Laukaisuajastus munasarjastimulaatioissa

Tämän tutkimuksen tavoitteena on suorittaa yhden keskuksen kliininen koe, jossa selvitetään, saadaanko kaksi päivää viivyttämällä laukaisua enemmän hyvälaatuisia alkioita kuin säännöllinen laukaisuajoitus munasarjojen stimulaatioissa antagonistiprotokollalla in vitro -hedelmöityksessä. Mikä voi edelleen parantaa kumulatiivista elävää syntyvyyttä (CLBR). Tämän tutkimuksen tulokset auttavat hedelmättömiä pariskuntia ja kliinikkoja tuntemaan ja valitsemaan optimaalisen hoidon antagonistiprotokollassa.

Suunnittelemme yhden keskuksen, avoimen, satunnaistetun kontrolloidun kliinisen tutkimuksen (hoitosuhde 1:1). Tavallisen laukaisuajoituspäivänä (kolme follikkelia saavuttaa 17 mm) tai kaksi päivää myöhemmin. 36-38 tuntia laukaisun jälkeen oosyyttien hakua sovelletaan molemmissa ryhmissä samalla protokollalla. Sitten IVF/ICSI ja alkioviljely vakioprotokollalla avusteisissa lisääntymishoidoissa keskuksessamme toteutetaan samalla tavalla. Kaikkien osallistujien tiedot ja tulokset kirjataan tapausraporttilomakkeeseen. Vuokaavio seurasi SPIRIT-tarkistuslistaa, joka näyttää osallistujien ilmoittautumisen, jakamisen, hoidon ja seurannan.

Sisällyttämiskriteerit:

• Ikä: ≥18 ja <35 vuotta vanha
• Antraalinen follikkelimäärä (AFC): ≥5 ja <20
• Anti-Muller-hormoni (AMH): ≥1,1 ng/ml ja <2,5 ng/ml
• Painoindeksi (BMI): ≥18,5 kg/m2 ja <29 kg/m
• Ensimmäinen tai toinen ART-sykli
• Säännölliset kuukautiskierrot (22-35 päivää)
• Kaksi munasarjaa läsnä
• Suunniteltu yhden tai kahden päivän 3 siirtoon
• Hedelmättömille pariskunnille on suunniteltu ensimmäinen IVF/ICSI-sykli kiinteällä antagonistiprotokollalla.
• Tietoinen suostumus saatu.

Poissulkemiskriteerit:

• Naiset, joilla on vasta-aihe IVF- tai ICSI-hoitoon, kuten huonosti kontrolloitu tyypin 1 tai tyypin 2 diabetes; diagnosoimaton maksasairaus tai toimintahäiriö (seerumin maksaentsyymitestien tulosten perusteella); munuaissairaus tai epänormaali seerumin munuaisten toiminta; merkittävä anemia; anamneesissa syvä laskimotukos, keuhkoembolia tai aivoverenkiertohäiriö; hallitsematon verenpainetauti tai tunnettu oireinen sydänsairaus; aiempi (tai epäilty) kohdunkaulan karsinooma, kohdun limakalvosyöpä tai rintasyöpä; ja diagnosoimaton emättimen verenvuoto.
• Aikaisempi huono munasarjojen vaste (alle 4 munasolua saatu) maksimiannoksella munasarjojen stimulaatiota (OS) (≥ 300 IU/vrk) tai munasarjojen hyperstimulaatio-oireyhtymää (OHSS) gonadotropiiniannoksesta riippumatta
• Tunnetut syyt heikentyneelle implantaatiolle (esim. hydrosalpinx, endometriumin onteloa vääristävä fibroidi, Ashermanin oireyhtymä, trombofilia tai kohdun limakalvon tuberkuloosi)
• Toistuvat keskenmenot (> 2 aiempaa biokemiallista raskautta tai > 2 spontaania keskenmenoa)
• Toistuva implantaatiohäiriö (> 3 epäonnistunutta sykliä hyvälaatuisilla alkioilla)
• Munasarjojen monirakkulatauti (PCOS)
• Hoitamaton kilpirauhasen vajaatoiminta
• Eksogeenisten E2-, P4- tai gonadotropiinien antaminen edeltävän kuukautiskierron aikana
• Aktiivinen naisten tupakointi
• Jatkuva raskaus
• Naiset, jotka ovat aiemmin ilmoittautuneet kokeeseen
• Ne, jotka eivät pysty ymmärtämään ehdotetun tutkimuksen tutkivaa luonnetta
• joko mies- tai naispartnerin on saatava luovuttajan siittiöitä tai munasoluja.
• Joko mies- tai naiskumppanin on saatava preimplantaatiogeenidiagnoosi (PGD) ja preimplantaatiogeneettinen seulonta (PGS).

