Triggertiming bij ovariële stimulaties

Het doel van deze studie is om een ​​klinische studie in één centrum uit te voeren, om te onderzoeken of het uitstellen van twee dagen van trigger meer embryo's van goede kwaliteit zal opleveren dan reguliere trigger-timing bij ovariële stimulaties door middel van een antagonistisch protocol bij in-vitrofertilisatie. Wat het cumulatieve levend geboortecijfer (CLBR) verder kan verbeteren. De resultaten van deze studie zullen onvruchtbare paren en clinici helpen om de optimale behandeling in het antagonistische protocol te kennen en te kiezen.

We plannen een open-label, gerandomiseerde, gecontroleerde klinische studie in één centrum (behandelingsverhouding van 1:1). Op de dag van de normale trigger-timingdag (drie follikels bereiken 17 mm) of twee dagen later. 36-38 uur na de trigger wordt het ophalen van eicellen toegepast in beide groepen met hetzelfde protocol. Vervolgens worden IVF/ICSI en embryokweek met standaardprotocol bij geassisteerde voortplantingsbehandelingen in ons centrum op dezelfde manier geïmplementeerd. Informatie van alle deelnemers en uitkomsten worden vastgelegd in het casusrapportformulier. Het stroomschema volgde de SPIRIT-checklist met de inschrijving, toewijzing, behandeling en follow-up van deelnemers.

Inclusiecriteria:

• Leeftijd: ≥18 en <35 jaar
• Aantal antrale follikels (AFC): ≥5 en <20
• Anti-mulleriaans hormoon (AMH): ≥1,1 ng/ml en <2,5 ng/ml
• Body mass index (BMI): ≥18,5 kg/m2 en <29 kg/m
• Eerste of tweede ART-cyclus
• Regelmatige menstruatiecycli (tussen 22 en 35 dagen)
• Twee eierstokken aanwezig
• Gepland voor enkele of dubbele dag 3 transfer
• Onvruchtbare paren gepland voor hun eerste IVF/ICSI-cyclus met vast antagonistprotocol.
• Geïnformeerde toestemming verkregen.

Uitsluitingscriteria:

• Vrouwen met een contra-indicatie voor IVF of ICSI, zoals slecht gecontroleerde diabetes mellitus type 1 of type 2; niet-gediagnosticeerde leverziekte of -disfunctie (gebaseerd op serum leverenzymtestresultaten); nierziekte of abnormale serumnierfunctie; significante bloedarmoede; voorgeschiedenis van diepe veneuze trombose, longembolie of cerebrovasculair accident; ongecontroleerde hypertensie of bekende symptomatische hartziekte; voorgeschiedenis van (of vermoedelijk) cervicaal carcinoom, endometriumcarcinoom of mammacarcinoom; en niet-gediagnosticeerde vaginale bloedingen.
• Voorgeschiedenis van slechte ovariële respons (<4 oöcyten teruggevonden) met een maximale dosis ovariële stimulatie (OS) (≥300 IE/dag) of ovarieel hyperstimulatiesyndroom (OHSS), ongeacht de dosis gonadotropine
• Bekende redenen voor verminderde implantatie (d.w.z. hydrosalpinx, vleesboom die de endometriumholte vervormt, het syndroom van Asherman, trombofilie of endometriumtuberculose)
• Herhaalde miskramen (>2 eerdere biochemische zwangerschappen of >2 spontane miskramen)
• Recidiverend implantatiefalen (>3 mislukte cycli met embryo's van goede kwaliteit)
• Polycysteus ovariumsyndroom (PCOS)
• Onbehandelde schildklierdisfunctie
• Toediening van exogene E2, P4 of gonadotropines in de voorafgaande menstruatiecyclus
• Actief vrouwelijk roken
• Doorgaande zwangerschap
• Vrouwen die zich eerder hebben ingeschreven voor het onderzoek
• Degenen die het onderzoekskarakter van de voorgestelde studie niet kunnen begrijpen
• ofwel mannelijke partner of vrouwelijke partner moet donorsperma of donoreieren ontvangen.
• Zowel de mannelijke partner als de vrouwelijke partner moet pre-implantatie genetische diagnose (PGD) en pre-implantatie genetische screening (PGS) ondergaan.

