Ensayo clínico comunitario con alimentos complementarios dirigidos por la microbiota (MDCF) elaborados con ingredientes alimentarios disponibles localmente para el tratamiento de niños con desnutrición aguda moderada primaria

Fondo:

La desnutrición aguda moderada (MAM), un importante problema de salud mundial, se define como emaciación (es decir, peso para la estatura entre < -2 y -3 puntajes Z de los patrones de crecimiento infantil de la OMS) y/o circunferencia del brazo medio superior (MUAC) mayor o igual a 115 mm y menor a 125 mm. Según el Informe de Nutrición Global 2017, el 8% o 52 millones de niños menores de cinco años sufrían desnutrición aguda en todo el mundo en 2016. El retraso en el crecimiento afectó al 23% o 155 millones de niños. Aproximadamente uno de cada 6 niños menores de 5 años en el sur de Asia sufrió MAM en 2013 (es decir, 17%). Estos niños corren un mayor riesgo de desnutrición aguda severa (SAM) y tienen un riesgo tres veces mayor de mortalidad por enfermedades transmisibles comunes que los niños bien alimentados. Bangladesh tiene una de las cargas de desnutrición infantil más altas del mundo. Según la Encuesta de salud demográfica de Bangladesh (BDHS) de 2014, la prevalencia del retraso del crecimiento entre los niños menores de cinco años es del 36 %, de los cuales el 12 % sufre retraso del crecimiento grave (puntuación Z de longitud para la edad, LAZ <-3). Alrededor del 15 % de los niños tienen emaciación (puntuación Z de peso por talla, WLZ <-2); más de 2 millones de niños sufren de MAM, mientras que el 3% o 450.000 niños sufren de la forma mortal de SAM. La desnutrición le cuesta a Bangladesh un estimado de mil millones de dólares al año. De acuerdo con las recomendaciones de la OMS, los bebés y niños de 6 a 59 meses con MAM necesitan consumir alimentos ricos en nutrientes para satisfacer sus necesidades adicionales de aumento de peso y altura y recuperación funcional. Actualmente no existen recomendaciones basadas en evidencia sobre la composición de los alimentos complementarios utilizados para tratar a los niños con MAM. En situaciones de escasez de alimentos, se han utilizado alimentos complementarios para tratar a niños con desnutrición aguda moderada. Por lo tanto, las intervenciones para abordar la desnutrición deben incluir un fuerte componente de gestión de MAM. La prevención de MAM debe tenerse en cuenta en la seguridad alimentaria y otras estrategias de desarrollo, ya que la situación se vuelve crítica en las poblaciones donde la inseguridad alimentaria es rampante. La inseguridad alimentaria se ha convertido en una preocupación mundial debido al creciente número de personas que permanecen desnutridas que ascienden a 842 millones, aproximadamente el 12% de la población mundial total. Según la Encuesta nacional sobre el estado de los micronutrientes en Bangladesh que llevamos a cabo en 2011-12, la inseguridad alimentaria grave se encontró con mayor frecuencia en los asentamientos marginales (17,2 %), en comparación con el 12,3 % a nivel nacional, el 12 % en las zonas rurales y el 12,4 % en las zonas urbanas del país. Dado que la inseguridad alimentaria no se puede superar fácilmente, es importante desarrollar intervenciones que dependan de los ingredientes alimentarios disponibles localmente y que puedan aprovechar el poder beneficioso de la microbiota intestinal en el crecimiento de bebés y niños.

