Ensaio clínico baseado na comunidade com alimentos complementares direcionados à microbiota (MDCFs) feitos de ingredientes alimentares disponíveis localmente para o manejo de crianças com desnutrição aguda moderada primária

Fundo:

A desnutrição aguda moderada (MAM), um importante problema de saúde global, é definida como definhamento (i.e. peso para altura entre < -2 e -3 escores Z dos Padrões de Crescimento Infantil da OMS) e/ou circunferência braquial (MUAC) maior ou igual a 115 mm e menor que 125 mm. De acordo com o Global Nutrition Report 2017, 8% ou 52 milhões de crianças com menos de cinco anos sofriam de desnutrição aguda em todo o mundo em 2016. O atraso no crescimento afetou 23% ou 155 milhões de crianças. Aproximadamente uma em cada 6 crianças menores de 5 anos no sul da Ásia sofreu de MAM em 2013 (ou seja, 17%). Essas crianças correm maior risco de desnutrição aguda grave (SAM) e têm um risco três vezes maior de mortalidade por doenças transmissíveis comuns do que crianças bem nutridas. Bangladesh tem uma das maiores cargas de desnutrição infantil do mundo. De acordo com a Pesquisa de Saúde Demográfica de Bangladesh (BDHS) 2014, a prevalência de nanismo entre crianças menores de cinco anos é de 36%, entre elas 12% sofrem de nanismo severo (escore Z de comprimento para a idade, LAZ <-3). Cerca de 15% das crianças são emaciadas (escore Z de peso por comprimento, WLZ <-2); mais de 2 milhões de crianças sofrem de MAM, enquanto 3% ou 450.000 crianças sofrem da forma mortal de SAM. A desnutrição custa a Bangladesh cerca de US$ 1 bilhão por ano. De acordo com as recomendações da OMS, lactentes e crianças de 6 a 59 meses com MAM precisam consumir alimentos ricos em nutrientes para atender às suas necessidades extras de ganho de peso e altura e recuperação funcional. Atualmente não há recomendações baseadas em evidências sobre a composição de alimentos suplementares usados ​​para tratar crianças com MAM. Em situações de escassez de alimentos, alimentos suplementares têm sido usados ​​para tratar crianças com desnutrição aguda moderada. As intervenções para abordar a desnutrição devem, portanto, incluir um forte componente de gestão da MAM. A prevenção da MAM deve ser levada em consideração na segurança alimentar e outras estratégias de desenvolvimento, pois a situação se torna crítica em populações onde a insegurança alimentar é desenfreada. A insegurança alimentar tornou-se uma preocupação mundial devido ao número crescente de pessoas que permanecem desnutridas totalizando 842 milhões, aproximadamente 12% da população mundial total. A partir da Pesquisa Nacional de Status de Micronutrientes em Bangladesh, realizada em 2011-12, a insegurança alimentar grave foi encontrada mais comumente em favelas (17,2%), em comparação com 12,3% em nível nacional, 12% em áreas rurais e 12,4% nas áreas urbanas do país. Como a insegurança alimentar não pode ser superada prontamente, é importante, portanto, desenvolver intervenções que dependam de ingredientes alimentares disponíveis localmente e sejam capazes de aproveitar o poder benéfico da microbiota intestinal no crescimento de bebês e crianças.