Intrekkingscriteria:

• Deelnemers die niet bereid zijn om de proefprocedures voort te zetten of de geïnformeerde toestemming in te trekken.
• Deelnemers die tijdens het onderzoek een slechte therapietrouw blijken te hebben, en onderzoekers bevestigen dat het noodzakelijk is om hun studie te staken.
• Verlies om op te volgen. Werving Onvruchtbare paren die naar de polikliniek komen, zullen worden gescreend als onderdeel van een routinematige beoordeling door een getraind klinisch team dat goed bekend is met de criteria die in aanmerking komen. In aanmerking komende patiënten zullen vervolgens worden benaderd door een lid van het onderzoeksteam en de details van het onderzoek worden uitgelegd voorafgaand aan gecontroleerde ovariële hyperstimulatie (COH). Na deze informatie krijgen paren bedenktijd om te beslissen om deel te nemen aan het onderzoek. Als het paar ermee instemt om deel te nemen, maken ze een afspraak om de toestemming te ondertekenen vóór COH. Koppels die deelname weigeren, krijgen reguliere zorg. Een individueel dossier van alle niet-aangeworven patiënten en redenen voor uitsluiting zal worden verkregen en opgeslagen.

Gecontroleerde ovariële hyperstimulatie Alle patiënten zullen een vast antagonistisch protocol van COH-behandeling krijgen, dat wordt uitgevoerd volgens standaardroutines in elk studiecentrum. De behandeling begint op dag 2 of dag 3 van de spontane menstruatiecyclus en de baseline bekken echografie, evenals basisserumhormonen (zoals FSH, luteïniserend hormoon (LH), progesteron (P) en β-hCG) zullen worden getest om de foliumzuurstatus te bevestigen. Alle deelnemers krijgen subcutaan rFSH toegediend. De aanvangsdosis van rFSH is 200 IE en de daaropvolgende dosis zal worden aangepast aan de status van de eierstokken. Transvaginale B-modus echografie, LH in de urine en serum E2 zullen worden getest om de follikelgroei te volgen. Op dag 5 van de stimulatie wordt dagelijks 0,25 mg GnRH-antagonist subcutaan toegediend tot de triggerdag (inclusief de triggerdag). Groep A van trigger is 3 of meer follikels bereiken een diameter ≥17 mm, groep B van trigger is 2 dagen later dan groep A met continu Gn. Voor alle patiënten wordt de GnRH-agonist 0,2 + hCG 2000IU eenmaal geïnjecteerd op de triggerdag.

Eicelpunctie en voorbereiding De eicelpunctie is gepland voor 36 uur (±2) na hCG-injectie. Routinematige eicelpickup wordt uitgevoerd onder transvaginale echografie via een 17G eicelaspiratienaald met gebruik van intraveneuze sedatie. De opgehaalde cumulus eicelcomplexen (COC) zullen worden toegewezen om conventionele IVF of ICSI te ondergaan. Voor beide groepen worden de COC's in een kweekmedium geplaatst dat bedekt is met lichtgewicht paraffineolie en geïncubeerd in een bevochtigde 37 ℃, 5% CO2-incubator onmiddellijk na het ophalen van de eicel. Daarnaast worden de COC's 2-6 uur geïncubeerd vóór inseminatie of injectie. Voor groep B (ICSI-groep) worden de oöcyten ontbloot door hyaluronidase vóór micromanipulatie. Alleen de rijpe, metafase-Ⅱ(MⅡ) oöcyten met een geëxtrudeerd eerste poollichaampje worden micro-geïnjecteerd.

Beoordeling van de bevruchting en kwaliteit van het embryo Beoordeling van de bevruchting wordt ongeveer 16-18 uur (dag 1) na de bevruchting uitgevoerd. Eicellen worden geclassificeerd als bevrucht als er twee pronuclei (2PN) aanwezig zijn en het tweede poollichaampje is geëxtrudeerd. Andere eicellen worden geclassificeerd als abnormaal bevrucht (0PN, 1PN, 3PN). Het normale bevruchtingspercentage wordt altijd berekend als het getal 2PN over het aantal COC's, onafhankelijk van de nucleaire maturiteit, zowel voor IVF als voor ICSI. Na de evaluatie op dag 1 worden de zygoten nog 48 uur in cultuur gelaten en wordt de kwaliteit van het splitsingsembryo 72 (dag 3) uur na het ophalen van de eicel waargenomen. De embryo's worden gescoord op basis van de kwaliteit, het aantal, de grootte van de blastomeren en de mate van anucleaire fragmentatie volgens de volgende criteria: Graad 1 embryo's bestaan ​​uit symmetrische blastomeren van ongeveer gelijke grootte en zonder anucleaire fragmenten. Graad 2-embryo's hadden blastomeren van gelijke of ongelijke grootte en hebben <10% van het volume van de embryo's gevuld met anucleaire fragmenten. Graad 3-embryo's hebben kernfragmenten die tussen 10% en 50% van het volume van de embryo's innemen. Graad 4 embryo's hebben kernfragmenten >50% van het volume van de embryo's.

