Op de gemeenschap gebaseerde klinische proef met microbiota-gerichte aanvullende voedingsmiddelen (MDCF's) gemaakt van lokaal beschikbare voedselingrediënten voor de behandeling van kinderen met primaire matige acute ondervoeding

Achtergrond:

Matige acute ondervoeding (MAM), een groot wereldwijd gezondheidsprobleem, wordt gedefinieerd als verspillen (d.w.z. gewicht-voor-lengte tussen < -2 en -3 Z-scores van de WHO Child Growth Standards) en/of middelomtrek van de bovenarm (MUAC) groter of gelijk aan 115 mm en kleiner dan 125 mm. Volgens het Global Nutrition Report 2017 waren in 2016 wereldwijd 8% of 52 miljoen kinderen onder de vijf jaar acuut ondervoed. Stunting trof 23% of 155 miljoen kinderen. Ongeveer één op de zes kinderen onder de vijf jaar in Zuid-Azië leed in 2013 aan MAM (d.w.z. 17%). Deze kinderen lopen een verhoogd risico op ernstige acute ondervoeding (SAM) en hebben een drie keer hoger risico om te overlijden aan veelvoorkomende overdraagbare ziekten dan de goed gevoede leeftijdsgenoten. Bangladesh heeft een van de hoogste ondervoedingslasten bij kinderen ter wereld. Volgens de Bangladesh Demographic Health Survey (BDHS) 2014 is de prevalentie van groeiachterstand bij kinderen onder de vijf jaar 36%, van wie 12% lijdt aan ernstige groeiachterstand (Length-for-Age-Z-score, LAZ <-3). Ongeveer 15% van de kinderen is verspild (Gewicht-voor-Lengte Z-score, WLZ <-2); meer dan 2 miljoen kinderen lijden aan MAM, terwijl 3% of 450.000 kinderen lijden aan de dodelijke vorm van SAM. Ondervoeding kost Bangladesh naar schatting 1 miljard dollar per jaar. Volgens de aanbevelingen van de WHO moeten baby's en kinderen van 6-59 maanden met MAM voedzame voedingsmiddelen consumeren om te voorzien in hun extra behoefte aan gewichts- en lengtetoename en functioneel herstel. Momenteel zijn er geen evidence-based aanbevelingen over de samenstelling van aanvullende voedingsmiddelen die worden gebruikt om kinderen met MAM te behandelen. In situaties van voedseltekort zijn aanvullende voedingsmiddelen gebruikt om kinderen met matige acute ondervoeding te behandelen. Interventies om ondervoeding aan te pakken, moeten daarom een ​​sterk onderdeel van de MAM-behandeling zijn. MAM-preventie moet in overweging worden genomen bij voedselzekerheid en andere ontwikkelingsstrategieën, aangezien de situatie kritiek wordt in bevolkingsgroepen waar voedselonzekerheid hoogtij viert. Voedselonzekerheid is een wereldwijde zorg geworden door het toenemende aantal mensen dat ondervoed blijft tot 842 miljoen, ongeveer 12% van de totale wereldbevolking. Uit de National Micro nutrient Status Survey in Bangladesh, die we in 2011-2012 hebben uitgevoerd, blijkt dat ernstige voedselonzekerheid het meest voorkomt in sloppenwijken (17,2%), vergeleken met 12,3% op nationaal niveau, 12% in plattelandsgebieden en 12,4% in stedelijke gebieden van het land. Aangezien voedselonzekerheid niet zomaar kan worden overwonnen, is het daarom belangrijk om interventies te ontwikkelen die afhankelijk zijn van lokaal beschikbare voedselingrediënten en die in staat zijn om de heilzame kracht van de darmmicrobiota op de groei van baby's en kinderen te benutten.