Uno de los principales factores que limitan el impacto de la intervención nutricional es la incapacidad de los niños desnutridos de aumentar su ingesta para satisfacer las mayores demandas metabólicas. En estudios colaborativos entre icddr,b y el Laboratorio Gordon en la Universidad de Washington en St. Louis durante la Fase de inicio rápido del Proyecto Leche Materna, Microbiota e Inmunidad (BMMI), aplicamos Random Forests, un enfoque basado en el aprendizaje automático, para Conjuntos de datos de ARNr bacteriano 16S (ácido ribonucleico ribosómico) generados a partir de muestras fecales mensuales obtenidas de una cohorte de nacimiento de niños que viven en un barrio marginal urbano de Dhaka, Bangladesh. Estos niños exhibieron un crecimiento consistentemente saludable (WLZ -0.32+0.98). Se identificaron cepas bacterianas cuya representación proporcional define una microbiota intestinal saludable a medida que se ensambla durante los primeros 2-3 años posnatales. En un ensayo clínico aleatorizado en icddr,b de dos alimentos terapéuticos (alimentos terapéuticos listos para usar importados [RUTF (Ready to Use Therapeutic Food), Plumpy'Nut] versus Khichuri y Halwa a base de arroz/lenteja preparados localmente) en Bangladesh niños con desnutrición aguda severa (SAM), se observó que la inmadurez de la microbiota es incompleta y solo mejora transitoriamente, y los niños permanecen marcadamente atrofiados y con bajo peso durante todo el período de seguimiento. Los niños de Bangladesh con MAM también exhibieron una importante inmadurez de la microbiota, aunque menos grave que los niños con SAM. Por lo tanto, la inmadurez de la microbiota sirve como un biomarcador potencial para identificar a los bebés en riesgo de desnutrición y para monitorear las estrategias de tratamiento y prevención.

Los investigadores desarrollaron recientemente alimentos terapéuticos listos para usar utilizando ingredientes alimentarios disponibles localmente: arroz, lentejas y garbanzos que son culturalmente relevantes y aceptables. Descubrieron a través de un RCT doble ciego (ensayo controlado aleatorio) que los RUTF a base de garbanzos y lentejas de arroz eran tan efectivos como los RUTF comerciales a base de maní y bien aceptados por los niños con SAM. A través de una combinación de los ECA mencionados anteriormente y los estudios clínicos traslacionales, han identificado una microbiota beneficiosa discriminatoria por edad que promueve el crecimiento e ingredientes alimentarios disponibles localmente que respaldan la proliferación de esta microbiota beneficiosa. Además, los resultados de estudios anteriores realizados en animales gnotobióticos en el Centro de Ciencias del Genoma de la Universidad de Washington nos han llevado a sugerir que valdrá la pena estudiar una combinación de ingredientes alimentarios (garbanzo, harina de soja, maní y plátano verde) con respecto al impacto de la dieta en estimular la proliferación de microbiota que discrimina el crecimiento, así como el costo y la sostenibilidad. Para evaluar el grado en que los resultados obtenidos de los modelos de ratones y lechones gnotobióticos se traducen en humanos, los investigadores realizaron recientemente un estudio aprobado por el RRC (Research Review Committee) y el ERC (Ethecial Review Committee), protocolo icddr,b (PR-16099). Los ensayos clínicos previos a la prueba de concepto para optimizar los prototipos de alimentos complementarios dirigidos por microbiota (MDCF) de plomo por su capacidad para reparar la inmadurez de la microbiota y establecer su aceptabilidad organoléptica 'y completaron con éxito el estudio. Este estudio fue diseñado para probar los efectos de tres prototipos MDCF producidos localmente (MDCF-1, MDCF-2 y MDCF-3) y un RUSF a base de arroz y lentejas producido localmente. El objetivo de este estudio piloto fue demostrar una prueba previa de concepto de que ciertos alimentos complementarios tendrían un efecto beneficioso en los niños pequeños que sufren de desnutrición aguda moderada al estimular la proliferación de miembros particulares de la microbiota intestinal que son conocidos por promover el crecimiento. efecto. En ese estudio piloto, investigaron la puntuación Z de la microbiota para la edad, así como el impacto de la proliferación de buenos miembros de la microbiota intestinal en ciertos sistemas corporales. Los resultados de la prueba piloto Pre-POC mostraron de manera concluyente que uno de los tres alimentos complementarios dirigidos a la microbiota, a saber (MDCF-2; compuesto por una combinación de garbanzo, harina de soya, maní, plátano verde, aceite, azúcar y micronutrientes) estaba asociado con aumento de los niveles de ciertos aminoácidos, que tienen un papel clave en el desarrollo de los huesos largos, el desarrollo del cerebro y el aumento de la producción de IGF-1. Esto se hizo utilizando el escaneo SomaLogic basado en aptámeros de ADN de última generación. Y los resultados sugieren que este MDCF-2 candidato es eficaz para estimular el crecimiento de los miembros promotores del crecimiento de la microbiota intestinal, por ejemplo, Faecalibacterium prausnitzii. Por lo tanto, MDCF-2 promueve la microbiota intestinal que induce la hormona factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF-1), que promueve el crecimiento y la remodelación ósea.