Peruuttamiskriteerit:

• Osallistujat, jotka eivät ole halukkaita jatkamaan koemenettelyjä tai peruuttamaan tietoon perustuvaa suostumusta.
• Osallistujat, jotka vaikuttavat heikosti noudattavan kokeen aikana, ja tutkijat vahvistavat, että heidän tutkimuksensa on keskeytettävä.
• Tappio seurannassa. Rekrytointi Poliklinikalle saapuvat hedelmättömät pariskunnat seulotaan osana rutiiniarviointia koulutetussa kliinisessä tiimissä, joka tuntee hyvin tukikelpoiset kriteerit. Tämän jälkeen tutkimusryhmän jäsen ottaa yhteyttä kelpoisiin potilaisiin ja selittää tutkimuksen yksityiskohdat ennen kontrolloitua munasarjojen hyperstimulaatiota (COH). Tämän tiedon jälkeen pariskunnille tarjotaan aikaa harkita osallistumista tutkimukseen. Jos pariskunta suostuu osallistumaan, he sopivat ajan allekirjoittamaan suostumuksen ennen COH:ta. Pariskunnat, jotka kieltäytyvät osallistumasta, saavat tavanomaista hoitoa. Kaikista rekrytoimattomista potilaista ja poissulkemisen syistä hankitaan ja säilytetään henkilökohtainen tietue.

Kontrolloitu munasarjojen hyperstimulaatio Kaikki potilaat saavat kiinteän COH-hoidon antagonistiprotokollan, joka suoritetaan vakiorutiinien mukaisesti kussakin tutkimuskeskuksessa. Hoito aloitetaan spontaanien kuukautiskierron päivänä 2 tai 3, ja lantion alueen ultraäänitutkimus sekä seerumin perushormonit (kuten FSH, luteinisoiva hormoni (LH), progesteroni (P) ja β-hCG) testataan. vahvistaaksesi foolihapon tilan. Kaikille osallistujille annetaan ihonalainen rFSH-injektio. rFSH:n aloitusannos on 200 IU ja seuraava annos sovitetaan munasarjojen tilan mukaan. Transvaginaalinen B-moodin ultraääni, virtsan LH ja seerumi E2 testataan follikkelien kasvun seuraamiseksi. Stimulaatiopäivänä 5 GnRH-antagonistia 0,25 mg päivässä annetaan ihonalaisesti laukaisupäivään asti (mukaan lukien laukaisupäivä). Liipaisimen ryhmä A on, kun 3 tai useampi follikkelia saavuttaa halkaisijan ≥17 mm, laukaisinryhmä B on 2 päivää myöhemmin kuin ryhmä A, jossa on jatkuvasti Gn. Kaikille potilaille GnRH-agonisti 0,2 + hCG 2000IU pistetään kerran käynnistyspäivänä.