Um dos principais fatores que limitam o impacto da intervenção nutricional é a incapacidade das crianças desnutridas de aumentar sua ingestão para atender às crescentes demandas metabólicas. Em estudos colaborativos entre o icddr,b e o Gordon Lab da Universidade de Washington em St. Louis durante a fase inicial do Projeto Leite Materno, Microbiota e Imunidade (BMMI), aplicamos Random Forests, uma abordagem baseada em aprendizado de máquina, para conjuntos de dados bacterianos 16S rRNA (ácido ribonucléico ribossômico) gerados a partir de amostras fecais mensais obtidas de uma coorte de nascimento de crianças que vivem em uma favela urbana de Dhaka, Bangladesh. Essas crianças apresentaram crescimento consistentemente saudável (WLZ -0,32+0,98). Foram identificadas cepas bacterianas cuja representação proporcional define uma microbiota intestinal saudável à medida que se reúne durante os primeiros 2-3 anos pós-natais. Em um ensaio clínico randomizado no icddr,b de dois alimentos terapêuticos (alimentos terapêuticos importados prontos para uso [RUTF (Ready to Use Therapeutic Food), Plumpy'Nut] versus Khichuri e Halwa à base de arroz/lentilha preparados localmente) em Bangladesh crianças com desnutrição aguda grave (SAM), observou-se que a imaturidade da microbiota é incompleta e apenas transitoriamente melhorada, com crianças permanecendo acentuadamente atrofiadas e abaixo do peso durante todo o período de acompanhamento. Crianças de Bangladesh com MAM também exibiram imaturidade significativa da microbiota, embora menos grave do que crianças com SAM. A imaturidade da microbiota serve, portanto, como um potencial biomarcador para identificar bebês em risco de desnutrição e monitorar estratégias de tratamento e prevenção.

Pesquisadores desenvolveram recentemente alimentos terapêuticos prontos para uso usando ingredientes alimentares disponíveis localmente - arroz, lentilha e grão-de-bico que são culturalmente relevantes e aceitáveis. Eles descobriram por meio de um ECR duplo-cego (Ensaio controlado randomizado) que RUTF à base de grão de bico e lentilha de arroz eram tão eficazes quanto o RUTF comercial à base de amendoim e bem aceitos por crianças com SAM. Por meio de uma combinação dos estudos de RCT e translacionais clínicos mencionados acima, eles identificaram microbiota benéfica discriminatória por idade que promove o crescimento e ingredientes alimentares disponíveis localmente que apóiam a proliferação dessa microbiota benéfica. Além disso, resultados de estudos anteriores feitos com animais gnotobióticos no Centro de Ciência do Genoma da Universidade de Washington nos levaram a sugerir que uma combinação de ingredientes alimentares (grão-de-bico, farinha de soja, amendoim e banana verde) valerá a pena estudar com relação ao impacto da dieta sobre estimulando a proliferação da microbiota discriminatória do crescimento, bem como o custo e a sustentabilidade. Para avaliar o grau em que os resultados obtidos dos modelos gnotobióticos de camundongos e leitões se traduzem em humanos, os investigadores realizaram recentemente um estudo aprovado pelo RRC (Comitê de Revisão de Pesquisa) e ERC (Comitê de Revisão Etécnica), protocolo icddr,b (PR-16099) ' Ensaios clínicos de pré-prova de conceito para otimizar protótipos de alimentos complementares direcionados à microbiota (MDCF) por sua capacidade de reparar a imaturidade da microbiota e estabelecer sua aceitabilidade organoléptica 'e concluíram o estudo com sucesso. Este estudo foi projetado para testar os efeitos de três protótipos de MDCF produzidos localmente (MDCF-1, MDCF-2 e MDCF-3) e um RUSF à base de lentilha de arroz produzido localmente. O objetivo deste estudo piloto foi demonstrar uma pré-prova de conceito de que certos alimentos complementares teriam um efeito benéfico em crianças pequenas que sofrem de desnutrição aguda moderada, estimulando a proliferação de membros específicos da microbiota intestinal que são conhecidos por promover o crescimento efeito. Nesse estudo piloto, eles investigaram o escore Z da microbiota para a idade, bem como o impacto da proliferação de bons membros da microbiota intestinal em certos sistemas do corpo. Os resultados do ensaio piloto Pré-POC mostraram conclusivamente que um dos três alimentos complementares direcionados à microbiota, a saber (MDCF-2; composto por uma combinação de grão de bico, farinha de soja, amendoim, banana verde, óleo, açúcar e micronutrientes) foi associado com aumento dos níveis de certos aminoácidos, que têm um papel fundamental no desenvolvimento dos ossos longos, desenvolvimento do cérebro e aumento da produção de IGF-1. Isso foi feito usando a varredura SomaLogic baseada em aptâmeros de DNA de última geração. E os resultados sugerem que este candidato MDCF-2 é eficaz em estimular o crescimento de membros promotores de crescimento da microbiota intestinal, por exemplo, Faecalibacterium prausnitzii. Assim, o MDCF-2 promove a microbiota intestinal que induz o hormônio fator de crescimento semelhante à insulina 1 (IGF-1), que promove o crescimento e a remodelação óssea.