Con base en esta evidencia, a los investigadores ahora les gustaría hacer un ensayo clínico mucho más grande usando el MDCF más prometedor que es MDCF-2 con el punto final primario siendo el crecimiento lineal. Este ensayo sería en niños con MAM primario.

Diseño y métodos de investigación Los investigadores realizarán un ensayo clínico en niños de 12 a 18 meses de edad con MAM primaria (WLZ <-2 a -3).

Diseño del estudio: ensayo de intervención controlado aleatorizado. Sitio de estudio: Este estudio se llevará a cabo en Bauniabadh, clínica RADDA MCH-FP (Salud Materna e Infantil - Planificación Familiar) en el área de Mirpur y Gabtoli de la ciudad de Dhaka, y posiblemente en la Unidad de Nutrición Especial dirigida por Terre des Hommes en Kurigram.

Participantes del estudio: Los participantes del estudio serán niños de 12 a 18 meses de edad de cualquier sexo con MAM (WLZ <-2 a -3).

Selección inicial e inscripción: Los asistentes de investigación de campo (FRA, por sus siglas en inglés) evaluarán e inscribirán a los niños mediante encuestas domiciliarias siguiendo criterios de inclusión preespecificados. Al cumplir con los criterios de inscripción y al recibir el consentimiento para la participación en el estudio de los padres o tutores legales, los niños con la respectiva madre/cuidador serán inscritos y asignados aleatoriamente a uno de los dos brazos de acuerdo con números aleatorios generados por computadora. El código del tipo de dieta asignado se mantendrá en sobres opacos cerrados para cada individuo, y se abrirá solo cuando el cuidador firme el formulario de consentimiento.

Diseño del estudio:

Grupo 1 - RUSF a base de arroz y lentejas (justificación: estándar de atención de referencia para MAM; basado en el conocimiento de sus efectos sobre la microbiota intestinal o la inmadurez de la microbiota) Grupo 2 - MDCF2 (alimento complementario dirigido a la microbiota 2) con cuatro ingredientes alimentarios complementarios (justificación : plomo con evidencia de ensayos clínicos Pre-POC para optimizar los prototipos de alimentos complementarios dirigidos a la microbiota principal por su capacidad para reparar la inmadurez de la microbiota y los efectos positivos en el crecimiento) Recolección de muestras fecales Se recolectarán muestras fecales semanales (1-2 g) dentro de los 30 minutos posteriores a la excreción (en casa y transportada de regreso al icddr,b) usando el nitrógeno líquido que contiene el cargador seco. Las muestras se almacenarán a -80 °C antes de enviarlas al laboratorio de Gordon. Análisis de la madurez de la microbiota (medida antes, durante y después del cese del tratamiento con MDCF y RUSF) y evaluación basada en PCR (reacción en cadena de la polimerasa) de la carga de enteropatógenos en las heces. muestras (medidas antes y después del tratamiento con MDCF).

Se recolectarán 1-2 g de muestras fecales de cada niño en el momento de la inscripción, semanalmente durante el primer mes de intervención y 4 semanales durante el segundo y tercer mes de intervención y al final de la fase posterior a la intervención. Suponiendo 62 participantes del estudio por brazo, se recolectará un total de 992 muestras fecales en este estudio. Se recolectarán 2 g de muestras fecales de las madres en el momento de la inscripción.

Recolección de muestras de orina Se recolectarán 2 ml de muestras de orina de cada niño en el momento de la inscripción, una semana después de la inscripción y una vez al mes en las fases de intervención y posintervención. Suponiendo 62 participantes del estudio por brazo, se recolectará un total de 744 muestras de orina en este estudio. Se recolectarán 5 ml de muestras de orina de las madres en el momento de la inscripción.