Munasolujen talteenotto ja valmistelu Munasolujen haku on suunniteltu 36 tunnin (±2) hCG-injektion jälkeen. Rutiininomainen oosyyttien poiminta suoritetaan transvaginaalisen ultraääniohjauksen alaisuudessa 17G munasolun aspiraationeulan avulla käyttämällä suonensisäistä sedaatiota. Haettavat cumulus-oosyyttikompleksit (COC) allokoidaan tavanomaiseen IVF- tai ICSI-hoitoon. Molempien ryhmien COC:t asetetaan viljelyalustaan, joka on peitetty kevyellä parafiiniöljyllä, ja inkuboidaan kostutetussa 37 ℃,5 % CO2-inkubaattorissa heti munasolun talteenoton jälkeen. Tämän lisäksi yhdistelmäehkäisytabletteja inkuboidaan 2-6 tuntia ennen inseminaatiota tai injektiota. Ryhmässä B (ICSI-ryhmä) munasolut denudoidaan hyaluronidaasilla ennen mikromanipulaatiota. Vain kypsät, metafaasi-Ⅱ(MⅡ)-oosyytit, joissa on ekstrudoitu ensimmäinen polaarinen kappale, mikroinjektoidaan.

Hedelmöityksen ja alkion laadun arviointi Hedelmöityksen arviointi suoritetaan noin 16-18h (päivä 1) hedelmöityksen jälkeen. Oosyytit luokitellaan hedelmöittyneiksi, jos niissä on kaksi pronukleusta (2PN) ja toinen polaarinen kappale on puristettu. Muut munasolut luokitellaan epänormaalisti hedelmöittyneiksi (0PN, 1PN, 3PN). Normaali lannoitusaste lasketaan aina 2PN-lukuna yhdistelmäehkäisytablettien lukumäärästä riippumatta ytimen kypsyydestä, sekä IVF:ssä että ICSI:ssä. Päivän 1 arvioinnin jälkeen tsygootit jätetään viljelmään vielä 48 tunniksi, ja pilkkoutuvan alkion laatua tarkkaillaan 72 (päivä 3) tunnin kuluttua munasolun talteenoton jälkeen. Alkiot pisteytetään blastomeerien laadun, lukumäärän, koon ja nukleaattifragmentaation määrän perusteella seuraavien kriteerien mukaisesti: Asteen 1 alkiot koostuvat suunnilleen samankokoisista symmetrisistä blastomeereistä, joissa ei ole nukleaattifragmentteja. Asteen 2 alkioissa oli tasaisen tai epätasaisen kokoisia blastomeereja ja <10 % alkioiden tilavuudesta on täynnä tumakappaleita. Asteen 3 alkioissa on tumafragmentteja, jotka kattavat 10-50 % alkioiden tilavuudesta. Asteen 4 alkioissa on tumafragmentteja > 50 % alkioiden tilavuudesta.

Alkionsiirto ja luteaalituki Kaikki syklit jäädytetään. Raskauden arviointi Virtsan ja veren hCG mitataan 14 päivää alkionsiirron jälkeen, ja positiiviset tulokset viittaavat biokemialliseen raskauteen. Jos raskauspussi havaitaan ultraäänellä 7 viikkoa siirron jälkeen, kliininen raskaus varmistuu. Jatkuva raskaus määritellään raskauspussin läsnäololla ja sikiön sydämenlyönnillä 12 raskausviikon jälkeen.

Seuranta Jos naiset, joita ei ole diagnosoitu raskaana alkusyklin aikana, heidän tuloksensa katsotaan negatiiviseksi tutkimuksessamme, ja sen jälkeen heidät hoidetaan toisella IVF/ICSI-jaksolla tai heidät arvioidaan sopimattomiksi jatkohoitoon lääkärin päätöksen perusteella. .

Naisille, joiden raskaus on vahvistettu, järjestämme raskauden aikana 3 puhelinhaastattelua koulutettujen sairaanhoitajien kautta. Raskausviikolla 12, 28 ja 37 raskausviikolla (ensimmäisen raskauskolmanneksen, toisen raskauskolmanneksen ja kolmannen raskauskolmanneksen raskauden osalta) raskauden komplikaatioita ja sikiötietoja kerätään ja kirjataan tapausraporttilomakkeen täyttämiseksi. (CRF) kattavasti.