Com base nessa evidência, os investigadores gostariam agora de fazer um ensaio clínico muito maior usando o MDCF mais promissor, que é o MDCF-2, com o ponto final primário sendo o crescimento linear. Este ensaio seria em crianças com MAM primária.

Projeto de pesquisa e métodos Os investigadores conduzirão um ensaio clínico entre crianças de 12 a 18 meses de idade com MAM primário (WLZ <-2 a -3).

Desenho do estudo: Ensaio de intervenção controlado randomizado. Local do estudo: Este estudo será conduzido em Bauniabadh, clínica RADDA MCH-FP (Saúde Materna e Infantil - Planejamento Familiar) na área de Mirpur e Gabtoli da cidade de Dhaka, e possivelmente na Unidade de Nutrição Especial dirigida por Terre des Hommes em Kurigram.

Participantes do estudo: Os participantes do estudo serão crianças de 12 a 18 meses de ambos os sexos com MAM (WLZ <-2 a -3).

Triagem inicial e inscrição: As crianças serão triadas e inscritas por meio de pesquisas domiciliares por Assistentes de Pesquisa de Campo (FRAs) seguindo critérios de inclusão pré-especificados. Atendendo aos critérios de inclusão e mediante consentimento para participação no estudo dos pais ou responsáveis ​​legais, as crianças com a respectiva mãe/responsável serão matriculadas e alocadas aleatoriamente em um dos dois braços de acordo com números aleatórios gerados por computador. O código do tipo de dieta atribuído será guardado em envelopes opacos fechados para cada indivíduo, e somente será aberto quando o cuidador assinar o termo de consentimento.

Design de estudo:

Braço 1 - RUSF à base de lentilha de arroz (fundamental: padrão de referência de atendimento para MAM; com base no conhecimento de seus efeitos na microbiota intestinal ou na imaturidade da microbiota) Braço 2 - MDCF2 (Microbiota Directed Complementary Food 2) com quatro ingredientes alimentares complementares (fundamental : chumbo com evidências de ensaios clínicos pré-POC para otimizar protótipos de alimentos complementares direcionados à microbiota de chumbo por sua capacidade de reparar a imaturidade da microbiota e efeitos positivos no crescimento) Coleta de amostras fecais Amostras fecais semanais (1-2 g) serão coletadas dentro de 30 minutos de excreção (em casa e transportada de volta para o icddr,b) usando o transportador seco contendo nitrogênio líquido. As amostras serão armazenadas a -80°C antes de serem enviadas para análise da maturidade da microbiota no Gordon Lab (medida antes, durante e após a interrupção do tratamento com MDCF e RUSF) e avaliação baseada em PCR (reação em cadeia da polimerase) da carga de enteropatógenos nas fezes amostras (medidas antes e depois do tratamento com MDCF).

1-2 g de amostras fecais serão coletadas de cada criança no momento da inscrição, semanalmente durante o 1º mês de intervenção e 4 semanalmente durante o 2º e 3º mês de intervenção e no final da fase pós-intervenção. Considerando 62 participantes/braço do estudo, um total de 992 amostras fecais será coletado neste estudo. 2 g de amostras fecais serão coletadas das mães no momento da inscrição.

Coleta de amostras de urina Serão coletados 2 mL de amostras de urina de cada criança na inscrição, uma semana após a inscrição e mensalmente uma vez nas fases de intervenção e pós-intervenção. Assumindo 62 participantes/braço do estudo, um total de 744 amostras de urina serão coletadas neste estudo. 5 mL de amostras de urina serão coletados das mães no momento da inscrição.

