Fibrotische focus bij borstkanker

Achtergrond Borstkanker vertoont een breed scala aan morfologische kenmerken met aangetoonde prognostische significantie. Deze functies hebben het voordeel dat ze gemakkelijk kunnen worden geëvalueerd in routinematige rapportage; en biedt dus een groot klinisch potentieel. In onze eerdere analyse werd aangetoond dat fibrotische focus (FF) een toegevoegde waarde heeft voor de huidige enscenering. FF verwijst naar het centrale littekenachtige gebied in een invasieve tumor en wordt omgeven door een zeer cellulaire zone van infiltrerende tumorcellen. Het is samengesteld uit fibroblasten en collageenvezels die een radiaal uitzettende fibrosclerotische kern vormen, met een incidentie van ongeveer 20%. De precieze samenstelling van de verschillende componenten binnen FF kan de prognostische waarde bij borstkanker beïnvloeden.

Met kanker geassocieerde fibroblasten (CAF) en collageencomponenten zijn de meest opvallende kenmerken van FF. FF met proliferatieve CAF was geassocieerd met een hoger risico op metastase. Bovendien waren CAF's geïdentificeerd door fibroblastische markers gecorreleerd met herhaling van borstkanker. Bij borstkanker zijn onlangs verschillende subsets van CAF door differentiële fibroblastische markers gekarakteriseerd. Ze waren in verschillende verhoudingen aanwezig in subtypes van borstkanker en hadden een ongelijksoortige impact op de micro-omgeving van de immuuntumor (TME). Desalniettemin blijft de relatie tussen CAF-subtypen en FF en of ze de prognostische impact van FF zullen beïnvloeden ongrijpbaar. Afgezien van CAF wordt de krachtige invloed van het collageengehalte bij kanker steeds meer gewaardeerd. Collageenstroma kan immuun-TME moduleren door de infiltratie van CD8 T-lymfocyten te remmen. De expressie van collageen en andere extracellulaire matrixcomponenten is prognostisch bij verschillende soorten kankerpatiënten, waaronder borstkanker. Voor FF ontbreekt nog een gedetailleerde analyse van het collageengehalte. De verschillende samenstelling en organisatie van collageen kan ook van invloed zijn op de prognostische mogelijkheden van FF. De onderliggende mechanismen voor effecten van FF zijn grotendeels onbekend. Tot op heden zijn er zeer weinig meldingen van moleculaire analyse van borstkanker met FF. FF is in verband gebracht met verhoogde angiogenese, expressie van hypoxiemarkers en activering van hypoxie-induceerbare factor-1α-route, en concordant verhoogde infiltratie van tumor-geassocieerde macrofagen (TAM). Onderzoek naar andere belangrijke biomarkers die hierbij betrokken zijn, zal aanvullende informatie opleveren over FF-prognosticatie.

In dit voorstel zal een systemische evaluatie van de FF-kenmerken bij borstkanker worden uitgevoerd. We streven ernaar om FF verder in detail te karakteriseren op verschillende niveaus. Ten slotte zijn we van plan om een ​​prognostisch model te ontwikkelen dat de verschillende FF-kenmerken integreert voor een nauwkeurigere risicostratificatie.

Onderzoeksopzet FF karakteriseren op basis van morfologische, structurele en moleculaire kenmerken De verschillende morfologische kenmerken van FF zullen worden onderzocht en gecorreleerd met de klinisch-pathologische parameters en subtypes van borstkanker. Om het collageen stroma te karakteriseren, zal de expressie van deze verschillende collagenen worden bepaald door middel van IHC-analyse. De structurele kenmerken van de collageenvezels zullen worden bepaald op SHG-signaal en/of pico-Sirius-rode kleuring. De collageensamenstelling en structurele kenmerken in gevallen met verschillende FF-morfologische kenmerken zullen worden vergeleken.

Voor de karakterisering van fibroblastische componenten zullen CAF-populaties worden bepaald door middel van IHC-analyse. Op basis van de gerapporteerde CAF-fenotypes zullen CAF-markers worden onderzocht op de opeenvolgende IHC-objectglaasjes. Co-expressie van CAF-markers zal worden geëvalueerd met behulp van meerdere IHC-uitlijningen. De relatie van CAF-subpopulaties met FF- en collageenkenmerken, evenals klinisch-pathologische kenmerken zullen worden onderzocht.

De kandidaten van de belangrijkste differentiële genen en routes die betrokken zijn bij FF zullen worden onderzocht. De kandidaten krijgen ook prioriteit op basis van een overzicht van gepubliceerde literatuur en hun biologische relevantie.

Hiërarchische clusteranalyse zal worden uitgevoerd om FF te classificeren op basis van de verschillende kenmerken. De correlatie van gedefinieerde FF-subsets en klinisch-pathologische kenmerken zal worden onderzocht.

Om de impact van FF in immuun-TME te bepalen Om de effecten van FF in de immuun-TME te onderzoeken, zullen we verschillende immuuncelpopulaties in situ gelijktijdig onderzoeken met behulp van mIHC. Patiënten zullen worden geclusterd op basis van hun immuuncelprofielen. De dichtheid van immuuncellen, hun relatieve verhouding, immuunprofiel en ruimtelijke relatie met tumorcellen zullen worden beoordeeld in relatie tot verschillende FF-kenmerken en vergelijken tussen FF- en niet-FF-gevallen. Het samenspel van immuunkenmerken en FF in prognose zal worden geëvalueerd.

Om de prognostische waarde van FF bij borstkanker te onderzoeken. Na de klinisch-pathologische correlatie van verschillende kenmerken van FF en zijn relatie met de tumor-immuunomgeving te hebben onderzocht, zal hun prognostische waarde op algehele overleving, recidief en metastase worden geanalyseerd met behulp van de Kaplan-Meier-methode. Hun prognostische effecten zullen met elkaar worden vergeleken met behulp van het univariate Cox-model voor proportionele risico's. Hun onafhankelijke prognostische waarde zal worden bepaald door multivariate analyse samen met andere conventionele prognostische markers. Een nieuw voorspellend model zal worden geconstrueerd op basis van de onafhankelijke risicofactoren afgeleid van de multivariate analyse. Er wordt een ROC-curve (Receiver Operating Characteristic) gebruikt om de afkapwaarde te identificeren.