Een van de belangrijkste factoren die de impact van voedingsinterventie beperken, is het onvermogen van de ondervoede kinderen om hun inname te verhogen om aan de verhoogde metabolische eisen te voldoen. In gezamenlijke studies tussen icddr,b en het Gordon Lab aan de Washington University in St. Louis tijdens de Jump Start Phase of the Breast Milk, Microbiota and Immunity (BMMI) Project, hebben we Random Forests, een op machine learning gebaseerde benadering, toegepast om bacteriële 16S rRNA (ribosomaal ribonucleïnezuur) datasets gegenereerd uit maandelijkse fecale monsters verkregen uit een geboortecohort van kinderen die in een stedelijke sloppenwijk van Dhaka, Bangladesh wonen. Deze kinderen lieten een consistent gezonde groei zien (WLZ -0,32+0,98). Er werden bacteriestammen geïdentificeerd waarvan de proportionele vertegenwoordiging een gezonde darmmicrobiota definieert zoals deze zich tijdens de eerste 2-3 postnatale jaren opbouwt. In een gerandomiseerde klinische studie bij icddr,b van twee therapeutische voedingsmiddelen (geïmporteerde kant-en-klare therapeutische voeding [RUTF (Ready to Use Therapeutic Food), Plumpy'Nut] versus lokaal bereide Khichuri en Halwa op basis van rijst/linzen) in Bengaals Bij kinderen met ernstige acute ondervoeding (SAM) werd waargenomen dat de onvolgroeidheid van de microbiota onvolledig en slechts tijdelijk verbeterde, waarbij de kinderen gedurende de follow-upperiode duidelijk achterblijven en ondergewicht hebben. Bengaalse kinderen met MAM vertoonden ook een significante onvolgroeidheid van de microbiota, hoewel minder ernstig dan kinderen met SAM. Onrijpheid van de microbiota dient dus als een potentiële biomarker om baby's te identificeren die risico lopen op ondervoeding en om behandelings- en preventiestrategieën te volgen.

Onderzoekers hebben onlangs kant-en-klare therapeutische voedingsmiddelen ontwikkeld met behulp van lokaal beschikbare voedselingrediënten rijst, linzen en kikkererwten die cultureel relevant en acceptabel zijn. Ze ontdekten via een dubbelblinde RCT (Randomized Controlled Trial) dat op kikkererwten gebaseerde en op rijst-linzen gebaseerde RUTF even effectief waren als de commerciële op pinda's gebaseerde RUTF en goed werden geaccepteerd door kinderen met SAM. Door een combinatie van de bovengenoemde RCT en klinische translationele studies hebben ze groeibevorderende leeftijdsonderscheidende gunstige microbiota en lokaal beschikbare voedselingrediënten geïdentificeerd die de proliferatie van deze gunstige microbiota ondersteunen. Bovendien hebben de resultaten van eerdere studies uitgevoerd op gnotobiotische dieren in het Washington University Center for Genome Science ons ertoe gebracht te suggereren dat een combinatie van voedselingrediënten (kikkererwten, sojameel, pinda's en groene banaan) de moeite waard is om te bestuderen met betrekking tot de impact van het dieet op het stimuleren van proliferatie van groei-discriminerende microbiota, evenals kosten en duurzaamheid. Om te beoordelen in hoeverre de resultaten van de gnotobiotische muis- en biggenmodellen zich vertalen naar mensen, hebben onderzoekers onlangs een door de RRC (Research Review Committee) en ERC (Ethecial Review Committee) goedgekeurde studie uitgevoerd, icddr,b protocol (PR-16099) ' Pre-Proof of Concept klinische proeven om prototypen van leidende microbiota-gerichte complementaire voeding (MDCF) te optimaliseren voor hun vermogen om de onrijpheid van de microbiota te herstellen en hun organoleptische aanvaardbaarheid vast te stellen 'en hebben de studie met succes afgerond. Deze studie was opgezet om de effecten te testen van drie lokaal geproduceerde MDCF-prototypes (MDCF-1, MDCF-2 en MDCF-3) en een lokaal geproduceerde RUSF op basis van rijst en linzen. Het doel van deze pilootstudie was om een ​​Pre-proof of Concept aan te tonen dat bepaalde aanvullende voedingsmiddelen een gunstig effect zouden hebben op jonge kinderen die lijden aan matige acute ondervoeding door de proliferatie te stimuleren van bepaalde leden van de darmmicrobiota die bekend staan ​​om hun groeibevorderende eigenschappen. effect. In die pilootstudie onderzochten ze de microbiota-voor-leeftijd Z-score, evenals de impact van de proliferatie van goede leden van de darmmicrobiota op bepaalde lichaamssystemen. De resultaten van de Pre-POC-pilootproef toonden onomstotelijk aan dat een van de drie microbiota-gerichte aanvullende voedingsmiddelen, namelijk (MDCF-2; samengesteld uit een combinatie van kikkererwten, sojameel, pinda's, groene banaan, olie, suiker en micronutriënten) geassocieerd was met verhoogde niveaus van bepaalde aminozuren, die een sleutelrol spelen bij de ontwikkeling van de lange botten, de ontwikkeling van de hersenen en een verhoogde productie van IGF-1. Dit werd gedaan met behulp van de ultramoderne op DNA-aptameer gebaseerde SomaLogic-scan. En de resultaten suggereren dat deze kandidaat-MDCF-2 effectief is in het stimuleren van de groei van groeibevorderende leden van de darmmicrobiota, bijvoorbeeld Faecalibacterium prausnitzii. Zo bevordert MDCF-2 de darmmicrobiota die het hormoon insuline-achtige groeifactor 1 (IGF-1) induceert, dat de botgroei en hermodellering bevordert.