Coleta de amostras de sangue Serão coletados 2 mL de amostras de sangue de cada criança antes da intervenção, no final do primeiro mês de intervenção e logo após a conclusão da intervenção. Um total de 372 amostras de plasma serão coletadas neste estudo. 5 mL de amostras de sangue serão coletadas das mães no momento da inscrição.

O estado nutricional materno está associado ao estado nutricional infantil, conforme demonstrado pelos resultados de nosso estudo MAL-ED (Malnutrição e Doenças Entéricas) em oito países. Além disso, fatores neonatais e outros fatores maternos foram determinantes precoces de menor comprimento para a idade, e sua contribuição permaneceu importante durante os primeiros 24 meses de vida.9 Os outros fatores maternos, acreditam os investigadores, incluiriam a microbiota intestinal materna, bem como o perfil de aminoácidos no sangue materno. As iniciativas para lidar com o atraso no crescimento infantil também devem considerar melhorias na composição dos alimentos complementares (ou seja, mais proteína) e estratégias para reduzir a exposição a patógenos intestinais. Como tal, eles registrarão a altura e o peso maternos. Para entender o estado biológico de nutrição da mãe, serão solicitadas amostras de fezes, sangue e urina da mãe. Essas amostras serão analisadas quanto à microbiota intestinal e proteômica, e os resultados serão correlacionados com os das crianças matriculadas.

Sessões de alimentação As crianças e mães/responsáveis ​​serão solicitadas a comparecer aos centros de nutrição estabelecidos nos locais, preferencialmente entre 9h e 11h e 15h e 17h no dia 1. Será solicitado às mães que não dêem alimentos e leite materno nas 2 horas anteriores ao horário das refeições observadas. Serão oferecidos à criança 25 gramas de MDCF ou RUSF conforme decidido por alocação aleatória em cada uma das duas refeições entre 9h-11h e 15h-17h. As mães serão solicitadas a alimentar seus filhos com as dietas pré-pesadas até que eles se recusem a comer, conforme descrito abaixo. Após uma pausa de dois minutos, a mesma dieta será oferecida uma segunda vez até que ele recuse novamente. Após uma segunda pausa de dois minutos, a dieta será oferecida uma terceira vez até ser recusada novamente. Após esta terceira recusa, o episódio de alimentação será considerado 'encerrado'. A duração da alimentação (excluindo os 'períodos de descanso' intermediários) será registrada pelo cronômetro, e a duração total da alimentação será anotada. Este episódio de alimentação durará no máximo 60 minutos. Volumes medidos de água pura também serão dados e a quantidade de água ingerida durante esse período de refeição de 60 minutos será medida. O episódio de alimentação ocorrerá sob a supervisão direta de pessoal de estudo treinado. As crianças serão consideradas como recusando mais ingestão se afastarem a cabeça da comida, chorarem, apertarem a boca ou cerrarem os dentes, ou ficarem agitadas, cuspirem fora a comida ou se recusem a engolir. A quantidade de MDCF/RUSF realmente ingerida será calculada subtraindo o restante da quantidade ofertada. Guardanapos pré-pesados ​​serão fornecidos; qualquer alimento que seja regurgitado, vomitado ou derramado será esfregado, pesado e subtraído da quantidade oferecida. Serão analisados ​​a quantidade de alimento consumido (g), energia (kcal) e categoria de aceitabilidade. As crianças matriculadas serão monitoradas diariamente pelos assistentes de pesquisa de campo para quaisquer possíveis efeitos colaterais/eventos adversos (por exemplo, erupção cutânea, urticária devido a alergia alimentar ou qualquer alteração significativa no estado clínico) por uma semana. Se quaisquer efeitos colaterais/eventos adversos forem observados, eles serão tratados de acordo com o padrão de atendimento. Um procedimento de produção padronizado será seguido para controlar a qualidade de RUSF e MDCF seguindo o protocolo padrão internacional. RUSF e MDCF serão preparados no laboratório de processamento de alimentos. A preparação dos alimentos em diferentes etapas, ou seja, torrefação, redução do tamanho das partículas, mistura homogênea e fornecimento aos centros de nutrição, será monitorada pelos investigadores do icddr,b. Os alimentos serão preparados todos os dias para garantir que não ocorram contaminações inesperadas e perdas de nutrientes durante o preparo. Embora os ingredientes dos alimentos crus sejam cuidadosamente adquiridos no mercado local e armazenados em quantidades razoáveis, os investigadores prepararão, dispensarão e alimentarão as crianças no mesmo dia em que o MDCF e o RUSF forem preparados. Cada criança receberá 25g da dieta duas vezes ao dia no centro de alimentação durante as primeiras 4 semanas. No mês seguinte, a criança receberá 25g da dieta no centro de alimentação e 25g adicionais serão fornecidos em um recipiente limpo para alimentar em casa. No terceiro mês, dois recipientes separados contendo 25g de ração serão fornecidos todos os dias para cada criança matriculada na casa do participante.

