Focus fibrotico nel cancro al seno

Sfondo I tumori al seno presentano un'ampia gamma di caratteristiche morfologiche con significato prognostico dimostrato. Queste caratteristiche hanno il vantaggio di essere facilmente valutate nei rapporti di routine; offrendo così un grande potenziale clinico. Nella nostra analisi precedente, è stato dimostrato che il focus fibrotico (FF) ha un valore aggiunto all'attuale stadiazione. FF si riferisce all'area centrale simile a una cicatrice in un tumore invasivo ed è circondata da una zona altamente cellulare di cellule tumorali infiltranti. È composto da fibroblasti e fibre di collagene che formano un nucleo fibrosclerotico ad espansione radiale, con un'incidenza di circa il 20%. L'esatta composizione dei diversi componenti all'interno di FF può influenzare il suo valore prognostico nel carcinoma mammario.

I fibroblasti associati al cancro (CAF) e i componenti del collagene sono le caratteristiche più importanti nella FF. FF con CAF proliferativo era associato a un rischio più elevato di metastasi. Inoltre, i CAF identificati dai marcatori fibroblastici erano correlati alla recidiva del cancro al seno. Nel carcinoma mammario, recentemente sono stati caratterizzati diversi sottoinsiemi di CAF mediante marcatori fibroblastici differenziali. Erano presenti in proporzioni variabili nei sottotipi di cancro al seno e hanno conferito un impatto diverso sul microambiente tumorale immunitario (TME). Tuttavia, la relazione tra sottotipi di CAF e FF e se influenzeranno l'impatto prognostico di FF rimane sfuggente. Oltre al CAF, la potente influenza del contenuto di collagene nel cancro è sempre più apprezzata. Lo stroma di collagene può modulare la TME immunitaria inibendo l'infiltrazione dei linfociti T CD8. L'espressione del collagene e di altri componenti della matrice extracellulare è prognostica in diversi tipi di pazienti oncologici, incluso il cancro al seno. Per FF mancano ancora analisi dettagliate sul contenuto di collagene. La distinta composizione e organizzazione del collagene potrebbe anche avere un impatto sulle capacità prognostiche di FF. I meccanismi alla base degli effetti della FF sono in gran parte sconosciuti. Ad oggi, ci sono pochissime segnalazioni di analisi molecolare dei tumori al seno con FF. La FF è stata associata ad un aumento dell'angiogenesi, dell'espressione dei marcatori dell'ipossia e dell'attivazione della via del fattore 1α inducibile dall'ipossia e dell'infiltrazione di macrofagi associati al tumore (TAM). L'esplorazione di altri biomarcatori chiave coinvolti fornirà ulteriori informazioni sulla prognosi della FF.

In questa proposta verrà eseguita una valutazione sistemica delle caratteristiche del FF nei tumori al seno. Miriamo a caratterizzare ulteriormente FF a diversi livelli in dettaglio. Infine, intendiamo sviluppare un modello prognostico che integri le diverse caratteristiche del FF per una più accurata stratificazione del rischio.

Disegno dello studio Caratterizzare il FF sulla base di caratteristiche morfologiche, strutturali e molecolari Le diverse caratteristiche morfologiche del FF saranno esaminate e correlate con i parametri clinico-patologici ei sottotipi di carcinoma mammario. Per caratterizzare lo stroma di collagene, l'espressione di questi diversi collageni sarà determinata mediante analisi IHC. Le caratteristiche strutturali delle fibre di collagene saranno determinate mediante segnale SHG e/o colorazione con rosso pico-Sirius. Verranno confrontate la composizione del collagene e le caratteristiche strutturali in casi con diverse caratteristiche morfologiche del FF.

Per la caratterizzazione dei componenti fibroblastici, le popolazioni CAF saranno determinate mediante analisi IHC. Sulla base dei fenotipi CAF riportati, i marcatori CAF saranno esaminati sui vetrini IHC consecutivi. La co-espressione dei marcatori CAF sarà valutata utilizzando l'allineamento IHC multiplo. Verrà esaminata la relazione delle sottopopolazioni CAF sulle caratteristiche di FF e collagene, nonché sulle caratteristiche clinico-patologiche.

Saranno esaminati i candidati provenienti dai geni e dalle vie differenziali superiori implicati nella FF. I candidati saranno prioritizzati anche sulla base di un'indagine sulla letteratura pubblicata e sulla loro rilevanza biologica.

Verrà eseguita un'analisi di clustering gerarchico per classificare i FF in base alle diverse caratteristiche. Sarà studiata la correlazione tra sottoinsiemi definiti di FF e caratteristiche clinico-patologiche.

Per determinare l'impatto di FF nella TME immunitaria Per esaminare gli effetti della FF nella TME immunitaria, studieremo simultaneamente diverse popolazioni di cellule immunitarie in situ utilizzando mIHC. I pazienti saranno raggruppati in base ai loro profili di cellule immunitarie. La densità delle cellule immunitarie, il loro rapporto relativo, il profilo immunitario e la relazione spaziale con le cellule tumorali saranno valutate in relazione alle diverse caratteristiche di FF e verranno confrontate tra casi FF e non-FF. Verrà valutata l'interazione tra caratteristiche immunitarie e FF nella prognosi.

Per studiare il valore prognostico di FF nel carcinoma mammario. Dopo aver esaminato la correlazione clinico-patologica delle varie caratteristiche del FF e la sua relazione con l'ambiente immunitario del tumore, il loro valore prognostico sulla sopravvivenza globale, recidiva e metastasi sarà analizzato utilizzando il metodo Kaplan-Meier. I loro impatti prognostici saranno confrontati tra loro utilizzando il modello univariato dei rischi proporzionali di Cox. Il loro valore prognostico indipendente sarà determinato mediante analisi multivariata insieme ad altri marcatori prognostici convenzionali. Un nuovo modello predittivo sarà costruito sulla base dei fattori di rischio indipendenti derivati ​​dall'analisi multivariata. Verrà utilizzata una curva caratteristica operativa del ricevitore (ROC) per identificare il valore di cutoff.