Op basis van dit bewijs zouden onderzoekers nu een veel grotere klinische studie willen doen met de meest veelbelovende MDCF, namelijk MDCF-2, met als primair eindpunt lineaire groei. Deze proef zou gericht zijn op kinderen met primaire MAM.

Onderzoeksopzet en methoden Onderzoekers zullen een klinisch onderzoek uitvoeren onder 12-18 maanden oude kinderen met primaire MAM (WLZ <-2 tot -3).

Studieopzet: gerandomiseerde gecontroleerde interventiestudie. Studieplaats: Deze studie zal worden uitgevoerd in Bauniabadh, RADDA MCH-FP (Maternal and Child Health - Family Planning) kliniek in Mirpur en Gabtoli in de stad Dhaka, en mogelijk in de Special Nutrition Unit van Terre des Hommes in Kurigram.

Deelnemers aan de studie: De deelnemers aan de studie zijn 12-18 maanden oude kinderen van beide geslachten met MAM (WLZ <-2 tot -3).

Eerste screening en inschrijving: kinderen worden gescreend en ingeschreven via enquêtes onder huishoudens door veldonderzoeksassistenten (FRA's) volgens vooraf gespecificeerde inclusiecriteria. Voldoen aan de inschrijvingscriteria en na ontvangst van de toestemming voor studiedeelname van de ouders of wettelijke voogden, zullen de kinderen met de respectieve moeder/verzorger worden ingeschreven en willekeurig worden toegewezen aan een van de twee armen volgens door de computer gegenereerde willekeurige getallen. De code van het toegewezen type dieet wordt voor elk individu in gesloten, ondoorzichtige enveloppen bewaard en wordt alleen geopend wanneer de verzorger het toestemmingsformulier ondertekent.

Studie opzet:

Arm 1 - RUSF op basis van rijst en linzen (redenering: referentiestandaard van zorg voor MAM; gebaseerd op kennis van de effecten ervan op de darmmicrobiota of onrijpheid van de microbiota) Arm 2 - MDCF2 (Microbiota Directed Complementary Food 2) met vier aanvullende voedselingrediënten (redenering : leidend met bewijs van pre-POC klinische studies om leidende microbiota-gerichte complementaire voedselprototypes te optimaliseren voor hun vermogen om de onrijpheid van de microbiota en positieve effecten op de groei te herstellen) Fecale monsterverzameling Wekelijkse fecale monsters (1-2 g) worden verzameld binnen 30 minuten na excretie (thuis en teruggevoerd naar de icddr,b) met behulp van de vloeibare stikstofhoudende droge shipper. Specimens worden bewaard bij -80 °C voordat ze naar het Gordon Lab worden gestuurd. Analyse van de volwassenheid van de microbiota (gemeten voor, tijdens en na stopzetting van de behandeling met MDCF en RUSF) en op PCR (Polymerase Chain Reaction) gebaseerde beoordeling van enteropathogene belasting in fecale monsters (gemeten voor en na MDCF-behandeling).

Van elk kind wordt 1-2 g fecale monsters afgenomen bij inschrijving, wekelijks tijdens de eerste maand van de interventie, en 4 wekelijks tijdens de tweede en derde maand van de interventie en aan het einde van de post-interventiefase. Uitgaande van 62 studiedeelnemers/arm, zullen in totaal 992 fecale monsters worden verzameld in deze studie. Op het moment van inschrijving wordt 2 gram ontlastingsmonsters afgenomen bij de moeders.

Verzameling van urinemonsters Van elk kind wordt 2 ml urinemonsters verzameld bij inschrijving, een week na inschrijving en eenmaal per maand in de interventie- en postinterventiefase. Uitgaande van 62 studiedeelnemers/arm, zullen in totaal 744 urinemonsters worden verzameld in deze studie. 5 ml urinemonsters worden verzameld bij moeders op het moment van inschrijving.

Bloedafname Bij elk kind wordt 2 ml bloed afgenomen voorafgaand aan de interventie, het einde van de eerste maand van de interventie en net nadat de interventie is voltooid. In dit onderzoek zullen in totaal 372 plasmamonsters worden verzameld. Bij moeders wordt op het moment van inschrijving 5 ml bloed afgenomen.