Neste estudo o estado nutricional será avaliado através da antropometria, comparando com os padrões de referência de crescimento da OMS. No início do estudo, serão buscadas informações sobre as características demográficas (riqueza das famílias, padrão de moradia, estrutura familiar e características dos pais etc.) modelo 728, Alemanha), comprimento (usando infantômetro, Seca, modelo 416, Alemanha) e circunferência do braço até o milímetro mais próximo (usando uma fita de inserção não elástica). A antropometria será feita de acordo com os procedimentos padrão e todas as medições serão feitas três vezes e a do meio será registrada.

Todas as intervenções em cada estudo serão administradas a crianças na clínica de saúde Mirpur/RADDA ou em Kurigram. Mães/cuidadores primários serão aconselhados a manter as práticas alimentares e de amamentação atuais de seus filhos.

Os investigadores concluirão a inscrição em 12 meses e o acompanhamento, bem como a análise de dados, em 6 meses adicionais. No entanto, este ensaio de MAM primário continuará em simultâneo com o outro ensaio clínico de Pós-SAM-MAM que terá um período de duração mais alargado.

Recrutamento, Triagem e Censo de Consentimento, triagem e inscrição dos participantes do estudo serão feitos nas áreas de captação dos locais na cidade de Dhaka e em Kurigram. Os pais das crianças que atendem aos critérios do MAM (para o estudo primário do MAM) serão abordados sobre a inscrição no estudo. Um assistente de pesquisa de campo explicará o estudo em detalhes, responderá a quaisquer perguntas dos pais e convidará os pais a inscrever a criança no estudo.

No início do estudo, serão buscadas informações sobre as características demográficas (riqueza das famílias, padrão de moradia, estrutura familiar e características dos pais etc.) (usando infantômetro) e circunferência do meio do braço até o milímetro mais próximo. Os participantes do estudo serão solicitados a vir diretamente ao centro de nutrição para terapia nutricional.

