Zwłóknienie ogniska w raku piersi

Wstęp Raki piersi wykazują szeroki zakres cech morfologicznych o wykazanym znaczeniu prognostycznym. Te cechy mają tę zaletę, że można je łatwo ocenić w rutynowych raportach; oferując tym samym ogromny potencjał kliniczny. W naszej wcześniejszej analizie wykazano, że skupienie zwłóknienia (FF) ma wartość dodaną do obecnego stopnia zaawansowania. FF odnosi się do centralnego obszaru przypominającego bliznę w guzie inwazyjnym i jest otoczony wysoce komórkową strefą naciekających komórek nowotworowych. Składa się z fibroblastów i włókien kolagenowych tworzących promieniście rozszerzający się rdzeń fibrosklerotyczny, z częstością około 20%. Dokładny skład różnych składników FF może wpływać na jego wartość prognostyczną w raku piersi.

Fibroblasty związane z rakiem (CAF) i składniki kolagenu są najbardziej widocznymi cechami FF. FF z proliferacyjnym CAF wiązało się z wyższym ryzykiem przerzutów. Co więcej, CAF zidentyfikowane przez markery fibroblastyczne były skorelowane z nawrotem raka piersi. W raku piersi scharakteryzowano ostatnio różne podzbiory CAF za pomocą różnicowych markerów fibroblastycznych. Występowały one w różnych proporcjach w podtypach raka piersi i wywierały różny wpływ na mikrośrodowisko odpornościowe guza (TME). Niemniej jednak związek podtypów CAF i FF oraz to, czy wpłyną one na wpływ prognostyczny FF, pozostaje nieuchwytny. Oprócz CAF coraz bardziej docenia się silny wpływ zawartości kolagenu w nowotworach. Zrąb kolagenu może modulować immunologiczny TME poprzez hamowanie naciekania limfocytów T CD8. Ekspresja kolagenu i innych składników macierzy pozakomórkowej jest prognostyczna u pacjentów z różnymi typami nowotworów, w tym z rakiem piersi. W przypadku FF nadal brakuje szczegółowej analizy zawartości kolagenu. Odrębny skład i organizacja kolagenu może również wpływać na możliwości prognostyczne FF. Mechanizmy leżące u podstaw efektów FF są w dużej mierze nieznane. Do chwili obecnej istnieje bardzo niewiele doniesień dotyczących analizy molekularnej raka piersi z użyciem FF. FF wiąże się ze zwiększoną angiogenezą, ekspresją markerów niedotlenienia i aktywacją szlaku czynnika 1α indukowanego niedotlenieniem oraz odpowiednio zwiększonym naciekiem makrofagów związanych z guzem (TAM). Eksploracja innych kluczowych biomarkerów zaangażowanych w dostarczy dodatkowych informacji na temat prognozowania FF.

W tej propozycji zostanie przeprowadzona systemowa ocena cech FF w raku piersi. Naszym celem jest dalsze szczegółowe scharakteryzowanie FF na różnych poziomach. Na koniec planujemy opracować model prognostyczny integrujący różne funkcje FF w celu dokładniejszej stratyfikacji ryzyka.

Projekt badania Charakterystyka FF na podstawie cech morfologicznych, strukturalnych i molekularnych Różne cechy morfologiczne FF zostaną zbadane i skorelowane z parametrami kliniczno-patologicznymi i podtypami raka piersi. Aby scharakteryzować zręb kolagenu, ekspresja tych różnych kolagenów zostanie określona za pomocą analizy IHC. Charakterystyka strukturalna włókien kolagenowych zostanie określona na podstawie sygnału SHG i/lub barwienia czerwienią piko-Sirius. Porównany zostanie skład i cechy strukturalne kolagenu w przypadkach o różnych cechach morfologicznych FF.

W celu scharakteryzowania składników fibroblastycznych populacje CAF zostaną określone za pomocą analizy IHC. Na podstawie zgłoszonych fenotypów CAF, markery CAF zostaną zbadane na kolejnych preparatach IHC. Współekspresja markerów CAF zostanie oceniona przy użyciu wielu dopasowań IHC. Zbadany zostanie związek subpopulacji CAF z cechami FF i kolagenu, jak również cechami kliniczno-patologicznymi.

Zbadani zostaną kandydaci z najlepszych różnicujących genów i szlaków zaangażowanych w FF. Kandydaci zostaną uszeregowani pod względem ważności również na podstawie przeglądu opublikowanej literatury i jej znaczenia biologicznego.

Hierarchiczna analiza skupień zostanie przeprowadzona w celu sklasyfikowania FF na podstawie różnych cech. Zbadana zostanie korelacja zdefiniowanych podzbiorów FF i cech kliniczno-patologicznych.

Aby określić wpływ FF na immunologiczny TME Aby zbadać wpływ FF na immunologiczny TME, zbadamy kilka populacji komórek odpornościowych in situ jednocześnie przy użyciu mIHC. Pacjenci będą grupowani na podstawie ich profili komórek odpornościowych. Gęstość komórek odpornościowych, ich względny stosunek, profil odpornościowy i przestrzenny związek z komórkami nowotworowymi zostaną ocenione w odniesieniu do różnych cech FF i porównane między przypadkami FF i nie-FF. Ocenione zostanie wzajemne oddziaływanie cech immunologicznych i FF w rokowaniu.

Zbadanie wartości prognostycznej FF w raku piersi. Po zbadaniu korelacji kliniczno-patologicznej różnych cech FF i ich związku ze środowiskiem immunologicznym guza, ich wartość prognostyczna dla przeżycia całkowitego, wznowy i przerzutów zostanie przeanalizowana przy użyciu metody Kaplana-Meiera. Ich wpływ prognostyczny zostanie porównany ze sobą za pomocą jednowymiarowego modelu proporcjonalnego hazardu Coxa. Ich niezależna wartość prognostyczna zostanie określona za pomocą analizy wieloczynnikowej wraz z innymi konwencjonalnymi markerami prognostycznymi. Nowy model prognostyczny zostanie skonstruowany w oparciu o niezależne czynniki ryzyka pochodzące z analizy wielowymiarowej. Krzywa charakterystyki działania odbiornika (ROC) zostanie wykorzystana do określenia wartości odcięcia.