængde. Forvejede servietter vil blive leveret; enhver mad, der er opstødt, kastet op eller spildt, vil blive vasket, vejet og trukket fra den tilbudte mængde. Mængden af ​​indtaget mad (g), energi (kcal) og kategori af accept vil blive analyseret. De tilmeldte børn vil blive overvåget dagligt af feltforskningsassistenter for eventuelle bivirkninger/uønskede hændelser (f. udslæt, nældefeber på grund af fødevareallergi eller væsentlige ændringer i klinisk status) i en uge. Hvis der observeres nogen bivirkninger/uønskede hændelser, vil de blive behandlet i henhold til standard pleje. En standardiseret produktionsprocedure vil blive fulgt for at kontrollere kvaliteten af ​​RUSF og MDCF efter international standardprotokol. RUSF og MDCF vil blive tilberedt på fødevareforarbejdningslaboratoriet. Tilberedning af mad under forskellige trin, det vil sige ristning, partikelstørrelsesreduktion, homogen blanding og levering til ernæringscentrene vil blive overvåget af icddr,b-forskere. Mad vil blive tilberedt hver dag for at sikre, at der ikke opstår uventet forurening og tab af næringsstoffer under tilberedning. Selvom råfødevareingredienser vil blive meget omhyggeligt fremskaffet fra det lokale marked og opbevaret i rimelige mængder, vil efterforskere forberede, dispensere og fodre børnene samme dag, som MDCF og RUSF forberedes. Hvert barn vil blive tilbudt 25 g af kosten to gange dagligt på fodercentret i de første 4 uger. I den følgende måned vil barnet blive tilbudt 25 g af kosten på fodercentret, og yderligere 25 g vil blive givet i en ren beholder til at fodre derhjemme. I den tredje måned vil to separate beholdere indeholdende 25 g diæt blive leveret hver dag til hvert tilmeldt barn i deltagerens hjem.

I denne undersøgelse vil ernæringsstatus blive vurderet gennem antropometri, sammenlignet med WHOs vækstreferencestandarder. I begyndelsen af ​​undersøgelsen vil der blive søgt information om de demografiske karakteristika (familiers formue, boligstandard, familiestruktur og forældrekarakteristika osv.), og FRA'er vil registrere børnenes vægt ved hjælp af en digital vægt med 2g præcision (Seca, model 728, Tyskland), længde (ved hjælp af infantometer, Seca, model 416, Tyskland) og midterste overarms omkreds til nærmeste mm (ved hjælp af en ikke-strækbar indføringstape). Antropometri vil blive udført i henhold til standardprocedurerne, og alle målinger vil blive taget tre gange, og den midterste vil blive optaget.

Alle interventioner i hver undersøgelse vil blive administreret til børn på Mirpur sundhedsklinik/RADDA klinik eller i Kurigram. Mødre/primære omsorgspersoner vil blive rådet til at opretholde deres barns nuværende kost- og ammepraksis.

Efterforskerne vil afslutte tilmeldingen inden for 12 måneder og opfølgningen samt dataanalysen inden for yderligere 6 måneder. Dette forsøg med primær MAM vil dog fortsætte samtidig med det andet kliniske forsøg på Post SAM-MAM, som vil have en længere varighed.

Rekruttering, screening og samtykke Census, screening, tilmelding af studiedeltagere vil blive udført i oplandet til stederne i Dhaka by og i Kurigram. Forældre til børn, der opfylder MAM-kriterierne (for Primær MAM-forsøg), vil blive kontaktet om tilmelding til undersøgelsen. En feltforskningsassistent vil forklare undersøgelsen i detaljer, besvare eventuelle spørgsmål fra forældrene og invitere forældrene til at tilmelde barnet i undersøgelsen.

I begyndelsen af ​​undersøgelsen vil der blive søgt information om de demografiske karakteristika (familiers formue, boligstandard, familiestruktur og forældrekarakteristika osv.), og FRA'er vil registrere børnenes vægt ved hjælp af en digital vægt med 2 g præcision, længde (ved hjælp af infantometer), og midt på overarmens omkreds til nærmeste mm. Undersøgelsesdeltagere vil blive bedt om at komme direkte til ernæringscentret for ernæringsterapi.