De voedingsstatus van de moeder hangt samen met de voedingsstatus van het kind, zoals blijkt uit de resultaten van onze MAL-ED-studie (Malnutrition and Enteric Diseases) in acht landen. Bovendien waren neonatale en andere maternale factoren vroege bepalende factoren voor een lagere lengte-voor-leeftijd, en hun bijdrage bleef belangrijk gedurende de eerste 24 levensmaanden.9 De andere maternale factoren, denken de onderzoekers, zijn onder meer de darmmicrobiota van de moeder en het aminozuurprofiel van het maternale bloed. Initiatieven om groeiachterstand bij kinderen aan te pakken, moeten ook worden overwogen om de samenstelling van aanvullend voedsel (d.w.z. meer eiwit) te verbeteren en om strategieën te ontwikkelen om de blootstelling aan darmpathogenen te verminderen. Als zodanig zullen ze de lengte en het gewicht van de moeder registreren. Om de biologische voedingstoestand van de moeder te begrijpen, zullen bij de moeder inclusiemonsters van ontlasting, bloed en urine worden gevraagd. Deze monsters zullen worden geanalyseerd op darmmicrobiota en proteomics, en de resultaten worden gecorreleerd met die van de ingeschreven kinderen.

Voedersessies De kinderen en moeders/verzorgers worden verzocht om op dag 1 tussen 9-11 uur en 15-17 uur naar de voedingscentra op de locaties te komen. De moeders wordt verzocht om geen voedsel en geen moedermelk te geven in de 2 uur voorafgaand aan de geobserveerde maaltijdtijd. Het kind krijgt 25 gram MDCF of RUSF aangeboden, zoals bepaald door willekeurige toewijzing in elk van de twee maaltijden tussen 9.00-11.00 uur en 15.00-17.00 uur. De moeders zal worden gevraagd om de vooraf gewogen diëten met een lepel aan hun kinderen te geven totdat zij/hij weigert te eten, zoals hieronder beschreven. Na een pauze van twee minuten wordt hetzelfde dieet een tweede keer aangeboden totdat hij/zij weer weigert. Na een tweede pauze van twee minuten wordt het dieet een derde keer aangeboden totdat het opnieuw wordt geweigerd. Na deze derde weigering wordt de voerbeurt als 'beëindigd' beschouwd. De duur van de voeding (exclusief de tussenliggende 'rustperiodes') wordt met een stopwatch geregistreerd en de totale duur van de voeding wordt genoteerd. Deze voerbeurt duurt maximaal 60 minuten. Er worden ook afgemeten hoeveelheden gewoon water gegeven en de hoeveelheid water die tijdens deze maaltijdperiode van 60 minuten wordt ingenomen, wordt gemeten. De voedingsaflevering vindt plaats onder direct toezicht van getraind onderzoekspersoneel. Kinderen zullen worden beschouwd als personen die verdere inname weigeren als ze hun hoofd van het voedsel af bewegen, huilen, met hun mond dichtknijpen of op elkaar klemmen, of geagiteerd raken, het voedsel uitspugen of weigeren door te slikken. De daadwerkelijk ingenomen hoeveelheid MDCF/RUSF wordt berekend door de overgebleven hoeveelheid af te trekken van de aangeboden hoeveelheid. Voorgewogen servetten worden verstrekt; al het voedsel dat wordt uitgebraakt, uitgebraakt of gemorst, wordt afgeveegd, gewogen en afgetrokken van de aangeboden hoeveelheid. De hoeveelheid geconsumeerd voedsel (g), energie (kcal) en categorie van aanvaardbaarheid zullen worden geanalyseerd. De ingeschreven kinderen worden dagelijks gecontroleerd door veldonderzoeksassistenten op mogelijke bijwerkingen/bijwerkingen (bijv. huiduitslag, urticaria als gevolg van voedselallergie of significante veranderingen in de klinische toestand) gedurende een week. Als er bijwerkingen/bijwerkingen worden waargenomen, zullen deze worden behandeld volgens de zorgstandaard. Er zal een gestandaardiseerde productieprocedure worden gevolgd om de kwaliteit van RUSF en MDCF te controleren volgens het internationale standaardprotocol. RUSF en MDCF worden bereid in het voedselverwerkingslaboratorium. Bereiding van voedsel in verschillende stappen, dat wil zeggen roosteren, verkleining van de deeltjesgrootte, homogeen mengen en levering aan de voedingscentra zal worden gecontroleerd door icddr,b-onderzoekers. Voedsel wordt elke dag bereid om ervoor te zorgen dat er tijdens de bereiding geen onverwachte verontreinigingen en verlies van voedingsstoffen optreden. Hoewel rauwe voedselingrediënten zeer zorgvuldig op de lokale markt worden ingekocht en in redelijke hoeveelheden worden opgeslagen, zullen onderzoekers dezelfde dag dat de MDCF en RUSF worden bereid, de kinderen bereiden, uitdelen en voeden. Elk kind krijgt de eerste 4 weken tweemaal daags 25 gram van het dieet aangeboden in het voedingscentrum. In de volgende maand krijgt het kind 25 gram van het dieet aangeboden in het voedingscentrum en krijgt het kind nog eens 25 gram in een schone container om thuis te voeden. In de derde maand worden er elke dag twee aparte verpakkingen met 25 gram voeding aan elk ingeschreven kind bij de deelnemer thuis verstrekt.

In deze studie zal de voedingsstatus worden beoordeeld door middel van antropometrie, vergeleken met groeireferentiestandaarden van de WHO. Aan het begin van het onderzoek zal informatie worden gezocht over de demografische kenmerken (vermogen van de gezinnen, woonstandaard, gezinsstructuur en ouderlijke kenmerken enz.), en FRA's zullen het gewicht van de kinderen registreren met behulp van een digitale weegschaal met een nauwkeurigheid van 2 g (Seca, model 728, Duitsland), lengte (met infantometer, Seca, model 416, Duitsland) en middenomtrek van de bovenarm tot op de dichtstbijzijnde mm (met een niet-rekbare inbrengtape). Antropometrie wordt uitgevoerd volgens de standaardprocedures en alle metingen worden driemaal uitgevoerd en de middelste wordt geregistreerd.

Alle interventies in elk onderzoek zullen worden toegediend aan kinderen in de gezondheidskliniek van Mirpur/RADDA of in Kurigram. Moeders/primaire verzorgers zullen worden geadviseerd om de huidige voedings- en borstvoedingspraktijken van hun kind te handhaven.

Onderzoekers voltooien de inschrijving binnen 12 maanden en de follow-up en data-analyse binnen nog eens 6 maanden. Deze studie met primaire MAM zal echter gelijktijdig worden voortgezet met de andere klinische studie met Post SAM-MAM die een langere duur zal hebben.

Werving, screening en instemming Census, screening, inschrijving van studiedeelnemers zal worden gedaan in de verzorgingsgebieden van de locaties in de stad Dhaka en in Kurigram. Ouders van kinderen die voldoen aan de MAM-criteria (voor de primaire MAM-studie) zullen worden benaderd over deelname aan het onderzoek. Een veldonderzoeksassistent zal het onderzoek in detail uitleggen, eventuele vragen van de ouder(s) beantwoorden en de ouder(s) uitnodigen om het kind in te schrijven voor het onderzoek.

Aan het begin van het onderzoek zal informatie worden gezocht over de demografische kenmerken (vermogen van het gezin, woonstandaard, gezinsstructuur en ouderlijke kenmerken enz.), en FRA's zullen het gewicht van de kinderen registreren met behulp van een digitale weegschaal met een nauwkeurigheid van 2 g, lengte (met behulp van een infantometer,) en de omtrek van de middenbovenarm tot op de dichtstbijzijnde mm. Studiedeelnemers wordt gevraagd om rechtstreeks naar het voedingscentrum te komen voor voedingstherapie.

Bereiding van MDCF 2 en RUSF Op basis van compatibele combinaties van complementaire voedselingrediënten geïdentificeerd in de hierboven beschreven pre-POC-studie, zullen zowel MDCF2 als rijst-linzen-RUSF worden geproduceerd in de icddr,b Food Processing-faciliteit in Mirpur en in Kurigram (naar op beide plaatsen worden vastgesteld) in voldoende hoeveelheden voor klinisch onderzoek. De twee diëten worden op elkaar afgestemd wat betreft energiedichtheid en gehalte aan micronutriënten. De energiedichtheid van MDCF is 125 kcal/25 g (per portie) en de calorische distributie is gericht op 45-50 procent van vet en 8-10 procent van eiwit. Experimenten in de ontwikkeling van de MDCF-prototypes en beoordeling van de organoleptische eigenschappen zijn gedaan tijdens de Pre-POC klinische studie. Na ontvangst van de grondstoffen (rijst/linzen/kikkererwten) worden de vreemde materialen/granen of zaden (indien aanwezig) eruit gehaald, waarna in een open pan de grondstoffen worden geroosterd. De temperatuur wordt voor het braden op 120-130°C gehouden. Gewoonlijk duurt het 8-10 minuten om 100 g van elke grondstof te roosteren. Voortdurend roeren is essentieel om ervoor te zorgen dat afzonderlijke zaden/granen goed roosteren. Na voltooiing van het braden wordt het opzij gehouden om af te koelen en vervolgens te grijnzen. Als laatste wordt het vooraf afgewogen premixpoeder toegevoegd. De verwerking van hele groene banaan voor opname in MDCF2 verschilt van de andere ingrediënten. Groene bananen met schil worden in een diepe pan in kokend water (100°C-110°C) geplaatst en ongeveer 17-20 minuten gekookt tot ze gaar en zacht zijn. De schil van de groene banaan wordt afgepeld en het eetbare witte deel wordt in kleine stukjes geraspt. Daarna worden ze in een pot gedaan en afgekoeld. De kleine stukjes banaan worden geplet met een lepel/handbreker. De gewichten van alle andere ingrediënten worden geregistreerd. Recepten worden in kleine batches geproduceerd door alle ingrediënten in een elektrische blender te mengen. Een kleine hoeveelheid (1 procent) sojalecithine wordt aan het recept toegevoegd om de consistentie te verbeteren en olieafscheiding te voorkomen.

Antropometrie De leeftijd van het kind wordt geverifieerd aan de hand van documentatie (geboorteakte of vaccinatiekaart, indien beschikbaar) of het rapport van de verzorger over de geboortedatum van het kind. De lengte wordt gemeten met een infantometer die gevoelig is tot 0,1 cm. Het lichaamsgewicht wordt gemeten met een weegschaal die gevoelig is tot 2 g. Lengte-voor-leeftijd (LAZ), gewicht-voor-lengte (WLZ) en Gewicht-voor-leeftijd (WAZ) Z-scores worden berekend volgens de groeistandaarden van de Multicentre Growth Reference Study (MGRS) van de WHO (Wereldgezondheidsorganisatie). Oedeem wordt onderzocht door gedurende 3 seconden op de bovenkant van beide voeten te drukken. De middelomtrek van de bovenarm (MUAC) wordt gemeten met behulp van MUAC-tape (VK). Regelmatige standaardisatie van de meetapparatuur zal plaatsvinden aan de hand van standaarden.

Analyses van plasma- en fecale monsters Plasmamonsters die tijdens deze proef zijn verzameld, zullen worden verzonden naar het laboratorium van Dr. Jeffrey Gordon in het Center for Genome Sciences and Systems Biology aan de Washington University in St. Louis. Er zullen geavanceerde op massaspectroscopische en immunoassay gebaseerde methoden worden gebruikt om nieuwe kennis te verkrijgen over de rol van de onrijpheid van de darmmicrobiota en de effecten van een poging tot acuut herstel van deze onvolwassenheid met op lood microbiota gericht aanvullend voedsel (MDCF) op biomarkers en bemiddelaars van gezonde groei . Er zullen vergelijkingen worden gemaakt met de controlegroep (d.w.z. degenen die de RUSF-referentiestandaard gebruiken). Gerichte ultraperformante vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (UPLC-MS) en gaschromatografie-massaspectrometrie (GC-MS) zullen worden gebruikt om analyten te profileren die van specifiek belang zijn in plasma- en/of fecale monsters, waaronder galzuren en vetzuren met een korte keten (SCFA's). ); markers van de mitochondriale functie (bijv. β-hydroxybutyraat, acylcarnitines/acylCoAs, TCA-cyclustussenproducten); aminozuren in serum plus fecale monsters [aminozuren met vertakte keten, tryptofaan en tryptofaanmetabolieten die verband houden met groei en ontstekingsstatus, inclusief die geproduceerd door bacterieel tryptofaanmetabolisme (bijv. indoolazijnzuurderivaten)]. Sleutelmediatoren/biomarkers van lineaire groei (bijv. groeihormoon en IGF-1), energiegebruik (insuline, leptine) en botbiologie [IL-6 (Interleukin-6), osteoprotegerine, het C-terminale peptide van type I collageen (CTX, een marker van osteoclastactiviteit/botresorptie), en het amino-terminale propeptide van Type 1 procollageen (P1NP, een marker van osteoblastactiviteit/botvorming)], en systemische ontsteking (CRP, AGP) zullen worden gekwantificeerd met behulp van gevestigde ELISA/Luminex-assays. Eiwitten in het bloed zullen worden geïdentificeerd met behulp van de SOMAlogic-scan waarmee meer dan 1300 verschillende eiwitten kunnen worden geïdentificeerd. De proteomische studie uitgevoerd op plasmamonsters van kinderen met SAM in onze vorige Pre-POC-studie in Dhaka heeft al een aantal significante en klinisch relevante associaties aangetoond tussen bepaalde eiwitten en klinische fenotypes met behulp van de SOMAlogic-scan.

De verzamelde informatie zal worden gebruikt om menselijke fecale monsters te selecteren voor transplantatie in kiemvrije dieren in het Gordon Lab in St. Louis; deze dieren, die het dieet van hun menselijke microbiota-donoren zullen krijgen, zullen worden gebruikt om de mechanismen die MDCF-prototypes, de darmmicrobiota en de fysiologie/het metabolisme van de gastheer met elkaar verbinden, verder te karakteriseren. Bovendien zullen deze plasma- en fecale biomarkers worden gebruikt om te bepalen dat MDCF het herstel van onrijpe microbiota bevordert en de biologische toestand bij kinderen verbetert.

Berekening van de steekproefomvang In het pre-POC-onderzoek met verschillende MDCF's was de baseline gewicht-voor-lengte Z-score van kinderen die MDCF2 kregen -2,2 en na één maand suppletie -1,7. Als wordt aangenomen dat de WLZ -2 bij baseline en -1,7 bij eindlijn, gepoolde SD (standaarddeviatie) 0,53 is, is de steekproefomvang 49 in elke arm bij 80% vermogen en 5% significantieniveau.

Bij een verloop van 20% moeten 62 kinderen in elke arm worden ingeschreven. Daarom zullen voor de primaire MAM-studie 62 kinderen MDCF2 krijgen en 62 kinderen rijst-linzen RUSF.

Gegevensanalyse De twee groepen kinderen met MAM worden vergeleken bij aanvang en op verschillende tijdstippen. Alle analyten genoemd in de sectie 'Analyses van plasma- en fecale monsters' zullen worden vergeleken tussen MDCF2- en RUSF-groepen.

Data Safety Monitoring Plan (DSMP) Hulpmiddelen voor het verzamelen van gegevens voor dit onderzoek omvatten casusrapportformulieren, laboratoriumwerkbladen en brondocumentatie. Volledige brondocumentatie (studiebezoeken, laboratoriumrapporten, etc.) zal voor elke studiedeelnemer in individuele studiekaarten worden bijgehouden. Alle laboratoriumspecimens, rapporten, onderzoeksgegevensverzameling en administratieve formulieren zullen worden geïdentificeerd door middel van een gecodeerd nummer om de vertrouwelijkheid van de deelnemers aan de studie te behouden en tracking gedurende de hele studie mogelijk te maken.

Formulieren, lijsten, logboeken, afsprakenboeken en alle andere lijsten die de ID-nummers (identificatie) van de studiedeelnemer koppelen aan andere identificerende informatie, worden opgeslagen in een apart, afgesloten bestand in een gebied met beperkte toegang. Alle informatie over studiedeelnemers wordt bewaard in met een wachtwoord beveiligde computerbestanden of in afgesloten archiefkasten die alleen toegankelijk zijn voor geautoriseerd studiepersoneel. Kaartinformatie en informatie uit onderzoeksdossiers zal niet worden vrijgegeven zonder schriftelijke toestemming van de ouder(s) van de studiedeelnemer. Records kunnen echter worden beoordeeld door vertegenwoordigers van de Research Review Committee en de Ethical Review Committee van icddr,b.

De onderzoekers van het onderzoek zijn verantwoordelijk voor het zorgen voor volledige en nauwkeurige documentatie voor het onderzoek en voor elke deelnemer aan het onderzoek, waaronder: medische dossiers, dossiers waarin de voortgang van elke deelnemer aan het onderzoek door het onderzoek wordt beschreven, laboratoriumrapporten, Case Report Forms (CRF's), ondertekende geïnformeerde toestemmingsformulieren, correspondentie met IRB (Institutional Review Board), rapporten over ongewenste voorvallen en informatie over stopzetting en voltooiing van het onderzoek door deelnemers. Alle vereiste gegevens worden duidelijk en nauwkeurig vastgelegd in de CRF's door geautoriseerd onderzoekspersoneel. Alleen aangewezen personeel op de studielocatie dat de juiste training heeft gekregen, zal gegevens in een CRF vastleggen of wijzigen. De onderzoekers zijn verantwoordelijk voor het verkrijgen van de gegevens en voor de kwaliteit van de gegevens die in de CRF's zijn vastgelegd. De invoer en het beheer van gegevens vindt plaats bij icddr,b.

Ethische borging voor de bescherming van mensenrechten Het onderzoek zal worden gestart na het verkrijgen van IRB-goedkeuring door de icddr,b Research Review Committee en Ethical Review Committee. Voordat u zich inschrijft voor het onderzoek, wordt geïnformeerde schriftelijke toestemming verkregen van de wettelijke voogd van de deelnemers aan het onderzoek. De privacy, anonimiteit en vertrouwelijkheid van gegevens/informatie die de deelnemers aan de studie identificeren, zal strikt worden gehandhaafd. Persoonlijke identificaties die tijdens de inschrijving en andere studieprocedures worden afgenomen, worden achter slot en grendel bewaard. Niemand minder dan het onderzoekspersoneel heeft toegang tot informatie over persoonlijke identificatie en andere gevoelige informatie.

Verwachte risico's/bijwerkingen voor dit protocol zijn die gerelateerd aan het verzamelen van bloedmonsters, het verzamelen van fecale monsters en het voeren van op microbiota gericht aanvullend voedsel. Geen van deze kwalificeert als een ernstige bijwerking (SAE). Verwachte bijwerkingen (EAE's) gerelateerd aan bloedafname zijn als volgt:

• ongemak
• pijn
• introductie van infectie
• bloeden

• flauwvallen of blauwe plekken

  • Er zullen voorzorgsmaatregelen worden genomen om introductie van infectie te voorkomen door de plaats van venapunctie te desinfecteren en steriele apparatuur te gebruiken
  • Het risico op bloedingen en blauwe plekken wordt geminimaliseerd door onmiddellijk druk uit te oefenen na venapunctie
  • De deelnemer (kind) bevindt zich tijdens de bloedafname in zittende of liggende positie om verwondingen door flauwvallen te voorkomen

Alle mogelijke bijwerkingen zullen op passende wijze worden behandeld. Deze omvatten:

• braken
• Diarree
• Huiduitslag
• Urticaria door voedselallergie
• Opgezette buik
• Pijn buik Beoordeling van bijwerkingen Zowel ernstige als niet-ernstige bijwerkingen worden beoordeeld op ernst; relatie tot studieparticipatie; Ondernomen acties; en uitkomsten. Alle SAE's worden binnen 24 uur nadat de site op de hoogte is gebracht van het evenement, gerapporteerd aan de ERC van icddr,b, die op zijn beurt zal worden verspreid onder de sponsor. Dit zal gebeuren via rechtstreekse telefooncommunicatie, fax of e-mail.

Elke categorie voor AE-beoordeling wordt gecodeerd volgens de volgende beoordelingssystemen:

Ernst:

1. Mild
2. Gematigd
3. Erge, ernstige

Relatie met studiedeelname:

1. Absoluut gerelateerd: duidelijke tijdelijke associatie, geen andere mogelijke oorzaak
2. Mogelijk gerelateerd: minder duidelijke tijdelijke associatie, andere oorzaken mogelijk
3. Ongerelateerd: onafhankelijk van studie bestaat er bewijs dat de gebeurtenis zeker verband houdt met een andere etiologie

Acties:

Geen Oefentherapie (meer dan één dosis geneesmiddel nodig) Definitief gestopt met deelname aan het onderzoek Ziekenhuisopname Ander gebruik van dieren Niet van toepassing Samenwerkingsovereenkomsten Dit project is een samenwerking tussen de onderzoekers van de Washington University School of Medicine en het International Center for Diarree Disease Research , Bangladesh (icddr,b). Het klinische werk en de veldactiviteiten zullen worden uitgevoerd in Dhaka, Bangladesh, onder direct toezicht van de hoofdonderzoeker, terwijl de laboratoriumanalyses zullen worden uitgevoerd in het Gordon Lab aan de Washington University in St. Louis. Alle onderzoekseenheden en de samenwerkende onderzoekers hebben een lange geschiedenis van internationale samenwerkingen. Alle onderzoekers hebben tijdens de ontwikkeling van dit project gecommuniceerd en zijn toegewijd aan de succesvolle implementatie ervan.

Beschikbare faciliteiten icddr,b heeft een goed uitgerust Food Processing Lab dat de bereiding van dieetrecepten zal vergemakkelijken. In Mirpur zijn een aantal projectkantoren gevestigd. Wat nog belangrijker is, is dat er een uitstekende verstandhouding met de gemeenschap tot stand is gebracht. De gemeenschapselite en ouderen worden elk jaar uitgenodigd voor een verspreidingsbijeenkomst, zodat ze op de hoogte zijn van het onderzoek dat wordt uitgevoerd.

Centrum voor genoomwetenschappen, Washington University in St. Louis: