Fibroottinen painopiste rintasyövässä

Tausta Rintasyövillä on laaja valikoima morfologisia piirteitä, joilla on osoitettu prognostinen merkitys. Näillä ominaisuuksilla on se etu, että ne on helppo arvioida rutiiniraportoinnissa; mikä tarjoaa suuren kliinisen potentiaalin. Aiemmassa analyysissämme fibroottisella fokuksella (FF) osoitettiin olevan lisäarvoa nykyiseen vaiheeseen. FF viittaa invasiivisen kasvaimen keskusarpimaiseen alueeseen, ja sitä ympäröi erittäin solumainen vyöhyke tunkeutuvia kasvainsoluja. Se koostuu fibroblasteista ja kollageenikuiduista, jotka muodostavat säteittäisesti laajenevan fibroskleroottisen ytimen, ja esiintyvyys on noin 20 %. FF:n eri komponenttien tarkka koostumus voi vaikuttaa sen ennustearvoon rintasyövässä.

Syöpään liittyvät fibroblastit (CAF) ja kollageenikomponentit ovat FF:n näkyvimmät piirteet. FF proliferatiivisen CAF:n kanssa liittyi korkeampaan metastaasiriskiin. Lisäksi fibroblastisilla markkereilla tunnistetut CAF:t korreloivat rintasyövän uusiutumisen kanssa. Rintasyövässä CAF:n eri alaryhmiä on karakterisoitu äskettäin differentiaalisilla fibroblastisilla markkereilla. Niitä esiintyi vaihtelevissa osuuksissa rintasyövän alatyypeissä ja niillä oli erilainen vaikutus immuunikasvaimen mikroympäristöön (TME). Siitä huolimatta CAF-alatyyppien ja FF:n suhde ja se, vaikuttavatko ne FF:n ennustevaikutukseen, jäävät vaikeaksi. CAF:n lisäksi kollageenisisällön voimakasta vaikutusta syöpään arvostetaan yhä enemmän. Kollageenistrooma voi moduloida immuuni-TME:tä estämällä CD8 T-lymfosyyttien infiltraatiota. Kollageenin ja muiden solunulkoisten matriisin komponenttien ilmentyminen on prognostista eri tyyppisillä syöpäpotilailla, mukaan lukien rintasyöpä. FF:n kohdalla kollageenisisällöstä puuttuu edelleen yksityiskohtainen analyysi. Selkeä kollageenikoostumus ja organisaatio voivat myös vaikuttaa FF:n ennustekykyyn. FF:n vaikutusten taustalla olevat mekanismit ovat suurelta osin tuntemattomia. Tähän mennessä on hyvin vähän raportteja rintasyöpien molekyylianalyysistä FF:n kanssa. FF on liitetty lisääntyneeseen angiogeneesiin, hypoksiamarkkerien ilmentymiseen ja hypoksian aiheuttaman tekijä-1a-reitin aktivaatioon ja vastaavasti lisääntyneeseen kasvaimeen liittyvien makrofagien (TAM) infiltraatioon. Muiden mukana olevien keskeisten biomarkkerien tutkiminen antaa lisätietoa FF-ennusteesta.

Tässä ehdotuksessa tehdään systeeminen arviointi rintasyöpien FF-ominaisuuksista. Pyrimme luonnehtimaan FF:ää eri tasoilla yksityiskohtaisesti. Lopuksi aiomme kehittää prognostisen mallin, joka integroi FF:n eri ominaisuudet tarkempaan riskikerroitukseen.

Tutkimuksen suunnittelu FF:n karakterisoimiseksi morfologisten, rakenteellisten ja molekyylisten ominaisuuksien perusteella FF:n erilaisia ​​morfologisia piirteitä tutkitaan ja korreloidaan kliinis-patologisten parametrien ja rintasyövän alatyyppien kanssa. Kollageenistrooman karakterisoimiseksi näiden eri kollageenien ilmentyminen määritetään IHC-analyysillä. Kollageenikuitujen rakenteelliset ominaisuudet määritetään SHG-signaalilla ja/tai pico-Sirius-punavärjäyksellä. Kollageenikoostumusta ja rakenteellisia ominaisuuksia verrataan tapauksissa, joissa on erilaisia ​​FF-morfologisia ominaisuuksia.

Fibroblastisten komponenttien karakterisointia varten CAF-populaatiot määritetään IHC-analyysillä. Raportoitujen CAF-fenotyyppien perusteella CAF-markkereita tutkitaan peräkkäisillä IHC-laseilla. CAF-markkerien yhteisilmentymistä arvioidaan käyttämällä useita IHC-kohdistuksia. CAF-alapopulaatioiden suhdetta FF- ja kollageeniominaisuuksiin sekä kliinis-patologisia ominaisuuksia tarkastellaan.

Ehdokkaita huippudifferentiaaligeeneistä ja FF:ään liittyvistä reiteistä tutkitaan. Ehdokkaat priorisoidaan myös julkaistujen kirjallisuustutkimusten ja niiden biologisen merkityksen perusteella.

Hierarkkinen klusterointianalyysi suoritetaan FF:n luokittelemiseksi eri ominaisuuksien perusteella. Määriteltyjen FF-alaryhmien ja kliinis-patologisten piirteiden korrelaatiota tutkitaan.

FF:n vaikutuksen määrittäminen immuuni-TME:hen Tutkiaksemme FF:n vaikutuksia immuuni-TME:hen, tutkimme useita immuunisolupopulaatioita in situ samanaikaisesti käyttämällä mIHC:tä. Potilaat ryhmitellään heidän immuunisoluprofiilinsa perusteella. Immuunisolutiheys, niiden suhteellinen suhde, immuuniprofiili ja spatiaalinen suhde kasvainsoluihin arvioidaan suhteessa FF:n eri ominaisuuksiin ja verrataan FF- ja ei-FF-tapauksia. Immuuniominaisuuksien ja FF:n vuorovaikutusta ennusteessa arvioidaan.

FF:n prognostisen arvon tutkiminen rintasyövässä. Tutkittuaan FF:n eri piirteiden kliinis-patologista korrelaatiota ja sen suhdetta kasvaimen immuuniympäristöön, niiden ennustearvo kokonaiseloonjäämiselle, uusiutumiselle ja etäpesäkkeille analysoidaan Kaplan-Meier-menetelmällä. Niiden ennustevaikutuksia verrataan toisiinsa käyttämällä yksimuuttujaa Coxin verrannollisia vaaroja. Niiden riippumaton prognostinen arvo määritetään monimuuttuja-analyysillä yhdessä muiden tavanomaisten prognostisten markkerien kanssa. Monimuuttujaanalyysistä johdettujen riippumattomien riskitekijöiden perusteella rakennetaan uusi ennustemalli. Vastaanottimen toimintakäyrää (ROC) käytetään raja-arvon tunnistamiseen.