Forberedelse af MDCF 2 og RUSF Baseret på kompatible kombinationer af komplementære fødevareingredienser identificeret i præ-POC-studiet beskrevet ovenfor, vil MDCF2 samt ris-linser RUSF blive produceret på icddr,b fødevareforarbejdningsanlægget i Mirpur og i Kurigram (til etableres begge steder) i tilstrækkelige mængder til klinisk undersøgelse. De to diæter vil blive matchet i energitæthed og indhold af mikronæringsstoffer. Energitætheden af ​​MDCF er 125 kcal/25 g (pr. portion), og kaloriefordelingen er målrettet til at være 45-50 procent fra fedt og 8-10 procent fra protein. Eksperimenter med udvikling af MDCF-prototyper og vurdering af de organoleptiske egenskaber er blevet udført under det præ-POC kliniske forsøg. Efter modtagelse af råvarerne (ris/linser/kikærter) tages de fremmede materialer/korn eller frø (hvis der er nogen) ud, og derefter i en åben pande vil råvarerne blive ristet. Temperaturen holdes på 120-130°C til stegning. Normalt tager det 8-10 minutter at stege 100g af hver råvare. Kontinuerlig omrøring er afgørende for at sikre ristning af enkelte frø/korn. Efter endt stegning vil den blive holdt til side til afkøling og derefter grines. Til sidst tilsættes det forvejede præmixpulver. Forarbejdningen af ​​hel grøn banan til medtagelse i MDCF2 er forskellig fra de andre ingredienser. Grøn banan med skind kommer i en dyb gryde i kogende vand (100°C-110°C) og koges i ca. 17-20 minutter, indtil de er kogte og møre. Skindet af den grønne banan vil blive skrællet af, og den spiselige hvide del vil blive taget og revet i små stykker. Derefter tages de i en gryde og får lov at køle af. De små stykker banan bliver knust med ske/håndknuser. Vægten af ​​alle andre ingredienser vil blive registreret. Opskrifter vil blive fremstillet i små partier ved at blande alle ingredienser i en elektrisk blender. En lille mængde (1 procent) sojalecithin skal tilsættes til opskriften for at forbedre konsistensen og forhindre olieudskillelse.

Antropometri Barnets alder vil blive verificeret mod dokumentation (fødselsattest eller immuniseringskort, hvis det er tilgængeligt) eller omsorgspersonens rapport om barnets fødselsdato. Længden vil blive målt af et infantometer, der er følsomt til 0,1 cm. Kropsvægten vil blive målt ved en balance, der er følsom over for 2g. Længde-for-alder (LAZ), vægt-for-længde (WLZ) og Vægt-for-alder (WAZ) Z-score vil blive beregnet i henhold til Multicenter Growth Reference Study (MGRS) WHO (World Health Organization) vækststandarder. Ødem vil blive undersøgt ved at trykke på oversiden af ​​begge fødder i 3 sekunder. Midt-overarms omkreds (MUAC) vil blive målt ved hjælp af MUAC tape (UK). Regelmæssig standardisering af måleudstyret vil blive udført ved hjælp af standarder.

Analyser af plasma- og fækale prøver Plasmaprøver indsamlet fra dette forsøg vil blive sendt til Dr. Jeffrey Gordons laboratorium i Center for Genome Sciences and Systems Biology ved Washington University i St. Louis. Avancerede massespektroskopiske og immunoassay-baserede metoder vil blive brugt til at opnå ny viden om rollen af ​​tarmmikrobiota umodenhed og virkningerne af at forsøge akut reparation af denne umodenhed med bly mikrobiota-dirigeret komplementær mad (MDCF) på biomarkører og mediatorer af sund vækst . Der vil blive foretaget sammenligninger med kontrolgruppen (dvs. dem, der bruger reference RUSF-standarden). Målrettet ultraperformance væskekromatografi-massespektrometri (UPLC-MS) og gaskromatografi-massespektrometri (GC-MS) vil blive brugt til at profilere analytter af specifik interesse i plasma- og/eller fækale prøver, herunder galdesyrer og kortkædede fedtsyrer (SCFA'er) ); markører for mitokondriel funktion (f.eks. β-hydroxybutyrat, acylcarnitiner/acylCoAs, TCA-cyklusmellemprodukter); aminosyrer i serum plus fækale prøver [grenkædede aminosyrer, tryptophan- og tryptophanmetabolitter relateret til vækst og inflammatorisk status, herunder dem, der produceres af bakteriel tryptofanmetabolisme (f. indoleddikesyrederivater)]. Nøglemediatorer/biomarkører for lineær vækst (f.eks. væksthormon og IGF-1), energiudnyttelse (insulin, leptin) og knoglebiologi [IL-6 (Interleukin-6), osteoprotegerin, det C-terminale peptid af type I kollagen (CTX, en markør for osteoklastaktivitet/knogleresorption), og det aminoterminale propeptid af Type 1 procollagen (P1NP, en markør for osteoblastaktivitet/knogledannelse)], og systemisk inflammation (CRP, AGP) vil blive kvantificeret ved hjælp af etableret ELISA/Luminex-assays. Proteiner i blodet vil blive identificeret ved hjælp af SOMAlogic-scanningen, der tillader identifikation af mere end 1300 forskellige proteiner. Den proteomiske undersøgelse udført på plasmaprøver fra børn med SAM i vores tidligere Pre-POC-forsøg udført i Dhaka har allerede vist en række signifikante og klinisk relevante sammenhænge mellem visse proteiner og kliniske fænotyper ved hjælp af SOMAlogic-scanningen.