Recolección de muestras de sangre Se recolectarán 2 ml de muestras de sangre de cada niño antes de la intervención, al final del primer mes de intervención y justo después de que se complete la intervención. En este estudio se recogerán un total de 372 muestras de plasma. Se recolectarán 5 ml de muestras de sangre de las madres en el momento de la inscripción.

El estado nutricional de la madre está asociado con el estado nutricional del niño, como lo demuestran los resultados de nuestro estudio MAL-ED (desnutrición y enfermedades entéricas) de ocho países. Además, los factores neonatales y maternos fueron determinantes tempranos de una menor talla para la edad, y su contribución siguió siendo importante durante los primeros 24 meses de vida.9 Los otros factores maternos, creen los investigadores, incluirían la microbiota intestinal materna, así como el perfil de aminoácidos en la sangre materna. Las iniciativas para abordar el retraso en el crecimiento infantil también deben considerar mejoras en la composición de los alimentos complementarios (es decir, más proteínas) y estrategias para reducir la exposición a patógenos intestinales. Como tal, registrarán la altura y el peso materno. Para conocer el estado biológico de nutrición de la madre, se le pedirá a la madre muestras de enrolamiento de heces, sangre y orina. Estas muestras se analizarán en busca de microbiota intestinal y proteómica, y los resultados se correlacionarán con los de los niños inscritos.

Sesiones de alimentación Se solicitará a los niños y madres/cuidadores que acudan a los centros de nutrición establecidos en los sitios preferentemente entre las 9-11 am y las 3-5 pm el día 1. Se solicitará a las madres que no den ningún alimento ni leche materna en las 2 horas anteriores a la hora de comida observada. Al niño se le ofrecerán 25 gramos de MDCF o RUSF según se decida por asignación aleatoria en cada una de las dos comidas entre las 9-11 am y las 3-5 pm. Se les pedirá a las madres que alimenten con cuchara las dietas prepesadas a sus hijos hasta que se nieguen a comer, como se describe a continuación. Después de una pausa de dos minutos, se le ofrecerá la misma dieta por segunda vez hasta que vuelva a negarse. Después de una segunda pausa de dos minutos, se ofrecerá la dieta por tercera vez hasta que se rechace nuevamente. Después de este tercer rechazo, el episodio de alimentación se considerará como 'terminado'. La duración de la alimentación (excluyendo los 'períodos de descanso' intermedios) se registrará con un cronómetro y se anotará la duración total de la alimentación. Este episodio de alimentación durará un máximo de 60 minutos. También se darán volúmenes medidos de agua corriente y se medirá la cantidad de agua tomada durante este período de comida de 60 minutos. El episodio de alimentación tendrá lugar bajo la supervisión directa de personal de estudio capacitado. Se considerará que los niños se niegan a seguir comiendo si apartan la cabeza de la comida, lloran, se tapan la boca o rechinan los dientes, o se agitan, escupen la comida o se niegan a tragar. La cantidad de MDCF/RUSF realmente ingerida se calculará restando el sobrante de la cantidad ofrecida. Se proporcionarán servilletas previamente pesadas; cualquier comida que sea regurgitada, vomitada o derramada será limpiada, pesada y restada de la cantidad ofrecida. Se analizará la cantidad de alimento consumido (g), energía (kcal) y categoría de aceptabilidad. Los asistentes de investigación de campo monitorearán a los niños inscritos diariamente para detectar posibles efectos secundarios/eventos adversos (p. exantema, urticaria por alergia alimentaria o cualquier cambio significativo en el estado clínico) durante una semana. Si se observan efectos secundarios/eventos adversos, se tratarán de acuerdo con el estándar de atención. Se seguirá un procedimiento de producción estandarizado para controlar la calidad de RUSF y MDCF siguiendo el protocolo estándar internacional. RUSF y MDCF se prepararán en el laboratorio de procesamiento de alimentos. Los investigadores del icddr,b supervisarán la preparación de los alimentos en diferentes pasos, es decir, el tostado, la reducción del tamaño de las partículas, la mezcla homogénea y el suministro a los centros de nutrición. Los alimentos se prepararán todos los días para garantizar que no se produzcan contaminaciones inesperadas ni pérdidas de nutrientes durante la preparación. Aunque los ingredientes crudos de los alimentos se obtendrán con mucho cuidado en el mercado local y se almacenarán en cantidades razonables, los investigadores prepararán, dispensarán y alimentarán a los niños el mismo día que se preparan el MDCF y el RUSF. A cada niño se le ofrecerán 25 g de la dieta dos veces al día en el centro de alimentación durante las primeras 4 semanas. En el mes siguiente, al niño se le ofrecerán 25 g de la dieta en el centro de alimentación y se le proporcionarán 25 g adicionales en un recipiente limpio para que se alimente en casa. En el tercer mes, se proporcionarán todos los días dos recipientes separados que contienen 25 g de dieta a cada niño inscrito en el hogar del participante.

