Время запуска при стимуляции яичников

Целью данного исследования является проведение одноцентрового клинического испытания для изучения того, приведет ли задержка триггера на два дня к получению большего количества эмбрионов хорошего качества, чем обычное время триггера при стимуляции яичников протоколом антагониста при экстракорпоральном оплодотворении. Что может еще больше улучшить совокупный коэффициент живорождения (CLBR). Результаты этого исследования помогут бесплодным парам и клиницистам узнать и выбрать оптимальное лечение в протоколе антагонистов.

Мы планируем одноцентровое открытое рандомизированное контролируемое клиническое исследование (соотношение лечения 1:1). В день обычного триггерного срока (три фолликула достигают 17 мм) или через два дня. Через 36-38 часов после триггера в обеих группах будет применяться извлечение ооцитов по одному и тому же протоколу. Затем ЭКО/ИКСИ и культивирование эмбрионов по стандартному протоколу при вспомогательных репродуктивных технологиях в нашем центре будут осуществляться аналогичным образом. Сведения обо всех участниках и результатах заносятся в форму истории болезни. Блок-схема следовала контрольному списку SPIRIT, показывающему зачисление, распределение, лечение и последующее наблюдение за участниками.

Критерии включения:

• Возраст: ≥18 и <35 лет
• Количество антральных фолликулов (AFC): ≥5 и <20
• Антимюллеров гормон (АМГ): ≥1,1 нг/мл и <2,5 нг/мл
• Индекс массы тела (ИМТ): ≥18,5 кг/м2 и <29 кг/м
• Первый или второй цикл АРТ
• Регулярный менструальный цикл (от 22 до 35 дней)
• Имеются два яичника
• Планируется одноместный или двухместный трансфер на 3-й день.
• Бесплодные пары, которым назначен первый цикл ЭКО/ИКСИ с фиксированным протоколом антагонистов.
• Получено информированное согласие.

Критерий исключения:

• Женщины с противопоказаниями к ЭКО или ИКСИ, такими как плохо контролируемый сахарный диабет 1 или 2 типа; невыявленное заболевание или дисфункция печени (на основании результатов исследования ферментов печени в сыворотке крови); заболевание почек или нарушение функции почек в сыворотке крови; значительная анемия; тромбоз глубоких вен, легочная эмболия или нарушение мозгового кровообращения в анамнезе; неконтролируемая артериальная гипертензия или известное симптоматическое заболевание сердца; наличие в анамнезе (или подозрение) карциномы шейки матки, карциномы эндометрия или карциномы молочной железы; и невыявленные вагинальные кровотечения.
• В анамнезе плохой ответ яичников (получено <4 ооцитов) при максимальной дозе стимуляции яичников (ОС) (≥300 МЕ/день) или синдроме гиперстимуляции яичников (СГЯ), независимо от дозы гонадотропина
• Известные причины нарушения имплантации (т. гидросальпинкс, миома, деформирующая полость матки, синдром Ашермана, тромбофилия или туберкулез эндометрия)
• Повторные выкидыши (>2 предыдущих биохимических беременностей или>2 самопроизвольных выкидышей)
• Рецидивирующая неудача имплантации (>3 неудачных цикла с эмбрионами хорошего качества)
• Синдром поликистозных яичников (СПКЯ)
• Невылеченная дисфункция щитовидной железы
• Введение экзогенных Е2, Р4 или гонадотропинов в предшествующий менструальный цикл
• Активное женское курение
• Текущая беременность
• Женщины, ранее участвовавшие в испытании
• Те, кто не может понять исследовательский характер предлагаемого исследования
• либо партнер-мужчина, либо партнер-женщина должны получить донорскую сперму или донорские яйцеклетки.
• Партнер-мужчина или партнерша-женщина должны пройти преимплантационную генетическую диагностику (ПГД) и преимплантационный генетический скрининг (ПГС).