Preparação de MDCF 2 e RUSF Com base em combinações compatíveis de ingredientes alimentares complementares identificados no estudo Pré-POC descrito acima, MDCF2, bem como RUSF de lentilha de arroz, serão produzidos na instalação de processamento de alimentos icddr,b em Mirpur e em Kurigram (para ser estabelecido em ambos os locais) em quantidades suficientes para estudo clínico. As duas dietas serão combinadas em densidade de energia e conteúdo de micronutrientes. A densidade energética do MDCF é de 125 kcal/25 g (por porção), e a distribuição calórica é de 45 a 50 por cento de gordura e 8 a 10 por cento de proteína. Experimentos de desenvolvimento de protótipos de MDCF e avaliação das propriedades organolépticas foram realizados durante o ensaio clínico Pré-POC. Após o recebimento da matéria-prima (arroz/lentilha/grão-de-bico) serão retirados os materiais estranhos/grãos ou sementes (se houver) e, em seguida, em uma panela aberta, a matéria-prima será tostada. A temperatura será mantida em 120-130°C para assar. Geralmente leva de 8 a 10 minutos para assar 100g de cada matéria-prima. A agitação contínua é essencial para garantir a torrefação de sementes/grãos individuais. Após a conclusão da torrefação, ele será reservado para esfriar e, em seguida, será triturado. Finalmente, o pó pré-misturado pré-pesado será adicionado. O processamento da banana verde inteira para inclusão no MDCF2 é diferente dos demais ingredientes. A banana verde com casca será colocada em uma panela funda em água fervente (100°C-110°C) e fervida por cerca de 17-20 minutos até que estejam cozidas e macias. A casca da banana verde seria retirada e a parte branca comestível seria retirada e ralada em pequenos pedaços. Em seguida, eles serão levados para uma panela e deixados esfriar. Os pedacinhos de banana serão amassados ​​com colher/triturador manual. Os pesos de todos os outros ingredientes serão registrados. As receitas serão produzidas em pequenos lotes, misturando todos os ingredientes em um liquidificador elétrico. Uma pequena quantidade (1 por cento) de lecitina de soja deve ser adicionada à receita para melhorar a consistência e evitar a separação do óleo.

Antropometria A idade da criança será verificada mediante documentação (certidão de nascimento ou carteira de vacinação, se houver) ou relatório do responsável pela data de nascimento da criança. O comprimento será medido por um infantômetro sensível a 0,1 cm. O peso corporal será medido por uma balança sensível a 2g. Os escores Z de comprimento por idade (LAZ), peso por comprimento (WLZ) e peso por idade (WAZ) serão calculados seguindo os padrões de crescimento do Estudo Multicêntrico de Referência de Crescimento (MGRS) da OMS (Organização Mundial da Saúde). O edema será examinado pressionando a parte superior de ambos os pés por 3 segundos. A circunferência do braço médio (MUAC) será medida usando fita MUAC (Reino Unido). A padronização regular dos equipamentos de medição será feita usando padrões.

Análises de plasma e amostras fecais As amostras de plasma coletadas neste estudo serão enviadas ao laboratório do Dr. Jeffrey Gordon no Centro de Ciências do Genoma e Biologia de Sistemas da Universidade de Washington em St. Louis. Métodos avançados baseados em espectroscopia de massa e imunoensaio serão usados ​​para obter novos conhecimentos sobre o papel da imaturidade da microbiota intestinal e os efeitos da tentativa de reparo agudo dessa imaturidade com alimentos complementares direcionados à microbiota de chumbo (MDCF) em biomarcadores e mediadores de crescimento saudável . As comparações serão feitas com o grupo de controle (ou seja, aqueles que consomem o padrão RUSF de referência). Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa Alvo de Ultra Desempenho (UPLC-MS) e Espectrometria de Massa-Cromatografia Gasosa (GC-MS) serão usadas para perfilar analitos de interesse específico em amostras de plasma e/ou fezes, incluindo ácidos biliares e ácidos graxos de cadeia curta (SCFAs). ); marcadores da função mitocondrial (por exemplo, β-hidroxibutirato, acilcarnitinas/acilCoAs, intermediários do ciclo TCA); aminoácidos no soro mais amostras fecais [aminoácidos de cadeia ramificada, triptofano e metabólitos de triptofano relacionados ao crescimento e estado inflamatório, incluindo aqueles produzidos pelo metabolismo bacteriano do triptofano (por exemplo, derivados do ácido indol acético)]. Principais mediadores/biomarcadores de crescimento linear (por exemplo, hormônio do crescimento e IGF-1), utilização de energia (insulina, leptina) e biologia óssea [IL-6 (interleucina-6), osteoprotegerina, o peptídeo C-terminal do colágeno tipo I (CTX, um marcador de atividade osteoclástica/reabsorção óssea) e o propeptídeo amino-terminal do procolágeno tipo 1 (P1NP, um marcador de atividade osteoblástica/formação óssea)], e a inflamação sistêmica (CRP, AGP) serão quantificados usando Ensaios ELISA/Luminex. As proteínas no sangue serão identificadas usando a varredura SOMAlogic que permite a identificação de mais de 1300 proteínas diferentes. O estudo proteômico feito em amostras de plasma de crianças com SAM em nosso estudo Pré-POC anterior feito em Dhaka já demonstrou várias associações significativas e clinicamente relevantes entre certas proteínas e fenótipos clínicos usando a varredura SOMAlogic.