En este estudio se evaluará el estado nutricional a través de la antropometría, comparándolo con los patrones de referencia de crecimiento de la OMS. Al comienzo del estudio, se buscará información sobre las características demográficas (riqueza de las familias, nivel de vivienda, estructura familiar y características de los padres, etc.), y las FRA registrarán el peso de los niños mediante una balanza digital con una precisión de 2 g (Seca, modelo 728, Alemania), longitud (usando infantómetro, Seca, modelo 416, Alemania) y circunferencia media del brazo al mm más cercano (usando una cinta de inserción no elástica). La antropometría se realizará de acuerdo con los procedimientos estándar y todas las medidas se tomarán tres veces y se registrará la del medio.

Todas las intervenciones en cada estudio se administrarán a los niños en la clínica de salud de Mirpur/clínica RADDA o en Kurigram. Se recomendará a las madres/cuidadores principales que mantengan las prácticas dietéticas y de lactancia actuales de sus hijos.

Los investigadores completarán la inscripción en un plazo de 12 meses y el seguimiento y el análisis de datos en un plazo adicional de 6 meses. Sin embargo, este ensayo sobre MAM primario continuará de forma simultánea con el otro ensayo clínico sobre Post SAM-MAM que tendrá una duración mayor.

Reclutamiento, selección y consentimiento El censo, la selección y la inscripción de los participantes del estudio se realizarán en las áreas de captación de los sitios en la ciudad de Dhaka y en Kurigram. Se contactará a los padres de los niños que cumplan con los criterios de MAM (para el ensayo MAM primario) acerca de la inscripción en el estudio. Un asistente de investigación de campo explicará el estudio en detalle, responderá cualquier pregunta de los padres e invitará a los padres a inscribir al niño en el estudio.

Al comienzo del estudio, se buscará información sobre las características demográficas (riqueza de las familias, nivel de vivienda, estructura familiar y características de los padres, etc.), y las FRA registrarán el peso de los niños mediante una balanza digital con precisión de 2 g, longitud (usando infantómetro), y la circunferencia de la mitad superior del brazo al mm más cercano. A los participantes del estudio se les pedirá que vayan directamente al centro de nutrición para recibir terapia nutricional.

