Triggertiming i eggstokkstimuleringer

Målet med denne studien er å gjennomføre en klinisk studie med ett senter, for å studere om forsinkelser på to dager med trigger vil gi flere embryoer av god kvalitet enn vanlig triggertiming i eggstokkstimulering ved antagonistprotokoll ved in vitro fertilisering. Noe som kan forbedre den kulmulative fødselsraten (CLBR) ytterligere. Resultatene av denne studien vil hjelpe infertile par og klinikere til å vite og velge den optimale behandlingen i antagonistprotokollen.

Vi planlegger et enkelt senter, åpent, randomisert kontrollert klinisk studie (1:1 behandlingsforhold). På dagen for vanlig triggertimingsdag (tre follikler når 17 mm) eller to dager senere. 36-38 timer etter utløsning vil oocytthenting gjelde i begge grupper med samme protokoll. Da vil IVF/ICSI og embryokultur med standard protokoll i assisterte reproduktive behandlinger i vårt senter implementeres tilsvarende. Informasjon om alle deltakere og resultater registreres i saksrapportskjemaet. Flytskjemaet fulgte SPIRIT-sjekklisten som viser påmelding, tildeling, behandling og oppfølging av deltakere.

Inklusjonskriterier:

• Alder: ≥18 og <35 år
• Antrale follikkeltall (AFC): ≥5 og <20
• Anti-mullerian hormon (AMH): ≥1,1 ng/mL og <2,5 ng/mL
• Kroppsmasseindeks (BMI): ≥18,5 Kg/m2 og <29 Kg/m2
• Første eller andre ART-syklus
• Regelmessige menstruasjonssykluser (mellom 22 og 35 dager)
• To eggstokker tilstede
• Planlagt for enkel eller dobbel dag 3 overføring
• Infertile par planlagt for sin første IVF/ICSI-syklus med fast antagonistprotokoll.
• Informert samtykke innhentet.

Ekskluderingskriterier:

• Kvinner med kontraindikasjon for IVF eller ICSI, slik som dårlig kontrollert type 1 eller type 2 diabetes mellitus; udiagnostisert leversykdom eller dysfunksjon (basert på serumleverenzymtestresultater); nyresykdom eller unormal serumnyrefunksjon; betydelig anemi; historie med dyp venetrombose, lungeemboli eller cerebrovaskulær ulykke; ukontrollert hypertensjon eller kjent symptomatisk hjertesykdom; historie med (eller mistenkt) livmorhalskarsinom, endometriekarsinom eller brystkarsinom; og udiagnostisert vaginal blødning.
• Tidligere historie med dårlig ovarierespons (<4 oocytter hentet) med en maksimal dose ovariestimulering (OS) (≥300 IE/dag) eller ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS), uavhengig av gonadotropindose
• Kjente årsaker til nedsatt implantasjon (dvs. hydrosalpinx, myom som forvrenger endometriehulen, Ashermans syndrom, trombofili eller endometrietuberkulose)
• Gjentatte spontanaborter (>2 tidligere biokjemiske graviditeter eller >2 spontane spontanaborter)
• Gjentatt implantasjonssvikt (>3 mislykkede sykluser med embryoer av god kvalitet)
• Polycystisk ovariesyndrom (PCOS)
• Ubehandlet skjoldbrusk funksjon
• Administrering av eksogene E2, P4 eller gonadotropiner i forrige menstruasjonssyklus
• Aktiv kvinnelig røyking
• Pågående graviditet
• Kvinner som tidligere har meldt seg inn i rettssaken
• De som ikke er i stand til å forstå den undersøkende karakteren til den foreslåtte studien
• enten mannlig partner eller kvinnelig partner må motta donorsæd eller donoregg.
• Enten mannlig eller kvinnelig partner må motta preimplantasjonsgenetisk diagnose (PGD) og preimplantasjonsgenetisk screening (PGS).

