Trigger Timing i ovariestimuleringer

Formålet med denne undersøgelse er at udføre et enkelt center klinisk forsøg for at undersøge, om forsinkelse to dages udløsning vil give flere embryoner af god kvalitet end almindelig triggertiming i ovariestimuleringer ved antagonistprotokol i in vitro fertilisering. Hvilket yderligere kan forbedre den kumulative levende fødselsrate (CLBR). Resultaterne af denne undersøgelse vil hjælpe infertile par og klinikere med at kende og vælge den optimale behandling i antagonistprotokollen.

Vi planlægger et enkelt center, åbent, randomiseret kontrolleret klinisk forsøg (1:1 behandlingsforhold). På dagen for den almindelige triggertimingsdag (tre follikler når 17 mm) eller to dage senere. 36-38 timer efter trigger vil oocytudvinding blive anvendt i begge grupper med samme protokol. Derefter vil IVF/ICSI og embryokultur med standardprotokol i assisterede reproduktive behandlinger i vores center blive implementeret tilsvarende. Oplysninger om alle deltagere og resultater registreres i case-rapporten. Flowdiagrammet fulgte SPIRIT-tjeklisten, der viste tilmelding, tildeling, behandling og opfølgning af deltagere.

Inklusionskriterier:

• Alder: ≥18 og <35 år
• Antal antral follikel (AFC): ≥5 og <20
• Anti-mullerian hormon (AMH): ≥1,1 ng/mL og <2,5 ng/mL
• Kropsmasseindeks (BMI): ≥18,5 kg/m2 og <29 kg/m2
• Første eller anden ART-cyklus
• Regelmæssige menstruationscyklusser (mellem 22 og 35 dage)
• To æggestokke til stede
• Planlagt til enkelt eller dobbelt dag 3 transfer
• Infertile par planlagt til deres første IVF/ICSI-cyklus med fast antagonistprotokol.
• Informeret samtykke opnået.

Eksklusionskriterier:

• Kvinder med kontraindikation for IVF eller ICSI, såsom dårligt kontrolleret type 1 eller type 2 diabetes mellitus; udiagnosticeret leversygdom eller dysfunktion (baseret på serum leverenzymtestresultater); nyresygdom eller unormal serumnyrefunktion; betydelig anæmi; anamnese med dyb venøs trombose, lungeemboli eller cerebrovaskulær ulykke; ukontrolleret hypertension eller kendt symptomatisk hjertesygdom; historie med (eller mistanke om) cervikal carcinom, endometriecarcinom eller brystcarcinom; og udiagnosticeret vaginal blødning.
• Tidligere dårlig ovarierespons (<4 oocytter hentet) med en maksimal dosis ovariestimulering (OS) (≥300 IE/dag) eller ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS), uanset gonadotropindosis
• Kendte årsager til nedsat implantation (dvs. hydrosalpinx, fibroid, der forvrænger endometriehulen, Ashermans syndrom, trombofili eller endometrietuberkulose)
• Gentagne aborter (>2 tidligere biokemiske graviditeter eller >2 spontane aborter)
• Tilbagevendende implantationsfejl (>3 mislykkede cyklusser med embryoner af god kvalitet)
• Polycystisk ovariesyndrom (PCOS)
• Ubehandlet skjoldbruskkirtelfunktion
• Administration af eksogene E2, P4 eller gonadotropiner i den forudgående menstruationscyklus
• Aktiv kvindelig rygning
• Igangværende graviditet
• Kvinder, der tidligere har tilmeldt sig forsøget
• Dem, der ikke er i stand til at forstå undersøgelsens karakter af den foreslåede undersøgelse
• enten mandlig partner eller kvindelig partner skal modtage donorsæd eller donoræg.
• Enten mandlig partner eller kvindelig partner skal modtage præimplantation genetisk diagnose (PGD) og præimplantation genetisk screening (PGS).