Preparación de MDCF 2 y RUSF Basado en combinaciones compatibles de ingredientes alimentarios complementarios identificados en el estudio Pre-POC descrito anteriormente, MDCF2 y arroz-lenteja RUSF se producirán en las instalaciones de procesamiento de alimentos icddr,b en Mirpur y en Kurigram (para establecerse en ambos lugares) en cantidades suficientes para el estudio clínico. Las dos dietas se igualarán en densidad energética y contenido de micronutrientes. La densidad energética de MDCF es de 125 kcal/25 g (por ración), y la distribución calórica está dirigida a ser 45-50 por ciento de grasa y 8-10 por ciento de proteína. Los experimentos en el desarrollo de los prototipos de MDCF y la evaluación de las propiedades organolépticas se han realizado durante el ensayo clínico Pre-POC. Después de recibir las materias primas (arroz/lenteja/garbanzos) se sacarán los materiales extraños/granos o semillas (si las hay) y luego en una sartén abierta se tostarán las materias primas. La temperatura se mantendrá a 120-130°C para el tostado. Por lo general, toma de 8 a 10 minutos tostar 100 g de cada materia prima. La agitación continua es esencial para asegurar el tostado de semillas/granos individuales. Después de completar el tostado, se mantendrá a un lado para que se enfríe y luego se muele. Finalmente se agregará el polvo de premezcla previamente pesado. El procesamiento del banano verde entero para su inclusión en MDCF2 es diferente al de los demás ingredientes. Los plátanos verdes con piel se colocarán en una olla honda en agua hirviendo (100°C-110°C) y se hervirán durante unos 17-20 minutos hasta que estén cocidos y tiernos. Al plátano verde se le quitará la piel y se tomará la parte blanca comestible y se rallará en trozos pequeños. Luego se tomarán en una olla y se dejarán enfriar. Los pequeños trozos de plátano se aplastarán con una cuchara/trituradora de mano. Se registrarán los pesos de todos los demás ingredientes. Las recetas se producirán en lotes pequeños mezclando todos los ingredientes en una licuadora eléctrica. Se agregará una pequeña cantidad (1 por ciento) de lecitina de soya a la receta para mejorar la consistencia y evitar la separación del aceite.

Antropometría La edad del niño se verificará con la documentación (certificado de nacimiento o tarjeta de vacunación, si está disponible) o el informe del cuidador sobre la fecha de nacimiento del niño. La longitud se medirá con un infantómetro sensible a 0,1 cm. El peso corporal se medirá con una balanza sensible a 2g. Las puntuaciones Z de longitud para la edad (LAZ), peso para la longitud (WLZ) y peso para la edad (WAZ) se calcularán siguiendo los estándares de crecimiento del Estudio de Referencia de Crecimiento Multicéntrico (MGRS) de la OMS (Organización Mundial de la Salud). El edema se examinará presionando la parte superior de ambos pies durante 3 segundos. La circunferencia del brazo medio superior (MUAC) se medirá con cinta MUAC (Reino Unido). La estandarización periódica de los equipos de medición se realizará mediante estándares.

Análisis de muestras de plasma y heces Las muestras de plasma recolectadas en este ensayo se enviarán al laboratorio del Dr. Jeffrey Gordon en el Centro de Ciencias del Genoma y Biología de Sistemas de la Universidad de Washington en St. Louis. Se utilizarán métodos avanzados basados ​​en inmunoensayos y espectroscopia de masas para obtener nuevos conocimientos sobre el papel de la inmadurez de la microbiota intestinal y los efectos de intentar la reparación aguda de esta inmadurez con alimentos complementarios dirigidos por microbiota de plomo (MDCF) en biomarcadores y mediadores de un crecimiento saludable . Las comparaciones se realizarán con el grupo de control (es decir, aquellos que consumen el estándar RUSF de referencia). La cromatografía líquida-espectrometría de masas de ultra rendimiento (UPLC-MS) y la cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS) se utilizarán para perfilar analitos de interés específico en plasma y/o muestras fecales, incluidos los ácidos biliares y los ácidos grasos de cadena corta (SCFA). ); marcadores de la función mitocondrial (p. ej., β-hidroxibutirato, acilcarnitinas/acilCoA, intermediarios del ciclo TCA); aminoácidos en muestras de suero y heces [aminoácidos de cadena ramificada, triptófano y metabolitos de triptófano relacionados con el crecimiento y el estado inflamatorio, incluidos los producidos por el metabolismo bacteriano del triptófano (p. derivados del ácido indol acético)]. Mediadores/biomarcadores clave del crecimiento lineal (p. ej., hormona del crecimiento e IGF-1), utilización de energía (insulina, leptina) y biología ósea [IL-6 (interleucina-6), osteoprotegerina, el péptido C-terminal del colágeno tipo I (CTX, un marcador de la actividad de los osteoclastos/resorción ósea) y el propéptido amino-terminal del procolágeno tipo 1 (P1NP, un marcador de la actividad de los osteoblastos/formación ósea)] y la inflamación sistémica (CRP, AGP) se cuantificarán utilizando Ensayos ELISA/Luminex. Las proteínas en la sangre se identificarán mediante el escaneo SOMAlogic que permite la identificación de más de 1300 proteínas diferentes. El estudio proteómico realizado en muestras de plasma de niños con SAM en nuestro ensayo Pre-POC anterior realizado en Dhaka ya ha demostrado una serie de asociaciones significativas y clínicamente relevantes entre ciertas proteínas y fenotipos clínicos utilizando el escaneo SOMAlogic.

