卵巣刺激のトリガータイミング

この研究の目的は、体外受精におけるアンタゴニストプロトコルによる卵巣刺激において、トリガーの2日間の遅延が通常のトリガータイミングよりも多くの良質の胚を得るかどうかを研究するために、単一センターの臨床試験を実施することです。 これにより、累積生児出生率（CLBR）がさらに改善される可能性があります。 この研究の結果は、不妊症のカップルや臨床医がアンタゴニスト プロトコルで最適な治療法を知り、選択するのに役立ちます。

私たちは、単一センター、非盲検、ランダム化比較臨床試験 (1:1 の治療比率) を計画しています。 通常のトリガータイミングの日（3 つの卵胞が 17mm に達した日）またはその 2 日後。 トリガーから 36 ～ 38 時間後に、両方のグループで同じプロトコルで採卵が適用されます。 その後、当センターでの生殖補助医療の標準プロトコルによる体外受精/ICSIおよび胚培養が同様に実施されます。 すべての参加者と結果の情報は、症例報告フォームに記録されます。 フローチャートは、参加者の登録、割り当て、治療、およびフォローアップを示す SPIRIT チェックリストに従いました。

包含基準:

• 年齢: 18 歳以上 35 歳未満
• 胞状卵胞数（AFC）：5以上20未満
• 抗ミュラー管ホルモン (AMH): ≥1.1 ng/mL かつ <2.5 ng/mL
• 体格指数 (BMI): ≥18.5 Kg/m2 かつ <29 Kg/m
• 1 回目または 2 回目の ART サイクル
• 定期的な月経周期 (22 日から 35 日の間)
• 卵巣が2つある
• シングルまたはダブルの 3 日目の転送を計画
• 不妊症のカップルは、アンタゴニスト プロトコルが固定された最初の IVF/ICSI サイクルが予定されています。
• インフォームドコンセントを得た。

除外基準:

• -制御が不十分な1型または2型糖尿病など、IVFまたはICSIが禁忌の女性;未診断の肝疾患または機能障害（血清肝酵素検査結果に基づく）;腎疾患または異常な血清腎機能;重大な貧血; -深部静脈血栓症、肺塞栓症または脳血管障害の病歴;コントロールされていない高血圧または既知の症候性心疾患;子宮頸がん、子宮内膜がんまたは乳がんの（または疑われる）病歴;診断されていない性器出血。
• -卵巣刺激（OS）の最大用量（≥300 IU /日）または卵巣過剰刺激症候群（OHSS）を伴う卵巣反応不良（回収された卵母細胞が4個未満）の以前の病歴、性腺刺激ホルモンの投与量に関係なく
• 着床障害の既知の理由 (つまり、 卵管水腫、子宮内膜腔を歪める筋腫、アッシャーマン症候群、血栓形成傾向または子宮内膜結核)
• 流産の繰り返し（2回以上の生化学的妊娠または2回以上の自然流産）
• 着床失敗の繰り返し (良質の胚で 3 回以上の失敗サイクル)
• 多嚢胞性卵巣症候群 (PCOS)
• 未治療の甲状腺機能障害
• 前の月経周期における外因性E2、P4またはゴナドトロピンの投与
• アクティブな女性の喫煙
• 妊娠中
• 以前に試験に登録した女性
• 提案された研究の調査的性質を理解できない人
• 男性パートナーまたは女性パートナーのいずれかがドナー精子またはドナー卵子を受け取る必要があります。
• 男性パートナーまたは女性パートナーのいずれかが、着床前遺伝子診断 (PGD) および着床前遺伝子スクリーニング (PGS) を受けなければなりません。

出金基準:

• -治験手順を継続したくない、またはインフォームドコンセントを撤回したくない参加者。
• 試験中のコンプライアンスが不十分であると思われる参加者、および研究者は、研究を中止する必要があることを確認します。
• フォローアップの損失。 募集 外来診療所に来る不妊症のカップルは、適格な基準に精通している訓練を受けた臨床チームによる定期的な評価の一環としてスクリーニングされます。 適格な患者は、研究チームのメンバーから連絡を受け、制御された卵巣過剰刺激（COH）の前に試験の詳細を説明されます。 この情報の後、カップルにはトライアルへの参加を決定するための検討の時間が提供されます。 カップルが参加に同意する場合、COH の前に同意書に署名するための約束をします。 参加を拒否するカップルは、通常のケアを受けます。 採用されなかったすべての患者と除外理由の個別の記録が取得され、保管されます。

制御された卵巣過剰刺激 すべての患者は、各研究センターで標準的なルーチンによって実行されるCOH治療の固定アンタゴニストプロトコルを受けます。 治療は自然月経周期の 2 日目または 3 日目に開始され、ベースラインの骨盤超音波検査、および基本的な血清ホルモン (FSH、黄体形成ホルモン (LH)、プロゲステロン (P)、β-hCG など) がテストされます。葉状体の状態を確認します。 すべての参加者は、rFSH を皮下注射されます。 rFSHの初回投与量は200IUで、その後の投与量は卵巣の状態に応じて調整されます。 卵胞の成長を監視するために、経膣Bモード超音波、尿中LH、および血清E2がテストされます。 刺激の5日目に、GnRHアンタゴニスト0.25mgを1日1回、トリガー日まで皮下投与する(トリガー日を含む)。 トリガーのグループ A は 3 つ以上の卵胞が直径 ≥17 mm に達した場合、トリガーのグループ B はグループ A よりも 2 日遅れて継続的に Gn を示します。 すべての患者に対して、GnRH アゴニスト 0.2 + hCG 2000IU がトリガー日に 1 回注射されます。