Den indsamlede information vil blive brugt til at udvælge humane fækale prøver til transplantation til bakteriefrie dyr i Gordon Lab i St. Louis; disse dyr, som vil blive fodret med diæter fra deres menneskelige mikrobiotadonorer, vil blive brugt til yderligere at karakterisere de mekanismer, der forbinder MDCF-prototyper, tarmmikrobiotaen og værtens fysiologi/metabolisme. Derudover vil disse plasma- og fækale biomarkører blive brugt til at bestemme, at MDCF fremmer reparation af mikrobiota-umodenhed og forbedrer den biologiske tilstand hos børn.

Beregning af prøvestørrelse I præ-POC-forsøget med forskellige MDCF'er var baseline-vægt-for-længde Z-score for børn, der fik MDCF2, -2,2 og efter en måneds tilskud var -1,7. Hvis det betragtes som WLZ -2 ved baseline og -1,7 ved slutlinie, poolet SD (Standard Deviation) som 0,53, så er prøvestørrelsen 49 i hver arm ved 80 % power og 5 % signifikansniveau.

Med 20 % nedslidning skal 62 børn være tilmeldt hver arm. Til det primære MAM-forsøg vil 62 børn derfor modtage MDCF2 og 62 børn vil modtage ris-linser RUSF.

Dataanalyse De to grupper af børn med MAM vil blive sammenlignet ved baseline og på forskellige tidspunkter. Alle analytter nævnt i afsnittet Analyser af plasma- og fækale prøver vil blive sammenlignet mellem MDCF2- og RUSF-grupper.

Data Safety Monitoring Plan (DSMP) Dataindsamlingsværktøjer til denne undersøgelse vil omfatte case-rapportformularer, laboratoriearbejdsark og kildedokumentation. Fuldstændig kildedokumentation (studiebesøg, laboratorierapporter osv.) vil blive opbevaret for hver undersøgelsesdeltager i individuelle undersøgelsesskemaer. Alle laboratorieprøver, rapporter, undersøgelsesdataindsamling og administrative formularer vil blive identificeret med kodet nummer for at opretholde forsøgsdeltagernes fortrolighed og for at muliggøre sporing gennem hele undersøgelsen.

Formularer, lister, logbøger, aftalebøger og enhver anden fortegnelse, der forbinder studiedeltager-id (identifikation)-numre til andre identificerende oplysninger, vil blive gemt i en separat, låst fil i et område med begrænset adgang. Alle oplysninger om undersøgelsesdeltagere vil blive opbevaret i adgangskodebeskyttede computerfiler eller i låste arkivskabe, som kun kan tilgås af autoriseret undersøgelsespersonale. Kortoplysninger og oplysninger fra undersøgelsesregistre vil ikke blive frigivet uden skriftlig tilladelse fra undersøgelsesdeltagerens forældre. Optegnelser kan dog gennemgås af repræsentanter fra forskningsudvalget og etisk bedømmelsesudvalg for icddr,b.

Undersøgelsens efterforskere er ansvarlige for at sikre fuldstændig og nøjagtig dokumentation for undersøgelsen og for hver forsøgsdeltager, herunder: lægejournaler, optegnelser, der beskriver hver enkelt forsøgsdeltagers fremskridt gennem undersøgelsen, laboratorierapporter, Case Report Forms (CRF'er), underskrevne informerede samtykkeformularer, korrespondance med IRB (Institutional Review Board), rapporter om uønskede hændelser og information vedrørende deltagerens afbrydelse og afslutning af undersøgelsen. Alle nødvendige data vil blive klart og nøjagtigt registreret i CRF'erne af autoriseret undersøgelsespersonale. Kun udpeget studiestedspersonale, der har modtaget passende træning, vil registrere eller ændre data i en CRF. Efterforskerne er ansvarlige for at fremskaffe data og for kvaliteten af ​​data registreret i CRF'erne. Dataindtastning og -styring vil blive udført på icddr,b.