La información recopilada se utilizará para seleccionar muestras fecales humanas para trasplantarlas a animales libres de gérmenes en el Laboratorio Gordon en St. Louis; estos animales, que serán alimentados con las dietas de sus donantes de microbiota humana, se utilizarán para caracterizar aún más los mecanismos que vinculan los prototipos de MDCF, la microbiota intestinal y la fisiología/metabolismo del huésped. Además, estos biomarcadores plasmáticos y fecales se utilizarán para determinar que MDCF promueve la reparación de la inmadurez de la microbiota y mejora el estado biológico en los niños.

Cálculo del tamaño de la muestra En el ensayo pre-POC de diferentes MDCF, la puntuación Z de peso para la talla inicial de los niños que recibieron MDCF2 fue de -2,2 y después de un mes de suplementación fue de -1,7. Si se considera WLZ -2 al inicio y -1,7 al final, SD (desviación estándar) agrupada como 0,53, entonces el tamaño de la muestra es 49 en cada brazo con una potencia del 80 % y un nivel de significación del 5 %.

Con una deserción del 20 %, se requerirá la inscripción de 62 niños en cada brazo. Por lo tanto, para el ensayo MAM primario, 62 niños recibirán MDCF2 y 62 niños recibirán Rice-lentil RUSF.

Análisis de datos Los dos grupos de niños con MAM se compararán al inicio y en diferentes momentos. Todos los analitos mencionados en la sección Análisis de plasma y muestras fecales se compararán entre los grupos MDCF2 y RUSF.

Plan de monitoreo de seguridad de datos (DSMP) Las herramientas de recopilación de datos para este estudio incluirán formularios de informes de casos, hojas de trabajo de laboratorio y documentación fuente. La documentación fuente completa (visitas de estudio, informes de laboratorio, etc.) se mantendrá para cada participante del estudio en tablas de estudio individuales. Todas las muestras de laboratorio, los informes, la recopilación de datos del estudio y los formularios administrativos se identificarán mediante un número codificado para mantener la confidencialidad de los participantes del estudio y permitir el seguimiento durante todo el estudio.

Los formularios, listas, libros de registro, libros de citas y cualquier otra lista que vincule los números de identificación (identificación) de los participantes del estudio con otra información de identificación se almacenarán en un archivo separado y bajo llave en un área con acceso limitado. Toda la información sobre los participantes del estudio se mantendrá en archivos informáticos protegidos con contraseña o en archivadores cerrados a los que solo puede acceder el personal autorizado del estudio. La información del gráfico y la información de los registros del estudio no se divulgarán sin el permiso por escrito de los padres del participante del estudio. Sin embargo, los registros pueden ser revisados ​​por representantes del Comité de Revisión de Investigación y el Comité de Revisión Ética de icddr,b.

Los investigadores del estudio son responsables de garantizar la documentación completa y precisa para el estudio y para cada participante del estudio, incluidos: registros médicos, registros que detallan el progreso de cada participante del estudio a lo largo del estudio, informes de laboratorio, formularios de informes de casos (CRF), formularios de consentimiento informado firmados, correspondencia con el IRB (Junta de Revisión Institucional), informes de eventos adversos e información sobre la interrupción del participante y la finalización del estudio. Todos los datos requeridos serán registrados de manera clara y precisa en los CRF por personal autorizado del estudio. Solo el personal designado del sitio de estudio que haya recibido la capacitación adecuada registrará o cambiará los datos en un CRF. Los investigadores son responsables de obtener los datos y de la calidad de los datos registrados en los CRF. La entrada y gestión de datos se realizará en icddr,b.

