Fibrotisk fokus i brystkreft

Bakgrunn Brystkreft viser et bredt spekter av morfologiske trekk med demonstrert prognostisk betydning. Disse funksjonene har fordelen av å være enkle å evaluere i rutinerapportering; gir dermed et stort klinisk potensial. I vår tidligere analyse ble fibrotisk fokus (FF) vist å ha en merverdi til den nåværende iscenesettelsen. FF refererer til det sentrale arrlignende området i en invasiv svulst, og er omgitt av en svært cellulær sone av infiltrerende tumorceller. Den er sammensatt av fibroblaster og kollagenfibre som danner en radialt ekspanderende fibrosklerotisk kjerne, med en forekomst på rundt 20 %. Den nøyaktige sammensetningen av de forskjellige komponentene i FF kan påvirke dens prognostiske verdi ved brystkreft.

Kreftassosierte fibroblaster (CAF) og kollagenkomponenter er de mest fremtredende egenskapene i FF. FF med proliferativ CAF var assosiert med høyere risiko for metastase. Dessuten var CAF-er identifisert av fibroblastiske markører korrelert med tilbakefall av brystkreft. Ved brystkreft har forskjellige undergrupper av CAF av differensielle fibroblastiske markører blitt karakterisert nylig. De var til stede i varierende proporsjoner i undertyper av brystkreft og ga ulik innvirkning på immuntumormikromiljøet (TME). Ikke desto mindre forblir forholdet mellom CAF-undertyper og FF og om de vil påvirke FF-prognostiske innvirkning unnvikende. Bortsett fra CAF, blir den kraftige påvirkningen av kollageninnhold i kreft stadig mer verdsatt. Kollagenstroma kan modulere immun-TME ved å hemme CD8 T-lymfocyttinfiltrasjon. Uttrykket av kollagen og andre ekstracellulære matrisekomponenter er prognostisk hos forskjellige typer kreftpasienter, inkludert brystkreft. For FF mangler fortsatt detaljert analyse av kollageninnholdet. Den distinkte kollagensammensetningen og organiseringen kan også påvirke de prognostiske evnene til FF. De underliggende mekanismene for effekter av FF er stort sett ukjente. Til dags dato er det svært få rapporter om molekylær analyse av brystkreft med FF. FF har vært assosiert med økt angiogenese, hypoksimarkøruttrykk og aktivering av hypoksi-induserbar faktor-1α-vei, og samtidig økt tumorassosiert makrofag (TAM) infiltrasjon. Utforskning av andre viktige biomarkører involvert i vil gi ytterligere informasjon om FF-prognose.

I dette forslaget vil det bli utført en systemisk evaluering av FF-trekk ved brystkreft. Vi tar sikte på å karakterisere FF på ulike nivåer i detalj. Til slutt planlegger vi å utvikle en prognostisk modell som integrerer de forskjellige FF-funksjonene for en mer nøyaktig risikostratifisering.

Studiedesign For å karakterisere FF basert på morfologiske, strukturelle og molekylære egenskaper De forskjellige morfologiske egenskapene til FF vil bli undersøkt og korrelert med de klinisk-patologiske parametrene og brystkreftsubtypene. For å karakterisere kollagenstroma, vil uttrykket av disse forskjellige kollagenene bli bestemt ved IHC-analyse. De strukturelle egenskapene til kollagenfibrene vil bli bestemt på SHG-signal og/eller pico-Sirius rødfarging. Kollagensammensetningen og strukturelle trekk i tilfeller med forskjellige FF morfologiske trekk vil bli sammenlignet.

For karakterisering av fibroblastiske komponenter vil CAF-populasjoner bli bestemt ved IHC-analyse. Basert på de rapporterte CAF-fenotypene, vil CAF-markører bli undersøkt på de påfølgende IHC-slidene. Samuttrykk av CAF-markører vil bli evaluert ved bruk av flere IHC-justeringer. Forholdet mellom CAF-subpopulasjoner på FF- og kollagenegenskaper så vel som klinisk-patologiske egenskaper vil bli undersøkt.

Kandidatene fra topp differensielle gener og veier implisert i FF vil bli undersøkt. Kandidatene vil bli prioritert også basert på kartlegging av publisert litteratur og deres biologiske relevans.

Hierarkisk klyngeanalyse vil bli utført for å klassifisere FF basert på de forskjellige funksjonene. Korrelasjonen mellom definerte FF-undersett og klinisk-patologiske trekk vil bli undersøkt.

For å bestemme virkningen av FF i immun-TME For å undersøke effekten av FF i immun-TME, vil vi undersøke flere immuncellepopulasjoner in situ samtidig ved å bruke mIHC. Pasienter vil bli gruppert basert på deres immuncelleprofiler. Immuncellenes tetthet, deres relative forhold, immunprofil og romlig forhold til tumorceller vil bli vurdert i forhold til ulike FF-trekk og sammenligne mellom FF- og ikke-FF-tilfeller. Samspillet mellom immunfunksjoner og FF i prognose vil bli evaluert.

For å undersøke den prognostiske verdien av FF i brystkreft. Etter å ha undersøkt den klinisk-patologiske korrelasjonen mellom ulike trekk ved FF og dets forhold til tumorimmunmiljø, vil deres prognostiske verdi på total overlevelse, tilbakefall og metastase analyseres ved bruk av Kaplan-Meier-metoden. Deres prognostiske virkninger vil bli sammenlignet med hverandre ved å bruke univariat Cox proporsjonal faremodell. Deres uavhengige prognostiske verdi vil bli bestemt ved multivariat analyse sammen med andre konvensjonelle prognostiske markører. En ny prediktiv modell vil bli konstruert basert på de uavhengige risikofaktorene utledet fra den multivariate analysen. En mottakerdriftskarakteristikk (ROC) kurve vil bli brukt for å identifisere grenseverdien.