Osallistujien tulee ilmoittaa tutkijoille toimitusaika. Kahden viikon kuluessa synnytyksestä kerätään synnytystiedot (raskausikä, synnytystapa, istukan poikkeavuus ja/tai synnytyskomplikaatiot), vauvatiedot (kuten sukupuoli, syntymäpaino, syntymävika) täyttämällä tätä käyntiä varten suunniteltuja lomakkeita.

Saatuaan tietoisen suostumuksen tutkijoiden tulee kerätä osallistujilta demografiset ominaisuudet, sairauskertomus ja elintärkeät tiedot, mukaan lukien syntymäaika, ikä, pituus, paino, kotitalouden tulot ja ammatti demografisten ominaisuuksien perusteella. sairaushistoria, leikkaushistoria ja henkilökohtainen historia sairauskertomusta varten; kehon lämpötila ja verenpaine elintoimintojen kannalta.

Potilaan lisätutkimuksen perusominaisuudet, kuten rintakehän röntgenkuva, elektrokardiogrammi (EKG), maksaentsyymi, munuaisten toiminta, HBV/HCV/HIV-negatiivinen tila, kupan havaitseminen jne.

Tutkimustoimenpiteiden aikana tulee hankkia laboratoriokokeet kelvollisten kriteerien vahvistamiseksi ja tutkimustietojen keräämiseksi, mukaan lukien seerumin sukupuolihormoni (E2, LH, FSH, PRL, P, T), ultraääni, siemennesteanalyysi ja raskaustesti. Muut laboratorioindeksit testataan tavanomaisen kliinisen hoidon aikana, mutta niitä ei kirjata tutkimukseemme.

Tilastosuunnitelmat Kahden otoksen T-testin tehoanalyysin numeeriset tulokset kahden otoksen T-testin nollahypoteesille: Keskiarvo1=Keskiarvo2. Vaihtoehtoinen hypoteesi: Keskiarvo1<Keskiarvo2 Keskihajonnan oletettiin olevan tuntematon ja yhtä suuri. Jakoteho N1 N2 Suhde Alfa Beta Keskiarvo 1 Keskiarvo 2 S1 S2 0,90041 354 354 1,000 0,02500 0,09959 5,2 6,2 4,1 4,1 Raporttimääritelmät Teho on todennäköisyys, että väärä nollahypoteesi hylätään. Tehon tulee olla lähellä yhtä.

N1 ja N2 ovat kustakin perusjoukosta otettujen kohteiden lukumäärä. Resurssien säästämiseksi niiden tulee olla pieniä.

Alfa on todellisen nollahypoteesin hylkäämisen todennäköisyys. Sen pitäisi olla pieni.

Beta on väärän nollahypoteesin hyväksymisen todennäköisyys. Sen pitäisi olla pieni.

Keskiarvo1 on populaatioiden 1 ja 2 keskiarvo tasa-arvon nollahypoteesin alla. Keskiarvo2 on populaation 2 keskiarvo vaihtoehtoisen hypoteesin mukaan. Väestön 1 keskiarvo on ennallaan.

S1 ja S2 ovat perusjoukon keskihajontoja. Ne edustavat populaatioiden vaihtelua.

Yhteenvetolausunnot Ryhmän otoskoot 354 ja 354 saavuttavat 90 %:n tehon havaita ero -1,0 nollahypoteesin, jonka mukaan molemmat ryhmän keskiarvot ovat 5,2, ja vaihtoehtoisen hypoteesin välillä, jonka mukaan ryhmän 2 keskiarvo on 6,2 arvioitujen ryhmän keskihajonnan ollessa 4,1 ja 4.1 ja merkitsevyystasolla (alfa) 0,02500 käyttämällä yksipuolista kaksiotosta t-testiä. Kun otetaan huomioon 15 %:n keskeyttämisprosentti tutkimuksessa, mukaan otetaan 834 potilasta.