Motionens indflydelse på vævsbeta-alaninoptagelse og carnosinsyntesehastigheder

B-alanin er en ikke-essentiel, ikke-proteinogen aminosyre, der findes i mangelfulde skeletmuskelkoncentrationer. Denne mangel gør B-alanin til en hastighedsbegrænsende faktor for carnosinsyntese. B-alanintilskud er yderst effektivt til at øge intramuskulært carnosinindhold, hvilket fører til forbedret fysisk ydeevne, især ved højintensive øvelser (HIIE). Det ser ud til, at træning i sig selv kan modulere carnosinindholdet; det er dog fortsat usikkert, om fysisk træning eller træningsstatus kan påvirke B-alanin tilskudsresponser. Dette arbejde har således til formål at vurdere, om HIIE kan øge B-alanin-optagelsen i perifert væv og mere specifikt skeletmuskulatur og øge den intramuskulære carnosinsyntese. En crossover modvægtet undersøgelse vil blive udført. De frivillige vil blive evalueret under to forhold: indtag af B-alanin + træning (B-EX) og kun B-alanin indtag (B-Ala). Doseringen vil være 20 mg · kg-1 (pulver fortyndet i vand). Denne proces vil blive opdelt i to blokke af seks dage (torsdag til torsdag - uden weekend) med en 4-6 ugers udvaskning. I B-EX-blokken afholdes en 20-minutters HIIE-session. Dernæst vil B-alanin tilskud blive administreret. Umiddelbart efter træning, i en 150-minutters hviletid, vil der blive foretaget indsamlinger af venøse blodprøver, og muskelbiopsien og urinopsamlingen vil blive indsamlet før og efter test. I de næste tre dage (torsdag til onsdag) vil den samme protokol blive gentaget uden blod-, muskel- eller urinopsamlinger. På disse dage vil B-alanin-tilskuddet blive administreret før og efter protokollen (B-EX og B-Ala), i samme dosis på 20mg.kg-1. Den 6. dag (torsdag) vil den komplette protokol blive udført, herunder indsamling af biologisk materiale. I B-Ala-blokken vil de samme procedurer blive vedtaget for B-EX-blokken, med udskiftning af HIIE i 20 minutters hvile siddende på cykelergometeret. Ernæringsparametrene vil blive evalueret i løbet af de to blokke af kostdagbøger i software (Dietbox), der inkluderer billeder og beskrivelsen af ​​al den frivillige mad på dagen. Det vil blive fastslået, at under blokeringerne (B-EX og B-ala) er beta-alanin-indtagelsen af ​​mad begrænset til 300 mg pr. dag. Analysen af ​​bestemmelsen af ​​muskel B-alanin, plasma og urin, muskel carnosin vil blive udført ved HPLC-ESI + -MS / MS. Genekspressionen af ​​carnosin-relaterede enzymer og transportere vil blive analyseret ved hjælp af real-time PCR-teknikken. Enzymerne CARNS1, CN2, TauT, PAT1 og phosphoryleret Na + / K + / ATPase vil blive analyseret ved hjælp af Western Blot-teknikken. Carnosinsyntaseaktivitet vil blive udført ved at inkorporere [3H] B-alaninsyre i det tilsvarende dipeptid. Analysen af ​​paræstesiens tilstedeværelse og intensitet vil ske gennem en skala tilpasset fra LINGJÆRDE et al., 1987. Den statistiske analyse vil blive udført i RStudio-softwaren og SAS-softwaren ved at bruge den blandede model til at sammenligne muskel-, plasma- og urinvariabler. Tilstand (B-Ex vs. B-ala) og tidspunkt for afhentning (tidspunkt) vil være faste faktorer, mens forsøgspersonerne vil være tilfældige faktorer. Datasæt, der indeholder værdier opnået på kun 2 tidspunkter (f.eks. område under plasma B-alanin-kurven) vil blive analyseret ved hjælp af Students t-test for afhængige prøver, hvis datafordelingen er normal. Hvis datafordelingen ikke er normal, vil vi bruge Wilcoxons tegntest til par. Normaliteten af ​​datafordelingen vil blive vurderet kvalitativt ved hjælp af Q-Q Plot. Fire forskellige kovariansmatrixstrukturer vil blive testet for hvert datasæt. Det Schwarz-Bayesianske kriterium (laveste BIC-værdi) vil blive brugt til at vælge den matrix, der bedst passer til hvert datasæt. Hypotesestyret kontrastanalyse af en enkelt frihedsgrad vil teste specifikke effekter inden for og mellem forhold. Størrelsen af ​​Cohen-effekten (D) vil blive beregnet for alle variable. Signifikans vil blive accepteret, hvis p<0,05.