Uttakskriterier:

• Deltakere som ikke er villige til å fortsette prøveprosedyrene eller trekke tilbake det informerte samtykket.
• Deltakere som synes dårlig etterlevelse under forsøket, og forskere bekrefter at det er nødvendig å avbryte studien.
• Tap til oppfølging. Rekruttering Infertile par som kommer til poliklinikk vil bli screenet som en del av rutinemessig vurdering av utdannet klinisk team som er godt kjent med de kvalifiserte kriteriene. Kvalifiserte pasienter vil deretter bli kontaktet av et medlem av forskerteamet og forklart prøvedetaljene før kontrollert ovariehyperstimulering (COH). Etter denne informasjonen vil par bli tilbudt tid til vurdering for å bestemme seg for å delta i rettssaken. Dersom paret samtykker i å delta, vil de avtale å signere samtykket før COH. Par som nekter å delta, vil motta konvensjonell omsorg. En individuell journal over alle ikke-rekrutterte pasienter og årsaker til eksklusjon vil bli innhentet og oppbevaring.

Kontrollert ovariehyperstimulering Alle pasienter vil få fast antagonistprotokoll for COH-behandling, som utføres av standardrutiner ved hvert studiesenter. Behandlingen starter på dag 2 eller dag 3 av den spontane menstruasjonssyklusen, og baseline bekkenultralyd, samt grunnleggende serumhormoner (som FSH, luteiniserende hormon (LH), progesteron (P) og β-hCG) vil bli testet for å bekrefte folic status. Alle deltakere vil få subkutan injisert rFSH. Startdosen av rFSH er 200 IE og den påfølgende dosen vil bli justert i henhold til eggstokkstatusen. Transvaginal B-modus ultralyd, urin LH og serum E2 vil bli testet for å overvåke follikkelvekst. På dag 5 av stimulering vil GnRH-antagonist 0,25 mg daglig administreres subkutant frem til triggerdagen (inkluder triggerdagen). Gruppe A av trigger er 3 eller flere follikler når en diameter ≥17 mm, gruppe B av trigger er 2 dager senere enn gruppe A med kontinuerlig Gn. For alle pasienter vil GnRH-agonist 0,2 + hCG 2000 IE injiseres én gang på triggerdagen.

Oocytthenting og forberedelse Oocytthenting er planlagt til 36 timer (±2) etter hCG-injeksjon. Rutinemessig oppsamling av oocytter utføres under transvaginal ultralydveiledning via 17G oocytt-aspirasjonsnål med bruk av intravenøs sedasjon. De hentede cumulus-oocyttkompleksene (COC) vil bli allokert til å gjennomgå konvensjonell IVF eller ICSI. For begge gruppene plasseres p-pillene i kulturmedium dekket av lett parafinolje og inkuberes i en fuktet 37℃,5 % CO2-inkubator etter oocytthenting umiddelbart. I tillegg til dette inkuberes p-pillene i 2-6 timer før inseminering eller injeksjon. For gruppe B (ICSI-gruppe) vil oocyttene bli denudert av hyaluronidase før mikromanipulering. Bare de modne, metafase-Ⅱ(MⅡ) oocyttene med en ekstrudert første polar kropp blir mikroinjisert.

Vurdering av befruktning og embryokvalitet Vurdering av befruktning utføres ca. 16-18 timer (dag 1) etter befruktning. Oocytter klassifiseres som befruktede hvis to pronuklei (2PN) er tilstede og den andre polare kroppen er ekstrudert. Andre oocytter er klassifisert som unormalt befruktede (0PN, 1PN, 3PN). Normal befruktningsrate vil alltid beregnes som tallet 2PN over antall p-piller, uavhengig av kjernefysisk modenhet, så vel for IVF som for ICSI. Etter evalueringen på dag 1, blir zygoter stående i kultur i ytterligere 48 timer, og spaltningsembryokvaliteten vil bli observert 72 (dag 3) timer etter oocyttuthenting. Embryoene skåres i henhold til kvalitet, antall, størrelse på blastomerene og mengden anukleatfragmentering som følger kriterier: Grad 1 embryoer består av symmetriske blastomerer av omtrent like store og uten anukleatfragmenter. Grad 2 embryoer hadde blastomerer av jevn eller ujevn størrelse og har <10 % av volumet av embryoer fylt med anukleatfragmenter. Grad 3 embryoer har anukleatfragmenter som opptar mellom 10 % og 50 % av volumet til embryoene. Grad 4 embryoer har anukleatfragmenter >50 % av volumet til embryoene.

Embryooverføring og luteal støtte Alle sykluser fryses alle sykluser. Evaluering av graviditet Urin og blod-hCG vil bli målt 14 dager etter embryooverføring, og positive resultater indikerer biokjemisk graviditet. Hvis svangerskapssekken observeres med ultralyd 7 uker etter overføring, vil klinisk graviditet bli bekreftet. Pågående graviditet er definert av tilstedeværelsen av en svangerskapssekk med føtal hjerterytme etter 12 ukers svangerskap.

Oppfølging For kvinner som ikke er diagnostisert gravide i den første syklusen, vil de bli vurdert som negativt for utfallet i vår studie, og deretter bli behandlet med en annen IVF/ICSI-syklus eller blir vurdert som ikke egnet for videre ART, basert på legens beslutning .

For kvinner som er bekreftet pågående svangerskap vil vi arrangere 3 telefonintervjuer i løpet av svangerskapet via spesifikke utdannede sykepleiere. Ved 12 uker, 28 uker og 37 uker med svangerskap (når det gjelder svangerskap i første trimester, graviditet i andre trimester og graviditet i tredje trimester), vil svangerskapskomplikasjoner og fosterinformasjon samles inn og registreres for å fylle ut saksrapportskjemaet (CRF) omfattende.

Deltakerne vil bli pålagt å varsle forskerne om leveringstidspunktet. I løpet av 2 uker etter fødselen vil leveringsinformasjonen (svangerskapsalder, leveringsmåte, morkakeabnormitet og/eller fødselskomplikasjoner), spedbarnsinformasjon (som kjønn, fødselsvekt, fødselsdefekt) samles inn ved å fylle ut skjemaer som er laget for dette besøket.

Etter informert samtykke innhentet, bør forskere samle inn demografiske kjennetegn, journal og vitale tegn fra deltakerne, inkludert fødselsdato, alder, høyde, vekt, husholdningsinntekt og yrke for demografiske kjennetegn; sykdomshistorie, operasjonshistorie og personlig historie for journal; kroppstemperatur og blodtrykk for vitale tegn.

Baseline-karakteristikker for pasientens tilleggsundersøkelse, som røntgen av thorax, elektrokardiogram (EKG), leverenzym, nyrefunksjon, HBV/HCV/HIV-negativ status, syfilisdeteksjon, et al.

Under studieprosedyrene bør laboratorietester innhentes for å bekrefte de kvalifiserte kriteriene og samle studieinformasjon, inkludert serumkjønnshormon (E2, LH, FSH, PRL, P, T), ultralyd, sædanalyse og graviditetstest. Andre laboratorieindekser vil bli testet under konvensjonell klinisk behandling, men ikke registrert i vår studie.

Statistiske planer To-utvalgs T-test effektanalyse Numeriske resultater for to-utvalgs T-test Nullhypotese: Middel1=Mean2. Alternativ hypotese: Middel1<Mean2 Standardavvikene ble antatt å være ukjente og like. Allokering Effekt N1 N2 Forhold Alfa Beta Middel1 Middel2 S1 S2 0,90041 354 354 1,000 0,02500 0,09959 5,2 6,2 4,1 4,1 Rapportdefinisjoner Power er sannsynligheten for å avvise en falsk null hypose. Strøm bør være nær én.

N1 og N2 er antall elementer som er utvalgt fra hver populasjon. For å bevare ressursene bør de være små.

Alfa er sannsynligheten for å forkaste en sann nullhypotese. Den skal være liten.

Beta er sannsynligheten for å akseptere en falsk nullhypotese. Den skal være liten.

Gjennomsnitt 1 er gjennomsnittet av populasjoner 1 og 2 under nullhypotesen om likhet. Gjennomsnitt 2 er gjennomsnittet av populasjon 2 under den alternative hypotesen. Gjennomsnittet av populasjon 1 er uendret.

S1 og S2 er populasjonens standardavvik. De representerer variasjonen i populasjonene.

Oppsummeringsutsagn Gruppeutvalgsstørrelser på 354 og 354 oppnår 90 % kraft for å oppdage en forskjell på -1,0 mellom nullhypotesen om at begge gruppemiddelverdiene er 5,2 og den alternative hypotesen om at gjennomsnittet for gruppe 2 er 6,2 med estimerte gruppestandardavvik på 4,1 og 4.1 og med et signifikansnivå (alfa) på 0,02500 ved bruk av en ensidig to-prøve t-test. Med tanke på 15 % frafall i studien, vil 834 pasienter bli inkludert.