As informações coletadas serão usadas para selecionar amostras fecais humanas para transplante em animais livres de germes no Gordon Lab em St. Louis; esses animais, que serão alimentados com as dietas de seus doadores de microbiota humana, serão usados ​​para caracterizar ainda mais os mecanismos que ligam os protótipos de MDCF, a microbiota intestinal e a fisiologia/metabolismo do hospedeiro. Além disso, esses biomarcadores plasmáticos e fecais serão usados ​​para determinar que o MDCF promove o reparo da imaturidade da microbiota e melhora o estado biológico em crianças.

Cálculo do tamanho da amostra No ensaio pré-POC de diferentes MDCFs, o escore Z de peso por comprimento da linha de base das crianças que receberam MDCF2 foi de -2,2 e após um mês de suplementação foi de -1,7. Se for considerado o WLZ -2 na linha de base e -1,7 na linha final, SD agrupado (desvio padrão) como 0,53, então o tamanho da amostra é 49 em cada braço com poder de 80% e nível de significância de 5%.

Com 20% de atrito, 62 crianças deverão ser matriculadas em cada braço. Portanto, para o ensaio Primary MAM, 62 crianças receberão MDCF2 e 62 crianças receberão Rice-lentil RUSF.

Análise de dados Os dois grupos de crianças com MAM serão comparados na linha de base e em momentos diferentes. Todos os analitos mencionados na seção Análises de amostras de plasma e fezes serão comparados entre os grupos MDCF2 e RUSF.

Plano de monitoramento de segurança de dados (DSMP) As ferramentas de coleta de dados para este estudo incluirão formulários de relatório de caso, planilhas de laboratório e documentação de origem. A documentação de origem completa (visitas de estudo, relatórios de laboratório, etc.) será mantida para cada participante do estudo em prontuários de estudo individuais. Todas as amostras de laboratório, relatórios, coleta de dados do estudo e formulários administrativos serão identificados por um número codificado para manter a confidencialidade dos participantes do estudo e permitir o rastreamento ao longo do estudo.

Formulários, listas, diários de bordo, agendas e quaisquer outras listagens que vinculem os números de identificação (identificação) do participante do estudo a outras informações de identificação serão armazenados em um arquivo separado e bloqueado em uma área com acesso limitado. Todas as informações sobre os participantes do estudo serão mantidas em arquivos de computador protegidos por senha ou em arquivos trancados que podem ser acessados ​​apenas por pessoal autorizado do estudo. As informações do gráfico e as informações dos registros do estudo não serão divulgadas sem a permissão por escrito do(s) pai(s) do participante do estudo. No entanto, os registros podem ser revisados ​​por representantes do Comitê de Revisão de Pesquisa e do Comitê de Revisão Ética do icddr,b.

Os investigadores do estudo são responsáveis ​​por garantir a documentação completa e precisa para o estudo e para cada participante do estudo, incluindo: prontuários médicos, registros detalhando o progresso de cada participante do estudo através do estudo, relatórios laboratoriais, Formulários de Relato de Caso (CRFs), formulários de consentimento informado assinados, correspondência com IRB (Institucional Review Board), relatórios de eventos adversos e informações sobre a descontinuação do participante e conclusão do estudo. Todos os dados necessários serão registrados de forma clara e precisa nos CRFs por pessoal autorizado do estudo. Somente o pessoal designado para o local do estudo que recebeu treinamento apropriado registrará ou alterará os dados em um CRF. Os investigadores são responsáveis ​​pela obtenção dos dados e pela qualidade dos dados registrados nos CRFs. A entrada e o gerenciamento de dados serão realizados em icddr,b.