Garantía ética para la protección de los derechos humanos El estudio se iniciará después de obtener la aprobación del IRB por parte del Comité de revisión de investigación y el Comité de revisión ética de icddr,b. Antes de la inscripción en el estudio, se obtendrá el consentimiento informado por escrito del tutor legal de los participantes del estudio. Se mantendrá estrictamente la privacidad, el anonimato y la confidencialidad de los datos/información que identifique a los participantes del estudio. Las identificaciones personales tomadas durante la inscripción y otros procedimientos de estudio se mantendrán bajo llave. Nadie más que el personal del estudio tendrá acceso a la información de identificación personal y otra información sensible.

Los riesgos/eventos adversos esperados para este protocolo son aquellos relacionados con la recolección de muestras de sangre, la recolección de muestras fecales y la alimentación con alimentos complementarios dirigidos a la microbiota. Ninguno de estos califica como un evento adverso grave (SAE). Los eventos adversos esperados (EAE) relacionados con la extracción de sangre son los siguientes:

• incomodidad
• dolor
• introducción de la infección
• sangrado

• desmayo o moretones

  • Se tomarán precauciones para evitar la introducción de infecciones desinfectando el sitio de la venopunción y usando equipo estéril.
  • El riesgo de sangrado y hematomas se minimizará mediante la aplicación inmediata de presión después de la venopunción.
  • El participante (niño) estará sentado o en posición supina durante las extracciones de sangre para evitar lesiones por desmayo

Todos los posibles eventos adversos serán tratados adecuadamente. Estos incluirán:

• vómitos
• Diarrea
• Erupción cutanea
• Urticaria por alergia alimentaria
• Distensión abdominal
• Dolor abdominal Evaluación de eventos adversos Se evaluará la gravedad de los eventos adversos graves y no graves; relación con la participación en el estudio; acciones tomadas; y resultados. Todos los SAE se informarán al ERC de icddr,b dentro de las 24 horas posteriores al conocimiento del sitio del evento que, a su vez, se distribuirá al patrocinador. Esto se hará mediante comunicación telefónica directa, fax o correo electrónico.

Cada categoría para la evaluación AE se codificará de acuerdo con los siguientes sistemas de calificación:

Gravedad:

1. Leve
2. Moderado
3. Severo

Relación con la participación en el estudio:

1. Definitivamente relacionado: asociación temporal clara, sin otra causa posible
2. Posiblemente relacionado: asociación temporal menos clara, otras causas posibles
3. No relacionado: Independientemente del estudio, existe evidencia de que el evento está definitivamente relacionado con otra etiología.

Comportamiento:

Ninguno Terapia de recuperación (se requiere más de una dosis del medicamento) Suspensión permanente de la participación en el estudio Hospitalización Otro uso de animales No corresponde Acuerdos de colaboración Este proyecto es un esfuerzo de colaboración entre los investigadores de la Facultad de Medicina de la Universidad de Washington y el Centro Internacional para la Investigación de Enfermedades Diarreicas , Bangladés (icddr,b). El trabajo clínico y las actividades de campo se llevarán a cabo en Dhaka, Bangladesh, bajo la supervisión directa del Investigador Principal, mientras que los análisis de laboratorio se realizarán en el Laboratorio Gordon de la Universidad de Washington en St. Louis. Todas las unidades de investigación y los investigadores colaboradores tienen una larga historia de colaboraciones internacionales. Todos los investigadores se han comunicado durante el desarrollo de este proyecto y están comprometidos con su implementación exitosa.

Instalaciones disponibles icddr,b cuenta con un laboratorio de procesamiento de alimentos bien equipado que facilitará la preparación de recetas dietéticas. Varias oficinas de proyectos están ubicadas en Mirpur. Más importante aún, se ha establecido una excelente relación con la comunidad. La élite y los ancianos de la comunidad son invitados cada año a una reunión de difusión para que conozcan las investigaciones que se están realizando.

Centro de Ciencias del Genoma, Universidad de Washington en St. Louis: