Foco fibrótico en el cáncer de mama

Fondo Los cánceres de mama exhiben una amplia gama de características morfológicas con importancia pronóstica demostrada. Estas características tienen la ventaja de que se evalúan fácilmente en los informes de rutina; ofreciendo así un gran potencial clínico. En nuestro análisis anterior, se demostró que el foco fibrótico (FF) tiene valor agregado a la estadificación actual. FF se refiere al área central similar a una cicatriz en un tumor invasivo, y está rodeada por una zona altamente celular de células tumorales infiltrantes. Está compuesto por fibroblastos y fibras de colágeno que forman un núcleo fibroesclerótico que se expande radialmente, con una incidencia en torno al 20%. La composición precisa de los diferentes componentes dentro de FF puede afectar su valor pronóstico en el cáncer de mama.

Los fibroblastos asociados al cáncer (CAF) y los componentes de colágeno son las características más destacadas de la FF. La FF con CAF proliferativa se asoció con mayor riesgo de metástasis. Además, los CAF identificados por marcadores fibroblásticos se correlacionaron con la recurrencia del cáncer de mama. En el cáncer de mama, recientemente se han caracterizado diferentes subconjuntos de CAF mediante marcadores fibroblásticos diferenciales. Estuvieron presentes en proporciones variables en los subtipos de cáncer de mama y confirieron un impacto diferente en el microambiente tumoral inmunitario (TME). No obstante, la relación de los subtipos de CAF y FF y si afectarán el impacto pronóstico de FF sigue siendo difícil de determinar. Además del CAF, cada vez se aprecia más la potente influencia del contenido de colágeno en el cáncer. El estroma de colágeno puede modular la TME inmune al inhibir la infiltración de linfocitos T CD8. La expresión de colágeno y otros componentes de la matriz extracelular es pronóstica en diferentes tipos de pacientes con cáncer, incluido el cáncer de mama. Para FF, aún falta un análisis detallado sobre el contenido de colágeno. La distinta composición y organización del colágeno también podría afectar las capacidades de pronóstico de la FF. Los mecanismos subyacentes de los efectos de FF son en gran parte desconocidos. Hasta la fecha, existen muy pocos informes de análisis molecular de cánceres de mama con FF. La FF se ha asociado con un aumento de la angiogénesis, la expresión de marcadores de hipoxia y la activación de la vía del factor 1α inducible por la hipoxia y, en consecuencia, un aumento de la infiltración de macrófagos asociados a tumores (TAM). La exploración de otros biomarcadores clave involucrados proporcionará información adicional sobre el pronóstico de FF.

En esta propuesta se realizará una evaluación sistémica de las características de FF en cánceres de mama. Nuestro objetivo es caracterizar aún más FF en diferentes niveles en detalle. Finalmente, planeamos desarrollar un modelo de pronóstico que integre las diferentes características de FF para una estratificación de riesgo más precisa.

Diseño del estudio Para caracterizar la FF en función de las características morfológicas, estructurales y moleculares Las diferentes características morfológicas de la FF se examinarán y correlacionarán con los parámetros clínico-patológicos y los subtipos de cáncer de mama. Para caracterizar el estroma de colágeno, se determinará la expresión de estos diferentes colágenos mediante análisis IHC. Las características estructurales de las fibras de colágeno se determinarán mediante la señal SHG y/o la tinción con rojo pico-Sirius. Se comparará la composición del colágeno y las características estructurales en casos con diferentes características morfológicas de FF.

Para la caracterización de los componentes fibroblásticos, las poblaciones de CAF se determinarán mediante análisis IHC. Según los fenotipos de CAF notificados, los marcadores de CAF se examinarán en los portaobjetos IHC consecutivos. La coexpresión de los marcadores CAF se evaluará utilizando múltiples alineaciones IHC. Se examinará la relación de las subpoblaciones de CAF en las características de FF y colágeno, así como las características clínico-patológicas.

Se examinarán los candidatos de los principales genes y vías diferenciales implicados en FF. Los candidatos serán priorizados también en base a la encuesta de literatura publicada y su relevancia biológica.

Se realizará un análisis de agrupamiento jerárquico para clasificar FF en función de las diferentes características. Se investigará la correlación de los subconjuntos definidos de FF y las características clínico-patológicas.

Para determinar el impacto de FF en TME inmune Para examinar los efectos de FF en TME inmune, investigaremos varias poblaciones de células inmunes in situ simultáneamente usando mIHC. Los pacientes se agruparán en función de sus perfiles de células inmunitarias. La densidad de las células inmunitarias, su proporción relativa, el perfil inmunitario y la relación espacial con las células tumorales se evaluarán en relación con las diferentes características de FF y se compararán entre los casos de FF y los que no lo son. Se evaluará la interacción de las características inmunitarias y la FF en el pronóstico.

Investigar el valor pronóstico de la FF en el cáncer de mama. Habiendo examinado la correlación clínico-patológica de varias características de FF y su relación con el entorno inmune del tumor, se analizará su valor pronóstico sobre la supervivencia global, la recurrencia y la metástasis utilizando el método de Kaplan-Meier. Sus impactos pronósticos se compararán entre sí utilizando el modelo univariante de riesgos proporcionales de Cox. Su valor pronóstico independiente vendrá determinado por análisis multivariante junto con otros marcadores pronósticos convencionales. Se construirá un modelo predictivo novedoso basado en los factores de riesgo independientes derivados del análisis multivariante. Se utilizará una curva característica operativa del receptor (ROC) para identificar el valor de corte.