Garantia ética para a proteção dos direitos humanos O estudo será iniciado após a obtenção da aprovação do IRB pelo Comitê de Revisão de Pesquisa do icddr,b e pelo Comitê de Revisão Ética. Antes da inscrição no estudo, o consentimento informado por escrito será obtido do responsável legal dos participantes do estudo. A privacidade, o anonimato e a confidencialidade dos dados/informações que identificam os participantes do estudo serão rigorosamente mantidos. As identificações pessoais obtidas durante a inscrição e outros procedimentos do estudo serão mantidas trancadas a sete chaves. Ninguém além do pessoal do estudo terá acesso a informações de identificação pessoal e outras informações confidenciais.

Os riscos/eventos adversos esperados para este protocolo são aqueles relacionados à coleta de amostras de sangue, coleta de amostras fecais e alimentação de alimentos complementares direcionados à microbiota. Nenhum deles se qualifica como um evento adverso grave (SAE). Os eventos adversos esperados (EAEs) relacionados à coleta de sangue são os seguintes:

• desconforto
• dor
• introdução de infecção
• sangramento

• desmaio ou hematomas

  • Precauções serão tomadas para evitar a introdução de infecção, desinfetando o local da punção venosa e usando equipamento estéril
  • O risco de sangramento e hematomas será minimizado pela aplicação imediata de pressão após a punção venosa
  • O participante (criança) ficará sentado ou em decúbito dorsal durante as coletas de sangue para evitar lesões por desmaio

Todos os possíveis eventos adversos serão tratados adequadamente. Estes incluirão:

• Vômito
• Diarréia
• Erupção cutânea
• Urticária por alergia alimentar
• Distensão abdominal
• Dor abdominal Avaliação de eventos adversos Ambos os eventos adversos graves e não graves serão avaliados quanto à gravidade; relação com a participação no estudo; ações tomadas; e resultados. Todos os SAEs serão relatados ao ERC do icddr,b dentro de 24 horas após o conhecimento do local do evento, que por sua vez será distribuído ao patrocinador. Isso será feito por comunicação direta por telefone, fax ou e-mail.

Cada categoria para avaliação de EA será codificada de acordo com os seguintes sistemas de classificação:

Gravidade:

1. Suave
2. Moderado
3. Forte

Relação com a participação no estudo:

1. Definitivamente relacionado: Associação temporal clara, nenhuma outra causa possível
2. Possivelmente relacionado: Associação temporal menos clara, outras causas possíveis
3. Não relacionado: independente do estudo, existe evidência de que o evento está definitivamente relacionado a outra etiologia

Ações:

Nenhum Terapia corretiva (mais de uma dose de medicamento necessária) Descontinuação permanente da participação no estudo Hospitalização Outro uso de animais Não aplicável Acordos de colaboração Este projeto é um esforço colaborativo entre os pesquisadores da Escola de Medicina da Universidade de Washington e do Centro Internacional de Pesquisa de Doenças Diarreicas , Bangladesh (icddr,b). O trabalho clínico e as atividades de campo serão realizados em Dhaka, Bangladesh, sob a supervisão direta do pesquisador principal, enquanto as análises laboratoriais serão realizadas no Gordon Lab da Universidade de Washington em St. Louis. Todas as unidades de pesquisa e os investigadores colaboradores têm um longo histórico de colaborações internacionais. Todos os investigadores se comunicaram durante o desenvolvimento deste projeto e estão comprometidos com sua implementação bem-sucedida.

Instalações Disponíveis O icddr,b possui um Laboratório de Processamento de Alimentos bem equipado que facilitará a preparação de receitas dietéticas. Vários escritórios de projetos estão localizados em Mirpur. Mais importante, um excelente relacionamento foi estabelecido com a comunidade. A elite da comunidade e os mais velhos são convidados todos os anos para uma reunião de divulgação para que tenham conhecimento das pesquisas que estão sendo realizadas.

Centro de Ciências do Genoma, Universidade de Washington em St. Louis: