Fibrotisk fokus i brystkræft

Baggrund Brystkræft udviser en bred vifte af morfologiske træk med påvist prognostisk betydning. Disse funktioner har den fordel, at de let kan evalueres i rutinerapportering; giver således et stort klinisk potentiale. I vores tidligere analyse blev fibrotisk fokus (FF) vist at have merværdi til den nuværende iscenesættelse. FF refererer til det centrale arlignende område i en invasiv tumor og er omgivet af en højcellulær zone af infiltrerende tumorceller. Det er sammensat af fibroblaster og kollagenfibre, der danner en radialt ekspanderende fibrosklerotisk kerne, med en forekomst på omkring 20%. Den præcise sammensætning af de forskellige komponenter i FF kan påvirke dets prognostiske værdi ved brystkræft.

Cancer-associerede fibroblaster (CAF) og kollagenkomponenter er de mest fremtrædende træk i FF. FF med proliferativ CAF var forbundet med højere risiko for metastase. Desuden var CAF'er identificeret af fibroblastiske markører korreleret med brystkræfttilbagefald. I brystkræft er forskellige undergrupper af CAF ved differentielle fibroblastiske markører blevet karakteriseret for nylig. De var til stede i varierende proportioner i undertyper af brystkræft og bidrog uensartet indvirkning på immuntumormikromiljøet (TME). Ikke desto mindre forbliver forholdet mellem CAF-undertyper og FF, og hvorvidt de vil påvirke den prognostiske virkning af FF, uhåndgribeligt. Bortset fra CAF er den potente indflydelse af kollagenindhold i kræft i stigende grad værdsat. Kollagenstroma kan modulere immun TME ved at hæmme CD8 T-lymfocyttinfiltration. Ekspressionen af ​​kollagen og andre ekstracellulære matrixkomponenter er prognostisk hos forskellige typer cancerpatienter, herunder brystkræft. For FF mangler der stadig en detaljeret analyse af kollagenindholdet. Den særskilte kollagensammensætning og organisation kan også påvirke FF's prognostiske evner. De underliggende mekanismer for virkninger af FF er stort set ukendte. Til dato er der meget få rapporter om molekylær analyse af brystkræft med FF. FF er blevet associeret med øget angiogenese, hypoximarkørers ekspression og aktivering af hypoxi-inducerbar faktor-1a-vej og tilsvarende øget tumorassocieret makrofag (TAM) infiltration. Udforskning af andre vigtige biomarkører involveret i vil give yderligere oplysninger om FF-prognose.

I dette forslag vil der blive udført en systemisk evaluering af FF-træk ved brystkræft. Vi sigter mod yderligere at karakterisere FF på forskellige niveauer i detaljer. Endelig planlægger vi at udvikle en prognostisk model, der integrerer de forskellige FF-funktioner for en mere nøjagtig risikostratificering.

Undersøgelsesdesign At karakterisere FF baseret på morfologiske, strukturelle og molekylære egenskaber De forskellige morfologiske egenskaber ved FF vil blive undersøgt og korreleret med de klinisk-patologiske parametre og brystcancer subtyper. For at karakterisere kollagenstromaet vil ekspressionen af ​​disse forskellige kollagener blive bestemt ved IHC-analyse. De strukturelle karakteristika af kollagenfibrene vil blive bestemt på SHG-signal og/eller pico-Sirius rød farvning. Kollagensammensætningen og strukturelle træk i tilfælde med forskellige FF morfologiske træk vil blive sammenlignet.

Til karakterisering af fibroblastiske komponenter vil CAF-populationer blive bestemt ved IHC-analyse. Baseret på de rapporterede CAF-fænotyper vil CAF-markører blive undersøgt på de fortløbende IHC-objektglas. Co-ekspression af CAF-markører vil blive evalueret ved hjælp af flere IHC-justeringer. Forholdet mellem CAF-subpopulationer på FF og kollagenegenskaber samt klinisk-patologiske karakteristika vil blive undersøgt.

Kandidaterne fra top differentielle gener og pathways impliceret i FF vil blive undersøgt. Kandidaterne vil også blive prioriteret ud fra en undersøgelse af publiceret litteratur og deres biologiske relevans.

Hierarkisk klyngeanalyse vil blive udført for at klassificere FF baseret på de forskellige funktioner. Korrelationen mellem definerede FF-undersæt og klinisk-patologiske træk vil blive undersøgt.

For at bestemme virkningen af ​​FF i immun-TME For at undersøge virkningerne af FF i immun-TME, vil vi undersøge flere immuncellepopulationer in situ samtidigt ved hjælp af mIHC. Patienter vil blive grupperet baseret på deres immuncelleprofiler. Immuncellernes tæthed, deres relative forhold, immunprofil og rumlige forhold til tumorceller vil blive vurderet i forhold til forskellige FF-træk og sammenligne mellem FF- og ikke-FF-tilfælde. Samspillet mellem immunfunktioner og FF i prognose vil blive evalueret.

At undersøge den prognostiske værdi af FF i brystkræft. Efter at have undersøgt den klinisk-patologiske korrelation af forskellige træk ved FF og dets forhold mellem tumorimmunmiljøet, vil deres prognostiske værdi på overordnet overlevelse, tilbagefald og metastase blive analyseret ved hjælp af Kaplan-Meier metoden. Deres prognostiske påvirkninger vil blive sammenlignet med hinanden ved hjælp af univariat Cox proportional hazards model. Deres uafhængige prognostiske værdi vil blive bestemt ved multivariat analyse sammen med andre konventionelle prognostiske markører. En ny prædiktiv model vil blive konstrueret baseret på de uafhængige risikofaktorer afledt af den multivariate analyse. En modtagerdriftskarakteristik (ROC) kurve vil blive brugt til at identificere cutoff-værdien.