Tilbagetrækningskriterier:

• Deltagere, der ikke er villige til at fortsætte forsøgsprocedurerne eller trække det informerede samtykke tilbage.
• Deltagere, der synes dårlig efterlevelse under forsøget, og forskere bekræfter, at det er nødvendigt at afbryde deres undersøgelse.
• Tab til opfølgning. Rekruttering Infertile par, der kommer til ambulatoriet, vil blive screenet som en del af rutinemæssig vurdering af uddannet klinisk team, som er meget fortrolige med de berettigede kriterier. Kvalificerede patienter vil derefter blive kontaktet af et medlem af forskerholdet og forklaret forsøgsdetaljerne før kontrolleret ovariehyperstimulering (COH). Efter denne information vil par blive tilbudt tid til overvejelse for at beslutte at deltage i forsøget. Hvis parret accepterer at deltage, aftaler de at underskrive samtykket før COH. Par, der nægter at deltage, vil modtage konventionel pleje. En individuel fortegnelse over alle ikke-rekrutterede patienter og årsager til udelukkelse vil blive indhentet og opbevaret.

Kontrolleret ovariehyperstimulering Alle patienter vil modtage en fast antagonistprotokol for COH-behandling, som udføres af standardrutiner på hvert studiecenter. Behandlingen starter på dag 2 eller dag 3 i den spontane menstruationscyklus, og baseline bækken-ultralyd samt basale serumhormoner (såsom FSH, luteiniserende hormon (LH), progesteron (P) og β-hCG) vil blive testet for at bekræfte folic status. Alle deltagere vil blive subkutant injiceret rFSH. Den initiale dosis af rFSH er 200 IE, og den efterfølgende dosis vil blive justeret i henhold til ovariestatus. Transvaginal B-mode ultralyd, urin LH og serum E2 vil blive testet for at overvåge follikelvækst. På dag 5 af stimulation vil GnRH-antagonist 0,25 mg dagligt blive administreret subkutant indtil udløsningsdagen (inkluder triggerdagen). Gruppe A af trigger er 3 eller flere follikler når en diameter ≥17 mm, gruppe B af trigger er 2 dage senere end gruppe A med kontinuerligt Gn. For alle patienter vil GnRH-agonist 0,2 + hCG 2000 IE blive injiceret én gang på triggerdagen.

Oocytudtagning og forberedelse Oocytudtagning er planlagt til 36 timer (±2) efter hCG-injektion. Rutinemæssig oocytopsamling udføres under transvaginal ultralydsvejledning via 17G oocytaspirationsnål med brug af intravenøs sedation. De hentede cumulus oocytkomplekser (COC) vil blive allokeret til at gennemgå konventionel IVF eller ICSI. For begge grupper placeres COC'erne i dyrkningsmedium dækket af letvægts paraffinolie og inkuberes i en befugtet 37℃,5% CO2-inkubator efter oocytudvinding med det samme. Udover dette inkuberes COC'erne i 2-6 timer før insemination eller injektion. For gruppe B (ICSI-gruppe) vil oocytterne blive blottet af hyaluronidase før mikromanipulation. Kun de modne, metafase-Ⅱ(MⅡ) oocytter med en ekstruderet første polær krop mikroinjiceres.

Vurdering af befrugtning og embryokvalitet Vurdering af befrugtning udføres ca. 16-18 timer (dag 1) efter befrugtning. Oocytter klassificeres som befrugtede, hvis to pronuclei (2PN) er til stede, og det andet polære legeme er blevet ekstruderet. Andre oocytter er klassificeret som unormalt befrugtede (0PN, 1PN, 3PN). Normal befrugtningshastighed vil altid blive beregnet som tallet 2PN over antallet af COC'er, uafhængigt af nuklear modenhed, såvel for IVF som for ICSI. Efter evalueringen på dag 1 efterlades zygoter i kultur i yderligere 48 timer, og spaltningsembryokvaliteten vil blive observeret 72 (dag 3) timer efter oocytudtagning. Embryonerne bedømmes i henhold til kvaliteten, antallet, størrelsen af ​​blastomererne og mængden af ​​anukleatfragmentering som følger kriterier: Grad 1 embryoner består af symmetriske blastomerer af omtrent samme størrelse og uden anukleatfragmenter. Grad 2 embryoner havde blastomerer af jævn eller ujævn størrelse og har <10 % af volumenet af embryoner fyldt med anukleatfragmenter. Grad 3-embryoner har anukleatfragmenter, der optager mellem 10% og 50% af embryonernes volumen. Grad 4 embryoner har anukleatfragmenter > 50 % af embryonernes volumen.

Embryooverførsel og luteal støtte Alle cyklusser fryses alle cyklusser. Evaluering af graviditet Urin og blod-hCG vil blive målt 14 dage efter embryooverførsel, og positive resultater indikerer biokemisk graviditet. Hvis svangerskabssækken observeres med ultralyd 7 uger efter overførsel, vil klinisk graviditet blive bekræftet. Igangværende graviditet er defineret ved tilstedeværelsen af ​​en svangerskabssæk med føtal hjerteslag efter 12 ugers graviditet.

Opfølgning For kvinder, der ikke er diagnosticeret gravide i den indledende cyklus, vil de blive betragtet som et negativt resultat i vores forsøg, og efterfølgende blive behandlet endnu en IVF/ICSI-cyklus eller vurderet som ikke egnet til yderligere ART, baseret på lægens beslutning .

For kvinder, der er konfirmeret som igangværende graviditet, arrangerer vi 3 telefonsamtaler under graviditeten via specifikke uddannede sygeplejersker. Ved 12 uger, 28 uger og 37 uger af graviditeten (med hensyn til graviditet i første trimester, graviditet i andet trimester og graviditet i tredje trimester), vil graviditetskomplikationer og fosteroplysninger blive indsamlet og registreret for at udfylde sagsrapportformularen (CRF) omfattende.

Deltagerne skal underrette forskerne om leveringstidspunktet. Inden for 2 uger efter fødslen vil leveringsoplysningerne (gestationsalder, leveringsmåde, placentaabnormalitet og/eller fødselskomplikationer), spædbarnsoplysninger (såsom køn, fødselsvægt, fødselsdefekt) blive indsamlet ved at udfylde formularer designet til dette besøg.

Efter indhentet informeret samtykke bør forskerne indsamle de demografiske karakteristika, lægejournalen og vitale tegn fra deltagerne, herunder fødselsdato, alder, højde, vægt, husstandsindkomst og erhverv for demografiske karakteristika; sygdomshistorie, operationshistorie og personlig historie til journal; kropstemperatur og blodtryk for vitale tegn.

Baselinekarakteristika for patientens supplerende undersøgelse, såsom røntgenbillede af thorax, elektrokardiogram (EKG), leverenzym, nyrefunktion, HBV/HCV/HIV-negativ status, syfilispåvisning, et al.

Under undersøgelsesprocedurerne bør der indhentes laboratorietests for at bekræfte de kvalificerede kriterier og indsamle undersøgelsesoplysninger, herunder serumkønshormon (E2, LH, FSH, PRL, P, T), ultralyd, sædanalyse og graviditetstest. Andre laboratorieindekser vil blive testet under konventionel klinisk behandling, men ikke registreret i vores undersøgelse.

Statistiske planer To-Sample T-Test Power Analyse Numeriske resultater for To-Sample T-Test Nulhypotese: Middel1=Mean2. Alternativ hypotese: Mean1<Mean2 Standardafvigelserne blev antaget at være ukendte og lige store. Allokeringseffekt N1 N2 Forhold Alfa Beta Middel1 Middel2 S1 S2 0,90041 354 354 1,000 0,02500 0,09959 5,2 6,2 4,1 4,1 Rapportdefinitioner Power er sandsynligheden for at afvise en falsk nul hypose. Strøm skal være tæt på én.

N1 og N2 er antallet af stikprøver fra hver population. For at bevare ressourcerne bør de være små.

Alfa er sandsynligheden for at forkaste en sand nulhypotese. Den skal være lille.

Beta er sandsynligheden for at acceptere en falsk nulhypotese. Den skal være lille.

Middel1 er gennemsnittet af population 1 og 2 under nulhypotesen om lighed. Middel 2 er gennemsnittet af population 2 under den alternative hypotese. Middelværdien af ​​population 1 er uændret.

S1 og S2 er populationens standardafvigelser. De repræsenterer variabiliteten i populationerne.

Sammenfattende udsagn Gruppestikprøvestørrelser på 354 og 354 opnår 90 % magt til at detektere en forskel på -1,0 mellem nulhypotesen om, at begge gruppemiddelværdier er 5,2 og den alternative hypotese, at middelværdien af ​​gruppe 2 er 6,2 med estimerede gruppestandardafvigelser på 4,1 og 4.1 og med et signifikansniveau (alfa) på 0,02500 ved anvendelse af en ensidig to-sample t-test. I betragtning af en frafaldsrate på 15 % i undersøgelsen vil 834 patienter blive inkluderet.