Foco fibrótico no câncer de mama

Antecedentes Os cânceres de mama exibem um amplo escopo de características morfológicas com significado prognóstico demonstrado. Esses recursos têm a vantagem de serem facilmente avaliados em relatórios de rotina; oferecendo assim grande potencial clínico. Em nossa análise anterior, o foco fibrótico (FF) demonstrou agregar valor ao estadiamento atual. FF refere-se à área semelhante a uma cicatriz central em um tumor invasivo e é cercada por uma zona altamente celular de células tumorais infiltradas. É composta por fibroblastos e fibras colágenas formando um núcleo fibroesclerótico em expansão radial, com incidência em torno de 20%. A composição precisa dos diferentes componentes dentro do FF pode afetar seu valor prognóstico no câncer de mama.

Fibroblastos associados ao câncer (CAF) e componentes de colágeno são as características mais proeminentes no FF. FF com CAF proliferativa foi associada a maior risco de metástase. Além disso, os CAFs identificados por marcadores fibroblásticos foram correlacionados com a recorrência do câncer de mama. No câncer de mama, diferentes subconjuntos de CAF por marcadores fibroblásticos diferenciais foram caracterizados recentemente. Eles estavam presentes em proporções variadas em subtipos de câncer de mama e conferiam impacto diferente no microambiente tumoral imune (TME). No entanto, a relação dos subtipos de CAF e FF e se eles afetarão o impacto prognóstico do FF permanecem indefinidos. Além do CAF, a potente influência do conteúdo de colágeno no câncer é cada vez mais apreciada. O estroma de colágeno pode modular o TME imune inibindo a infiltração de linfócitos T CD8. A expressão de colágeno e outros componentes da matriz extracelular é prognóstica em diferentes tipos de pacientes com câncer, incluindo câncer de mama. Para FF, ainda falta uma análise detalhada do conteúdo de colágeno. A composição e organização distintas do colágeno também podem afetar as capacidades prognósticas do FF. Os mecanismos subjacentes aos efeitos do FF são amplamente desconhecidos. Até o momento, existem poucos relatos de análise molecular de cânceres de mama com FF. O FF tem sido associado ao aumento da angiogênese, expressão de marcadores de hipóxia e ativação da via do fator 1α induzível por hipóxia e aumento concordante da infiltração de macrófagos associados ao tumor (TAM). A exploração de outros biomarcadores importantes envolvidos fornecerá informações adicionais sobre o prognóstico de FF.

Nesta proposta, será realizada uma avaliação sistêmica das características do FF em cânceres de mama. Nosso objetivo é caracterizar ainda mais o FF em diferentes níveis em detalhes. Por fim, planejamos desenvolver um modelo prognóstico integrando as diferentes características do FF para uma estratificação de risco mais precisa.

Desenho do estudo Caracterizar o FF com base em características morfológicas, estruturais e moleculares As diferentes características morfológicas do FF serão examinadas e correlacionadas com os parâmetros clínico-patológicos e subtipos de câncer de mama. Para caracterizar o estroma de colágeno, a expressão desses diferentes colágenos será determinada por análise de IHC. As características estruturais das fibras colágenas serão determinadas pelo sinal SHG e/ou coloração pico-Sirius red. A composição do colágeno e características estruturais em casos com diferentes características morfológicas FF serão comparadas.

Para a caracterização dos componentes fibroblásticos, as populações de CAF serão determinadas por análise de IHC. Com base nos fenótipos CAF relatados, os marcadores CAF serão examinados nas lâminas IHC consecutivas. A co-expressão de marcadores CAF será avaliada usando alinhamento múltiplo de IHC. A relação das subpopulações de CAF em FF e características de colágeno, bem como as características clínico-patológicas serão examinadas.

Serão examinados os candidatos dos principais genes diferenciais e vias implicadas no FF. Os candidatos serão priorizados também com base no levantamento das literaturas publicadas e sua relevância biológica.

A análise de agrupamento hierárquico será realizada para classificar FF com base nas diferentes características. A correlação de subconjuntos de FF definidos e características clínico-patológicas será investigada.

Para determinar o impacto do FF no TME imune Para examinar os efeitos do FF no TME imune, investigaremos várias populações de células imunes in situ simultaneamente usando mIHC. Os pacientes serão agrupados com base em seus perfis de células imunes. A densidade de células imunes, sua proporção relativa, perfil imune e relação espacial com células tumorais serão avaliadas em relação a diferentes características de FF e comparações entre casos de FF e não FF. A interação de características imunes e FF no prognóstico será avaliada.

Investigar o valor prognóstico do FF no câncer de mama. Tendo examinado a correlação clínico-patológica de várias características do FF e sua relação com o ambiente imune do tumor, seu valor prognóstico na sobrevida global, recorrência e metástase será analisado usando o método de Kaplan-Meier. Seus impactos prognósticos serão comparados entre si usando o modelo univariado de riscos proporcionais de Cox. Seu valor prognóstico independente será determinado por análise multivariada juntamente com outros marcadores prognósticos convencionais. Um novo modelo preditivo será construído com base nos fatores de risco independentes derivados da análise multivariada. Uma curva característica de operação do receptor (ROC) será usada para identificar o valor de corte.