Критерии вывода:

• Участники, которые не желают продолжать процедуры исследования или отзывают информированное согласие.
• Участники, которые проявляют несоблюдение режима во время испытания, и исследователи подтверждают необходимость прекращения их исследования.
• Потеря для последующего наблюдения. Набор Бесплодные пары, обращающиеся в амбулаторную клинику, будут проходить скрининг в рамках плановой оценки обученной клинической командой, которая хорошо знакома с подходящими критериями. Затем к подходящим пациенткам свяжется член исследовательской группы и объяснит детали исследования перед контролируемой гиперстимуляцией яичников (КГЯ). После этой информации парам будет предложено время для рассмотрения, чтобы принять решение об участии в испытании. Если пара соглашается участвовать, они договариваются о встрече, чтобы подписать согласие до COH. Пары, отказывающиеся от участия, получат обычную помощь. Индивидуальная запись обо всех незарегистрированных пациентах и ​​причинах исключения будет получена и сохранена.

Контролируемая гиперстимуляция яичников Всем пациенткам будет назначен протокол лечения ХГЯ с фиксированными антагонистами, который проводится по стандартным процедурам в каждом исследовательском центре. Лечение начнется на 2-й или 3-й день спонтанного менструального цикла, и будет проверено исходное УЗИ органов малого таза, а также основные сывороточные гормоны (такие как ФСГ, лютеинизирующий гормон (ЛГ), прогестерон (П) и β-ХГЧ). для подтверждения фолиевого статуса. Всем участникам будет подкожно введен рФСГ. Начальная доза рФСГ составляет 200 МЕ, последующая доза будет корректироваться в зависимости от состояния яичников. Для мониторинга роста фолликулов будут протестированы трансвагинальное УЗИ в В-режиме, мочевой ЛГ и сывороточный Е2. На 5-й день стимуляции антагонист ГнРГ в дозе 0,25 мг в день будет вводиться подкожно до триггерного дня (включая триггерный день). Триггерная группа А – это 3 и более фолликулов, достигающих диаметра ≥17 мм, триггерная группа В – на 2 дня позже, чем группа А с постоянным Gn. Для всех пациентов агонист ГнРГ 0,2 + ХГЧ 2000 МЕ будет однократно инъецирован в триггерный день.

Забор и подготовка ооцитов Забор ооцитов запланирован через 36 часов (±2) после инъекции ХГЧ. Стандартный забор ооцитов проводится под трансвагинальным ультразвуковым контролем с помощью иглы для аспирации ооцитов 17G с использованием внутривенной седации. Извлеченные комплексы кумулюсных ооцитов (КОК) будут направлены на стандартное ЭКО или ИКСИ. Для обеих групп КОК помещают в культуральную среду, покрытую легким вазелиновым маслом, и инкубируют во влажном инкубаторе с температурой 37 ℃, 5% CO2 сразу после извлечения ооцитов. Кроме того, КОК инкубируют в течение 2-6 часов перед осеменением или инъекцией. Для группы B (группа ICSI) ооциты будут оголены гиалуронидазой перед микроманипуляцией. Только зрелые ооциты метафазы-II (MⅡ) с экструдированным первым полярным тельцем подвергают микроинъекции.

Оценка оплодотворения и качества эмбриона Оценку оплодотворения проводят примерно через 16-18 часов (день 1) после оплодотворения. Ооциты классифицируются как оплодотворенные, если присутствуют два пронуклеуса (2PN) и экструдировано второе полярное тельце. Другие ооциты классифицируются как аномально оплодотворенные (0PN, 1PN, 3PN). Нормальная частота оплодотворения всегда будет рассчитываться как число 2PN к количеству КОК, независимо от зрелости ядра, как для ЭКО, так и для ИКСИ. После оценки в 1-й день зиготы оставляют в культуре еще на 48 часов, а качество дробленого эмбриона наблюдают через 72 (3-й день) часов после извлечения ооцитов. Эмбрионы оценивают по качеству, количеству, размеру бластомеров и степени фрагментации безъядерных клеток по следующим критериям: Эмбрионы степени 1 состоят из симметричных бластомеров примерно одинакового размера и без фрагментов безъядерных. Эмбрионы Grade 2 имели бластомеры одинакового или неравномерного размера и имели <10% объема эмбрионов, заполненных безъядерными фрагментами. Эмбрионы 3 степени имеют безъядерные фрагменты, занимающие от 10% до 50% объема эмбрионов. Эмбрионы 4 степени имеют безъядерные фрагменты >50% объема эмбрионов.

Перенос эмбрионов и лютеиновая поддержка Все циклы замораживаются. Оценка беременности ХГЧ в моче и крови будет измерен через 14 дней после переноса эмбриона, и положительные результаты указывают на биохимическую беременность. Если плодное яйцо наблюдают с помощью УЗИ через 7 недель после переноса, будет подтверждена клиническая беременность. Текущая беременность определяется наличием плодного яйца с сердцебиением плода после 12 недель беременности.

Последующее наблюдение Для женщин, у которых беременность не была диагностирована в начальном цикле, они будут считаться отрицательными для исхода в нашем исследовании, и впоследствии будут проходить лечение в другом цикле ЭКО/ИКСИ или будут признаны непригодными для дальнейшего АРТ на основании решения врача. .

Для женщин, у которых подтверждена продолжающаяся беременность, мы организуем 3 телефонных интервью во время беременности с помощью специально обученных медсестер. В 12 недель, 28 недель и 37 недель беременности (с точки зрения беременности в первом триместре, беременности во втором триместре и беременности в третьем триместре) будут собираться и регистрироваться сведения об осложнениях беременности и плоде для заполнения формы истории болезни. (CRF) комплексно.

Участники должны будут уведомить исследователей о времени доставки. Через 2 недели после родов информация о родах (гестационный возраст, способ родов, аномалии плаценты и/или осложнения родов), информация о ребенке (например, пол, вес при рождении, врожденный порок) будет собрана путем заполнения форм, предназначенных для этого визита.

После получения информированного согласия исследователи должны собрать демографические характеристики, медицинские записи и жизненные показатели участников, включая дату рождения, возраст, рост, вес, доход домохозяйства и род занятий для демографических характеристик; история болезни, история операций и личная история для медицинской документации; температура тела и артериальное давление для жизненно важных функций.

Исходные характеристики дополнительного обследования пациента, такие как рентгенограмма грудной клетки, электрокардиограмма (ЭКГ), ферменты печени, функция почек, отрицательный статус HBV/HCV/ВИЧ, выявление сифилиса и др.

Во время процедур исследования должны быть получены лабораторные тесты для подтверждения приемлемых критериев и сбора информации об исследовании, включая сывороточные половые гормоны (E2, LH, FSH, PRL, P, T), ультразвуковое исследование, анализ спермы и тест на беременность. Другие лабораторные показатели будут проверены во время обычного клинического лечения, но не зарегистрированы в нашем исследовании.

Статистические планы Анализ мощности двухвыборочного Т-критерия Численные результаты для двухвыборочного Т-критерия Нулевая гипотеза: Среднее1=Среднее2. Альтернативная гипотеза: Среднее1<Среднее2 Стандартные отклонения предполагались неизвестными и равными. Мощность распределения N1 Соотношение N2 Альфа Бета Среднее1 Среднее2 S1 S2 0,90041 354 354 1,000 0,02500 0,09959 5,2 6,2 4,1 4.1 Определения отчета Мощность — это вероятность отклонения ложной нулевой гипотезы. Мощность должна быть близка к единице.

N1 и N2 — количество предметов, отобранных из каждой совокупности. Для экономии ресурсов они должны быть небольшими.

Альфа — это вероятность отклонения истинной нулевой гипотезы. Он должен быть маленьким.

Бета — это вероятность принятия ложной нулевой гипотезы. Он должен быть маленьким.

Mean1 — это среднее значение популяций 1 и 2 при нулевой гипотезе равенства. Среднее2 — это среднее значение генеральной совокупности 2 согласно альтернативной гипотезе. Среднее значение населения 1 не изменилось.

S1 и S2 — стандартные отклонения генеральной совокупности. Они отражают изменчивость популяций.

Итоговые положения Групповые выборки размером 354 и 354 достигают мощности 90% для обнаружения разницы в -1,0 между нулевой гипотезой о том, что средние значения обеих групп равны 5,2, и альтернативной гипотезой о том, что среднее значение группы 2 составляет 6,2 с оценочными стандартными отклонениями группы 4,1 и 4.1 и с уровнем значимости (альфа) 0,02500 с использованием одностороннего двухвыборочного t-критерия. Учитывая 15% отсева в исследовании, в него будут включены 834 пациента.