卵母細胞の回収と準備 卵母細胞の回収は、hCG 注射の 36 時間後 (±2) に予定されています。 通常の採卵は、静脈内鎮静法を使用して、17G 卵母細胞吸引針を介した経膣超音波ガイド下で行われます。 取得された卵丘卵母細胞複合体 (COC) は、従来の IVF または ICSI を受けるために割り当てられます。 両方のグループについて、COC は軽量パラフィン オイルで覆われた培地に置かれ、卵母細胞の回収後すぐに加湿 37℃、5% CO2 インキュベーターでインキュベートされます。 これに加えて、COC は、授精または注入の前に 2 ～ 6 時間インキュベートされます。 グループ B (ICSI グループ) の場合、マイクロマニピュレーションの前に卵母細胞をヒアルロニダーゼで剥皮します。 押し出された最初の極体を持つ成熟した中期Ⅱ(MⅡ)卵母細胞のみがマイクロインジェクションされます。

受精と胚の質の評価 受精の評価は、受精後約 16 ～ 18 時間 (1 日目) に実施されます。 2 つの前核 (2PN) が存在し、2 番目の極体が押し出されている場合、卵母細胞は受精したと分類されます。 他の卵母細胞は、異常受精 (0PN、1PN、3PN) として分類されます。 通常の受精率は、核の成熟度に関係なく、また ICSI の場合と同様に IVF の場合も、COC の数に対する 2PN の数として常に計算されます。 1日目の評価後、受精卵をさらに48時間培養し、卵母細胞回収後72時間(3日目)に卵割胚の質を観察する。 胚は、以下の基準に従って、割球の質、数、サイズ、および無核断片化の量に従って採点されます。 グレード 2 の胚は、均一または不均一なサイズの割球を有し、無核断片で満たされた胚の体積の 10% 未満です。 グレード 3 の胚には、胚の体積の 10% から 50% を占める無核断片があります。 グレード 4 の胚には、胚の体積の 50% を超える無核断片があります。

胚移植と黄体サポート すべてのサイクルはすべてのサイクルを凍結します。 妊娠の評価 尿と血中の hCG を胚移植の 14 日後に測定し、陽性結果は生化学的妊娠を示します。 移植後7週目に超音波検査で胎嚢が確認されれば、臨床的妊娠が確定します。 進行中の妊娠は、妊娠 12 週以降に胎児の心拍を伴う胎嚢の存在によって定義されます。

フォローアップ 最初のサイクルで妊娠していると診断されなかった女性は、本試験で陰性と見なされ、その後、別の IVF/ICSI サイクルで治療を受けるか、医師の決定に基づいて、さらなる ART に適さないと評価されます。 .

妊娠継続が確認された女性については、妊娠中に特定の訓練を受けた看護師を介して 3 回の電話インタビューを手配します。 妊娠 12 週、28 週、37 週（妊娠第 1 期、第 2 期、第 3 期の妊娠に関して）で、妊娠の合併症、および胎児の情報が収集され、記録されて症例報告フォームが完成します。 (CRF) 包括的に。

参加者は、配達の時間を研究者に通知する必要があります。 分娩後 2 週間で、分娩情報 (妊娠期間、分娩モード、胎盤異常および/または分娩合併症)、乳児情報 (性別、出生時体重、先天性欠損症など) が、この訪問用に設計されたフォームに記入することによって収集されます。

インフォームドコンセントが得られた後、研究者は、生年月日、年齢、身長、体重、世帯収入、人口統計学的特徴の職業など、参加者から人口統計学的特徴、医療記録、バイタルサインを収集する必要があります。カルテの病歴、手術歴、個人歴。バイタルサインの体温と血圧。

胸部 X 線写真、心電図 (ECG)、肝酵素、腎機能、HBV/HCV/HIV 陰性状態、梅毒検出など、患者の付属検査のベースライン特性。

研究手順の間、適格な基準を確認し、血清性ホルモン（E2、LH、FSH、PRL、P、T）、超音波検査、精液分析、妊娠検査などの研究情報を収集するために、臨床検査を取得する必要があります。 他の検査指標は、従来の臨床治療中にテストされますが、私たちの研究では記録されません。

統計計画 2 サンプル T 検定の検出力分析 2 サンプル T 検定の帰無仮説の数値結果: 平均 1 = 平均 2。 対立仮説: Mean1<Mean2 標準偏差は不明で等しいと仮定されました。 割り当て 検出力 N1 N2 比率 アルファ ベータ 平均 1 平均 2 S1 S2 0.90041 354 354 1.000 0.02500 0.09959 5.2 6.2 4.1 4.1 レポートの定義 検出力は、誤った帰無仮説を棄却する確率です。 パワーは 1 に近いはずです。

N1 と N2 は、各母集団から抽出されたアイテムの数です。 リソースを節約するには、サイズを小さくする必要があります。

アルファは、真の帰無仮説を棄却する確率です。 小さいはずです。

ベータは、誤った帰無仮説を受け入れる確率です。 小さいはずです。

Mean1 は、等しいという帰無仮説の下での母集団 1 と 2 の平均です。 Mean2 は、対立仮説の下での母集団 2 の平均です。 母集団 1 の平均は変化しません。

S1 と S2 は母標準偏差です。 それらは集団の変動性を表しています。

まとめ 354 と 354 のグループ サンプル サイズは、両方のグループ平均が 5.2 であるという帰無仮説と、グループ 2 の平均が 6.2 であり、推定グループ標準偏差が 4.1 であるという対立仮説との間の -1.0 の差を検出する 90% の検出力を達成します。 4.1 で、有意水準 (アルファ) は 0.02500 で、片側 2 サンプル t 検定を使用します。 研究の脱落率が 15% であることを考慮すると、834 人の患者が含まれます。