Embryotransfer en luteale ondersteuning Alle cycli zijn bevriezing van alle cycli. Evaluatie van de zwangerschap Urine- en bloed-hCG worden 14 dagen na de embryotransfer gemeten en positieve resultaten wijzen op een biochemische zwangerschap. Als de zwangerschapszak 7 weken na de overdracht wordt waargenomen met echografie, wordt de klinische zwangerschap bevestigd. Doorgaande zwangerschap wordt gedefinieerd door de aanwezigheid van een zwangerschapszak met foetale hartslag na 12 weken zwangerschap.

Follow-up Voor vrouwen die in de eerste cyclus niet als zwanger zijn gediagnosticeerd, zullen ze worden beschouwd als negatief voor de uitkomst in onze studie en vervolgens worden behandeld voor een andere IVF/ICSI-cyclus of worden ze beoordeeld als niet geschikt voor verdere ART, op basis van de beslissing van de arts .

Voor vrouwen bij wie doorgaande zwangerschap is bevestigd, organiseren we 3 telefonische interviews tijdens hun zwangerschap via speciaal opgeleide verpleegkundigen. Na 12 weken, 28 weken en 37 weken zwangerschap (in termen van zwangerschap in het eerste trimester, zwangerschap in het tweede trimester en zwangerschap in het derde trimester), zullen zwangerschapscomplicaties en informatie over de foetus worden verzameld en geregistreerd om het casusrapportformulier in te vullen (CRF) uitgebreid.

Deelnemers moeten de onderzoekers op de hoogte stellen van het tijdstip van levering. Binnen 2 weken na de bevalling wordt de bevallingsinformatie (zwangerschapsduur, bevallingswijze, placenta-afwijking en/of bevallingscomplicaties), baby-informatie (zoals geslacht, geboortegewicht, geboorteafwijking) verzameld door formulieren in te vullen die voor dit bezoek zijn ontworpen.

Nadat geïnformeerde toestemming is verkregen, moeten onderzoekers de demografische kenmerken, het medisch dossier en de vitale functies van deelnemers verzamelen, inclusief geboortedatum, leeftijd, lengte, gewicht, gezinsinkomen en beroep voor demografische kenmerken; ziektegeschiedenis, operatiegeschiedenis en persoonlijke geschiedenis voor medisch dossier; lichaamstemperatuur en bloeddruk voor vitale functies.

Baseline-kenmerken van het aanvullende onderzoek van de patiënt, zoals thoraxfoto, elektrocardiogram (ECG), leverenzym, nierfunctie, HBV/HCV/HIV-negatieve status, syfilisdetectie, et al.

Tijdens de onderzoeksprocedures moeten laboratoriumtests worden uitgevoerd om de in aanmerking komende criteria te bevestigen en onderzoeksinformatie te verzamelen, waaronder serum-geslachtshormoon (E2, LH, FSH, PRL, P, T), echografie, sperma-analyse en zwangerschapstest. Andere laboratoriumindexen zullen worden getest tijdens conventionele klinische behandeling, maar niet worden geregistreerd in onze studie.

Statistische plannen T-toets voor twee steekproeven Vermogensanalyse Numerieke resultaten voor nulhypothese voor T-toets voor twee steekproeven: Mean1=Mean2. Alternatieve hypothese: Mean1<Mean2 De standaarddeviaties werden verondersteld onbekend en gelijk te zijn. Allocatie Power N1 N2 Ratio Alfa Bèta Gemiddelde1 Gemiddelde2 S1 S2 0,90041 354 354 1,000 0,02500 0,09959 5,2 6,2 4,1 4,1 Rapportdefinities Power is de kans op het verwerpen van een valse nulhypothese. Het vermogen moet dicht bij één liggen.

N1 en N2 zijn het aantal items dat uit elke populatie is bemonsterd. Om hulpbronnen te sparen, moeten ze klein zijn.

Alfa is de kans op het verwerpen van een echte nulhypothese. Het zou klein moeten zijn.

Bèta is de kans op het accepteren van een valse nulhypothese. Het zou klein moeten zijn.

Mean1 is het gemiddelde van populaties 1 en 2 onder de nulhypothese van gelijkheid. Mean2 is het gemiddelde van populatie 2 onder de alternatieve hypothese. Het gemiddelde van populatie 1 is ongewijzigd.

S1 en S2 zijn de standaarddeviaties van de populatie. Ze vertegenwoordigen de variabiliteit in de populaties.

Samenvattende uitspraken Groepssteekproeven van 354 en 354 bereiken een power van 90% om een ​​verschil van -1,0 te detecteren tussen de nulhypothese dat beide groepsgemiddelden 5,2 zijn en de alternatieve hypothese dat het gemiddelde van groep 2 6,2 is met geschatte groepsstandaarddeviaties van 4,1 en 4.1 en met een significantieniveau (alfa) van 0,02500 met behulp van een eenzijdige two-sample t-test. Rekening houdend met een uitvalpercentage van 15% in de studie, zullen 834 patiënten worden opgenomen.