Ethical Assurance for Protection of Human Rights Undersøgelsen vil blive startet efter opnåelse af IRB-godkendelse af icddr,b Research Review Committee og Ethical Review Committee. Inden tilmelding til undersøgelsen vil der blive taget informeret skriftligt samtykke fra forsøgsdeltagernes juridiske værge. Privatlivets fred, anonymitet og fortrolighed af data/oplysninger, der identificerer undersøgelsesdeltagerne, vil blive nøje opretholdt. Personlige identifikationer taget under tilmelding og andre undersøgelsesprocedurer vil blive opbevaret under lås og slå. Ingen andre end undersøgelsens personale vil have adgang til oplysninger om personidentifikation og andre følsomme oplysninger.

Forventede risici/uønskede hændelser for denne protokol er dem, der er relateret til blodprøveindsamling, fækal prøveindsamling og fodring af mikrobiota-styret komplementær mad. Ingen af ​​disse kvalificeres som en alvorlig bivirkning (SAE). Forventede bivirkninger (EAE'er) relateret til blodudtagning er som følger:

• ubehag
• smerte
• introduktion af infektion
• blødende

• besvimelse eller blå mærker

  • Der vil blive taget forholdsregler for at undgå introduktion af infektion ved at desinficere stedet for venepunktur og bruge sterilt udstyr
  • Risikoen for blødning og blå mærker vil blive minimeret ved øjeblikkelig påføring af tryk efter venepunktur
  • Deltageren (barnet) vil være i siddende eller liggende stilling under blodudtagninger for at undgå skader fra besvimelse

Alle mulige bivirkninger vil blive behandlet passende. Disse vil omfatte:

• Opkastning
• Diarré
• Udslæt
• Nældefeber fra fødevareallergi
• Abdominal udspilning
• Smerter i maven Vurdering af bivirkninger Både alvorlige og ikke-alvorlige bivirkninger vil blive vurderet for sværhedsgrad; forhold til studiedeltagelse; truffet handlinger; og resultater. Alle SAE'er vil blive rapporteret til ERC af icddr,b inden for 24 timer efter webstedets kendskab til begivenheden, som igen vil blive distribueret til sponsoren. Dette vil ske ved direkte telefonkommunikation, fax eller e-mail.

Hver kategori for AE-vurdering vil blive kodet i henhold til følgende karaktersystemer:

Alvorlighed:

1. Mild
2. Moderat
3. Alvorlig

Relation til studiedeltagelse:

1. Bestemt relateret: Tydelig tidsmæssig sammenhæng, ingen anden mulig årsag
2. Muligvis relateret: Mindre tydelig tidsmæssig sammenhæng, andre årsager mulige
3. Ikke-relateret: Uafhængigt af undersøgelsen er der bevis for, at hændelsen definitivt er relateret til en anden ætiologi

Handlinger:

Ingen Afhjælpende terapi (mere end én dosis medicin påkrævet) Permanent afbrudt fra studiedeltagelse Hospitalsindlæggelse Anden brug af dyr Ikke relevant Samarbejdsordninger Dette projekt er et samarbejde mellem efterforskerne ved Washington University School of Medicine og International Center for Diarrheal Disease Research , Bangladesh (icddr,b). Det kliniske arbejde, feltaktiviteter vil blive udført i Dhaka, Bangladesh, under direkte supervision af Principal Investigator, mens laboratorieanalyserne vil blive udført på Gordon Lab ved Washington University i St. Louis. Alle forskningsenheder og de samarbejdende efterforskere har lange historier om internationale samarbejder. Alle efterforskere har kommunikeret under udviklingen af ​​dette projekt og er forpligtet til dets succesfulde implementering.

Tilgængelige faciliteter icddr,b har et veludstyret fødevareforarbejdningslaboratorium, der vil lette forberedelsen af ​​diætopskrifter. En række projektkontorer er placeret i Mirpur. Endnu vigtigere er, at der er etableret et fremragende forhold til samfundet. Samfundseliten og de ældre inviteres hvert år til et formidlingsmøde, så de er opmærksomme på den forskning, der udføres.

Center for Genome Sciences, Washington University i St. Louis: